المقايسة القائمة على نقل طاقة الرنين للتلألؤ الحيوي (BRET) لقياس تفاعلات CRAF مع 14-3-3 بروتينات في الخلايا الحية

ينصب التركيز الأساسي لبحثنا على الكشف عن نقاط الضعف الجديدة في مسار كيناز Ras-MAPK من خلال دراسة الطفرات المرتبطة بالأمراض النادرة بداخله. لقد طورنا مؤخرا مقايسة أخرى قائمة على BRET لقياس الأنشطة المثبطة التلقائية لكينازات RAF في الخلايا الحية. الأهم من ذلك ، كان هذا الفحص ضروريا لتوصيف مجموعة من طفرات الخط الجرثومي النادرة في المجال الغني بالسيستين BRAF ، مما يدل على الأهمية الحاسمة لهذا المجال للحفاظ على تثبيط BRAF الذاتي ولمنع النشاط البيولوجي التأسيسي BRAF.

يقيس هذا الفحص تفاعلات 1433 بروتينا مع RAF kinase CRAF ، وتلعب هذه التفاعلات أدوارا أساسية في التوسط في وظيفة RAF في كل من التطور والمرض. بالإضافة إلى ذلك ، فإن هذا الفحص جنبا إلى جنب مع المقايسات المحددة مسبقا لقياس تثبيط RAF التلقائي وتفاعل RAF-RAF يشكل الأساس لمجموعة أدوات لتشريح الآليات التنظيمية لكينازات RAF في الخلايا الحية.