دراسة بدء موت الخلايا باستخدام المجهر الرقمي

للبدء ، انقل نباتات البطاطس المصابة بالفيروس إلى غرفة نمو يتم الحفاظ عليها عند 22 درجة مئوية. اختر نباتا للمراقبة واستخدم شريطا لاصقا لشل حركة الورقة الملقحة الثانية بالكامل. بعد ذلك ، قم بتوصيل المجهر الرقمي بالكمبيوتر وابدأ تشغيل برنامج التقاط الصور.

ضع الورقة تحت المجهر. ثم استخدم القرص للتركيز على سطح الورقة. لضبط إعدادات الكاميرا، انقر فوق زر الإعدادات.

الآن اضبط السطوع على 64 ، والتباين على 14 وتدرج اللون على الصفر. بعد ذلك ، اضبط توازن اللون الأبيض ، ثم اضبط التشبع على 47 ، والحدة على الصفر وجاما على خمسة. انقر على أيقونة التقاط الصورة وحدد خيار الفيديو المنقضي زمنيا.

بعد ذلك ، قم بتعيين التقاط الصور لكل 15 دقيقة لمدة 24 ساعة. اضغط على زر البدء لبدء التقاط الصورة. لحفظ الصور الملتقطة ، حدد جميع الصور وانقر فوق رمز الحفظ.

اختر الآن خيارات التصدير ، ثم اضبط النقاط في البوصة على الحد الأقصى. بمجرد الحفظ ، احذف جميع الصور من البرنامج. لتحرير الصور ، قم بتشغيل برنامج تحرير مثل ImageJ.

انقر فوق ملف ، ثم حدد استيراد ، واختر تسلسل الصور لاستيراد التسلسلات الزمنية للصور من مجال رؤية واحد. الصق مسار دليل الصور المحفوظة ، واضغط على موافق. بمجرد اكتمال التحويل ، ستقوم ImageJ تلقائيا بتشغيل مشغل فيديو داخلي يعرض الفيديو النهائي.

انقر فوق ملف ، ثم احفظ باسم وحدد تنسيق AVI لتصدير ملف الفيديو. عند فتح نافذة صغيرة ، اضبط معدل الإطارات على 0.3 إطارا في الثانية ، ثم اضغط على موافق لحفظ الفيديو كملف AVI. تم استخدام نباتات البطاطس الملقحة التي يبلغ عمرها ثلاثة إلى أربعة أسابيع مع ما لا يقل عن ثلاثة إلى أربعة أوراق مكتملة النمو للتحليل المجهري الرقمي.

لوحظت نفس المنطقة على الورقة الملقحة كل 15 دقيقة لتحديد حدوث الآفة وتمددها بمرور الوقت. في 14 ساعة من الملاحظة ، لم تكن هناك آفة مرئية. بعد حوالي 90 دقيقة ، تم تسجيل آفة مرئية.

بدأت الآفة في التوسع بعد ساعتين ، واستمرت في التوسع خلال الساعات الثماني والنصف التالية.