يوفر بروتوكولنا طريقة مفصلة لتحريض موثوق به وتصنيف شامل لخلل الحركة الناجم عن ليفودوبا في نموذج الفئران لمرض باركنسون. الميزة الرئيسية لمقياس تصنيف خلل الحركة لدينا هي أنه يسمح بتحديد كمية كل من شدة حركة لا إرادية غير طبيعية معينة ومقدار الوقت الذي يقضيه في إظهار هذا السلوك. تعد النماذج الحيوانية التي يمكن الاعتماد عليها من خلل الحركة الناجم عن ليفودوبا حاسمة في تحقيق الهدف النهائي المتمثل في إيجاد علاجات فعالة لتقليل أو القضاء على الآثار الجانبية لدى الأفراد المصابين بمرض باركنسون.
ابدأ التحضير للتجربة عن طريق وزن الفئران أسبوعيا لحساب كمية الدواء المناسبة بناء على تغيرات الوزن. تزويد الفئران بعلاجات كاملة من الناحية التغذوية ومستساغة للغاية. في اليوم الأول من علاج L-DOPA ، نقل الفئران إلى مسكن واحد مزود بإثراء مؤسسي معتمد من لجنة رعاية واستخدام الحيوانات.
والحفاظ على الفئران في السكن الوحيد طوال الدراسة لتجنب تدخل الأقران في التقييمات السلوكية. في أيام تصنيف خلل الحركة ، قم بإزالة زجاجات المياه ورفوف الطعام والإثراء في القفص لتجنب التداخل مع التقييمات السلوكية ، ووضع الأقفاص على رف من الأسلاك الفولاذية بزاوية 45 درجة تقريبا ، ثم اقلب علامات التعريف لأعلى. قبل حقن L-DOPA ، أضف الحجم المناسب من محلول ملحي معقم إلى مزيج L-DOPA و benserazide المجفف بالتجميد مسبقا في قارورة العنبر ورجه جيدا لمدة 10 ثوان.
مباشرة بعد التحضير ، املأ الحجم المطلوب من مزيج L-DOPA-Benserazide لكل في محاقن فردية مثبتة بإبرة قياس 26 وقم بتسمية كل حقنة بهوية فردية. بعد إحضار القفص الأول إلى مقعد الحقن ، قم بإزالة الفئران من قفصها لوضعها على سطح الحقن. استخدم اليد غير المهيمنة لكبح جماح رأس وكتفي الفئران مع راحة اليد على السطح وتثبيت الجلد على الظهر فوق الكتف بالإبهام والسبابة.
استخدم اليد المهيمنة لحقن حجم L-DOPA في المساحة تحت الجلد بين الأصابع ، مع الحفاظ على الإبرة موازية للجسم لتجنب الحقن العضلي. بعد الحقن ، حرك الفئران في القفص. بعد ذلك ، اضبط المؤقت لمدة دقيقة إلى دقيقتين وكرر الإجراء بحقن فأر واحد كل دقيقة إلى دقيقتين حتى يتم حقن جميع الفئران.
في يوم التصنيف، ضع جهاز توقيت بجوار القفص لمراقبة خلل الحركة الناجم عن ليفودوبا أو شدة سلوك LID مع تقدير تكرار أي سلوك معين خلال فترة التصنيف. قم بتقييم شدة وتواتر حركات خلل الحركة وفرط الحركة بما في ذلك البداية الأولية لسلوك LID وسلوك الذروة ومرحلة الانخفاض في العدد المطلوب من النقاط الزمنية. إذا كنت تستخدم فواصل تقييم دقيقة واحدة، فقم بتعيين مؤقت لمدة دقيقة واحدة لتقييم الفئران الأولى ومواصلة التقييم من خلال جميع الفئران على فترات دقيقة واحدة.
تم تصنيف تصنيف LID للسلوكيات اللاإرادية غير الطبيعية في الفئران الباركنسون لتشمل شدة وتواتر السلوكيات. لوحظت مجموعة من الحركات اللاإرادية غير الطبيعية ، بما في ذلك السلوكيات الخلل التوتر وفرط الحركة والنمطية في الفئران. يقدم التحليل التمثيلي مثالا على البيانات المقدمة كجرعة ذروة LID على مدار الجدول الزمني التجريبي بأكمله وجدول الجرعات.
تم تعريف جرعة الذروة LID على أنها الوقت الذي كان فيه متوسط درجة LID للمجموعة هو الأكبر. بالإضافة إلى ذلك ، تم فحص بيانات تصنيف LID خلال كل دورة زمنية يومية للتصنيف بتركيزات L-DPOA مختلفة مع المجموعات مجتمعة ورسمها كحيوانات فردية. يمكن استخدام أنسجة ما بعد الوفاة من الأشخاص الذين تم تقييمهم سلوكيا لاستكشاف الآليات الجزيئية المرتبطة بخلل الحركة الناجم عن ليفودوبا ، وتأثير التدخلات العلاجية على هذه الآليات الجزيئية.
كانت النماذج الحيوانية لخلل الحركة الناجم عن ليفودوبا مفيدة في توضيح العديد من الآليات التي يعتقد أنها تكمن وراء هذا المرض السلوكي. وقد أدى هذا الفهم إلى تقييم ما قبل السريري والسريري للعديد من الأهداف.
