基于生物发光共振能量转移 （BRET） 的测定法，用于测量 CRAF 与活细胞中 14-3-3 蛋白的相互作用

我们研究的主要重点是通过研究罕见病相关突变来发现 Ras-MAPK 激酶通路中的新脆弱性。我们最近开发了另一种基于 BRET 的测定法，用于测量活细胞中 RAF 激酶的自身抑制活性。重要的是，该测定对于表征 BRAF 富含半胱氨酸结构域中的一组罕见种系突变至关重要，这证明了该结构域对于维持 BRAF 自身抑制和防止组成型 BRAF 生物活性至关重要。

该测定法测量 1433 种蛋白质与 RAF 激酶 CRAF 的相互作用，这些相互作用在介导发育和疾病中的 RAF 功能中起着重要作用。此外，该测定与先前建立的用于测量 RAF 自身抑制和 RAF-RAF 相互作用的测定相结合，构成了剖析活细胞中 RAF 激酶调节机制的工具包的基础。