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この記事について

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  • プロトコル
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  • 謝辞
  • 資料
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  • 転載および許可

要約

この記事では、口腔鼻腔瘻のあるマウスモデルを確立するための段階的な手順を概説します。口腔鼻瘻は、加熱された眼科焼灼を使用して硬口蓋の正中線部分を損傷し、口腔と鼻腔の間に開口部を形成することによって作成されました。

要約

この研究は、口腔瘻を調査するための実行可能なモデルを開発するために加熱された眼科焼灼を利用する方法を提示します。C57BL/6マウスを用いて、口腔鼻腔瘻(ONF)モデルを確立した。ONFを作製するために、マウスに麻酔をかけ、固定し、硬口蓋を露出させた。外科的処置中、眼科焼灼を使用して硬口蓋の正中線に2.0 x 1.5mmの全層粘膜損傷が誘発されました。実験を成功させるためには、ONFのサイズを制御し、出血を最小限に抑えることが重要でした。ONFモデルの有効性の検証は、解剖学的評価と機能的評価の両方を含む、術後7日目に実施されました。口腔内に鼻中隔が存在し、口腔内に注射した際の鼻孔からの滅菌水の流出により、ONFモデルの確立に成功しました。このモデルは、死亡率が低く、体重が有意に変化し、ONFサイズの変動が最小限であることを特徴とする、実用的で成功した口腔鼻腔瘻を実証しました。今後の研究では、口蓋創傷治癒のメカニズムを解明し、口腔鼻腔瘻の新しい治療法を探求するために、この方法論の採用を検討する可能性があります。

概要

口腔と鼻腔の間の異常な開口部である口腔瘻(ONF)は、臨床的には歯槽突起から口蓋垂までの構造領域の欠損として現れ、口蓋裂修復後の合併症として一般的に発生します1。ONFの患者は、食物逆流、構音障害、および咽頭機能障害を経験し、生活の質に大きな影響を与えます2,3,4術後ONFの割合は、裂け目の幅、Veauタイプ、および手術方法5,6,7,8などの要因により、2.4%から55%の範囲です。さらに、ONF修復後の再発率は0%から43%の範囲で高くなっています9

最近、さまざまな材料、薬物、および新しい技術を含む、いくつかの新しい治療法がONFの分野で有望であることが示されています10,11,12,13,14,15,16,17。<....

プロトコル

この研究のすべての動物手順は、四川大学西中国口腔病学学校の倫理委員会によってレビューおよび承認されました。本研究では、成体C57BL/6マウス(雌)を用いた。

1.手術の準備

  1. 手術に必要な手術器具を集めます:発芽器、眼科用焼灼、顕微手術用ハサミ、顕微手術用ピンセット、注射器、針(26 g x 0.63インチ)(図1A、B)( 材料表を参照)。
    注意: 外科的処置の前に、眼科用焼灼、マイクロサージェリーピンセット、マイクロサージェリーハサミなどの手術器具を102.9 kPa(1.05 kg / cm2)および121°Cで20分間オートクレーブします。
  2. 手術用ドレープ、ラテックス手袋、滅菌綿、滅菌シート、滅菌金属ホイル、手術用プラットフォームとしての発泡スチロールボード、輪ゴム(医療用ラテックス手袋を引き裂くことで入手できる)、テープ(図1C)( 材料表を参照)など、必要な手術用品を集めます。
    注意:手術野用の注射器や滅菌シートなど、マウスごとに個別の消耗品セットを使用してください。
  3. 手術部位と器具(光源、発泡スチロールボード、温度維持....

代表的な結果

この実験法の実現可能性と安定性を評価するために、10匹のマウスで同様の手順を実行し、死亡率、創傷サイズの変化、体重、および組織学的分析に関する観察を行いました。マウスは7日目に安楽死させた。

この手順は低い死亡率を示しました。図1A-Cに示されている眼科焼灼と発芽器は、この実験で使用された主要な器具.......

ディスカッション

研究者は、ONF 10、11、12、13、14、151617を治療するためのさまざまな材料、薬物および新しい技術を探求してきました。外科的処置の進歩により、ONFの発生率と再発は減少しています。し.......

開示事項

著者は何も開示していません。

謝辞

本研究は、四川大学華西口腔病院研究開発プログラム(RD-02-202107)、四川省科学技術支援プログラム(2022NSFSC0743)、四川省ポスドク科学基金会(TB2022005)のH. Huangへの助成金の支援を受けて行われました。

....

資料

NameCompanyCatalog NumberComments
GerminatorElectron Microscopy Sciences 66118-20Heating and disinfection equipment
Latex glovesAllmedor similar
LightsOlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261crushed; 5 mg/kg
Microsurgical instruments (scissors and tweezers)Jiangsu Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087Surgical instrument
Ophthalmologic cauterySuqian Wenchong Medical Equipment Co.1.00234E+13Surgical instrument
Sterile cotton,Yancheng Begu Technology Co.or similar
Sterile metal foilBiosharpor similar
Sterile sheets3MXH003801129or similar
Surgical drapesYancheng Begu Technology Co.or similar
SyringesYancheng Begu Technology Co.S-015301or similar
TapeBkmamlabor similar
Temperature maintenance deviceHarvard Apparatus LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 mg/kg

参考文献

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679 (2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

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