먼저 바이러스에 감염된 감자 식물을 섭씨 22도로 유지되는 생장실로 옮깁니다. 관찰할 식물을 선택하고 접착 테이프를 사용하여 두 번째 접종된 잎을 완전히 고정시킵니다. 그런 다음 디지털 현미경을 컴퓨터에 연결하고 이미지 캡처 소프트웨어를 실행합니다.
나뭇잎을 현미경 아래에 놓습니다. 그런 다음 다이얼을 사용하여 잎 표면에 초점을 맞춥니다. 카메라 설정을 조정하려면 설정 버튼을 클릭합니다.
이제 밝기를 64로, 대비를 14로, 색조를 0으로 설정합니다. 그런 다음 화이트 밸런스를 조정한 다음 채도를 47로, 선명도를 0으로, 감마를 5로 설정합니다. 이미지 캡처 아이콘을 클릭하고 타임랩스 비디오 옵션을 선택합니다.
그런 다음 총 24시간 동안 15분마다 이미지 캡처를 설정합니다. 시작 버튼을 눌러 이미지 캡처를 시작합니다. 캡처한 이미지를 저장하려면 모든 이미지를 선택하고 저장 아이콘을 클릭합니다.
이제 내보내기 옵션을 선택한 다음 인치당 도트 수를 최대로 설정합니다. 저장되면 프로그램에서 모든 이미지를 삭제하십시오. 이미지를 편집하려면 ImageJ와 같은 편집 소프트웨어를 실행하십시오.
file(파일)을 클릭한 다음 import(가져오기)를 선택하고 image sequence(이미지 시퀀스)를 선택하여 단일 시야에서 이미지의 시간 시퀀스를 가져옵니다. 저장된 사진 디렉토리의 경로를 붙여넣고 확인을 누릅니다. 변환이 완료되면 ImageJ는 완성된 비디오를 표시하는 내부 비디오 플레이어를 자동으로 시작합니다.
파일을 클릭한 다음 다른 이름으로 저장하고 AVI 형식을 선택하여 비디오 파일을 내보냅니다. 작은 창이 열리면 프레임 속도를 0.3FPS로 설정한 다음 확인을 눌러 비디오를 AVI 파일로 저장합니다. 적어도 3-4개의 완전히 발달된 잎을 가진 3-4주 된 접종 감자 식물을 디지털 현미경 분석에 사용했습니다.
접종된 잎의 동일한 부위를 15분 간격으로 관찰하여 시간 경과에 따른 병변 발생 및 확장을 확인했습니다. 14시간 관찰 결과, 병변은 보이지 않았다. 약 90분 후, 눈에 띄는 병변이 기록되었다.
병변은 2시간 후에 확장되기 시작했고, 그 후 8시간 30분 동안 계속 확장되었다.
