口鼻瘘小鼠模型的建立

摘要

本文概述了建立具有口鼻瘘的小鼠模型的分步程序。口鼻瘘是通过采用加热的眼科烧灼术破坏硬腭的中线部分而形成的，导致口腔和鼻腔之间形成开口。

摘要

本研究提出了一种利用加热眼科烧灼术开发研究口鼻瘘的可行模型的方法。采用C57BL/6小鼠建立口鼻瘘（ONF）模型。为了产生ONF，小鼠被麻醉，固定，并暴露它们的硬腭。在手术过程中，使用眼科烧灼术在硬腭中线诱导 2.0 x 1.5 mm 的全层粘膜损伤。控制ONF的大小并尽量减少出血以确保实验成功至关重要。在术后第 7 天对 ONF 模型的有效性进行了验证，包括解剖学和功能评估。口腔内鼻中隔的存在以及注射到口腔时从鼻孔流出的无菌水证实了ONF模型的成功建立。该模型展示了实用且成功的口鼻瘘，其特点是死亡率低、体重变化显着且 ONF 大小变化最小。未来的研究可能会考虑采用这种方法来阐明腭伤口愈合的机制，并探索口鼻瘘的新疗法。

引言

口鼻瘘 （ONF） 是口腔和鼻腔之间的异常开口，临床表现为从肺泡突到悬雍垂的结构区域缺陷，通常作为腭裂修复后的并发症发生¹.ONF 患者会出现食物反流、发音障碍和腭咽功能受损，显着影响他们的生活质量 ^2,3,4。术后 ONF 的发生率在 2.4% 至 55% 之间，这是由于裂隙宽度、Veau 类型和手术方法⁵、⁶、^7、8 等因素造成的。此外，ONF修复后的复发率很高，从0%到43%^不等9。

最近，几种新的治疗方法在ONF领域显示出前景，包括不同的材料、药物和新技术10,11,12,13,14,15,16,17。

研究方案

本研究中的所有动物手术均由四川大学华西口腔医学院伦理委员会审查批准。本研究采用成年C57BL/6小鼠（雌性）。

1. 手术准备

1. 收集手术所需的手术器械：生发器，眼科烧灼器，显微外科剪刀，显微外科镊子，注射器和针头（26g×0.63英寸）（图1A，B）（见材料表）。
   注意：在外科手术之前，将手术器械（包括眼科烧灼器、显微外科镊子和显微外科剪刀）高压灭菌，在 102.9 kPa （1.05 kg/cm²） 和 121 °C 下高压灭菌 20 分钟。
2. 收集所需的手术用品：手术单、乳胶手套、无菌棉、无菌床单、无菌金属箔、作为手术平台的泡沫板、橡皮筋（可以通过撕开医用乳胶手套获得）和胶带（图 1C）（见 材料表）。
   注意：为每只小鼠使用一套单独的耗材，包括用于手术区域的注射器和无菌片。
3. 使用酒精湿巾清洁手术区域和器械（光源、泡沫板和温度维持装置，见 材料表）。用无菌金属箔盖住手术过程中可能需要的器械的旋钮和把手。
4. 无菌地打开各个器械，并小心地将它们放置在手术区域。激活发芽剂（参见

讨论

研究人员探索了治疗 ONF¹⁰、11、12、13、14、15、^16、17 的各种材料、药物和新技术。随着外科手术的进步，ONF的发病率和复发率已经降低。然而，由于该疾病的独特性，临床上ONF患者的数量有限，?.......

材料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Germinator	Electron Microscopy Sciences	66118-20	Heating and disinfection equipment
Latex gloves	Allmed		or similar
Lights	Olympus	A1813
Meloxicam	MedChemExpress	HY-B0261	crushed; 5 mg/kg
Microsurgical instruments (scissors and tweezers)	Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.	M-Y-0087	Surgical instrument
Ophthalmologic cautery	Suqian Wenchong Medical Equipment Co.	1.00234E+13	Surgical instrument
Sterile cotton,	Yancheng Begu Technology Co.		or similar
Sterile metal foil	Biosharp		or similar
Sterile sheets	3M	XH003801129	or similar
Surgical drapes	Yancheng Begu Technology Co.		or similar
Syringes	Yancheng Begu Technology Co.	S-015301	or similar
Tape	Bkmamlab		or similar
Temperature maintenance device	Harvard Apparatus	LE-13-2104
Zoletil50	Virbac		80 mg/kg