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毛细管电泳 (CE)

Overview

资料来源: 实验室的博士 B.吉尔 Venton-弗吉尼亚大学

毛细管电泳 (CE) 是一种分离技术,分离分子大小和电荷的电场中。CE 被执行的一个小玻璃管,称为充满了电解质溶液的毛细管。分析物分隔由于电泳迁移率,随电荷、 溶剂粘度和大小的差异。传统在凝胶电泳是受因为焦耳热效应会毁了这种凝胶,分离可以应用的电压量的限制。毛细血管表面区域卷比大,因而散热更好。因此,应用毛细管电泳实验的电压都很大,经常 10,000 — — 20,000 V。

毛细管电泳是用于高性能的分色。与高效液相色谱法相比,CE 分离通常是更快、 更高效。然而,毛细管电泳效果最佳分离带电的分子,这并不是限制的高效液相色谱法。行政长官有较大的峰值容量比高性能液相色谱法 (HPLC),意思分色更高效、 更多的山峰可以检测到。该仪器可以非常简单。然而,高效液相色谱法是更多功能和很多的固定和移动阶段有针对不同种类的分子。

Procedure

1.行政长官仪表安装程序

  1. 打开 CE 仪器和计算机。使用计算机软件,打开光源紫外分析允许它暖和起来。一些软件有指示器灯可供使用时 (灯图标变成彩色)。
  2. 使方法文件。设置运行 CE 的重要参数。在这种分析的墨盒和样品的储存温度是 35 ° c。紫外检测波长是 214 nm。
  3. 写一个时间程序。程序通常由冲洗步骤 (清洁前分析毛细管)、 注射的步骤,然后电泳步骤组成。冲洗的步骤,执行 2 冲洗 1 分钟使用 20 磅/平方英寸的压力。第一次漂洗是用 NaOH,有助于确保在毛细血管壁上的硅烷醇是并去质子。第二次冲洗是与运行缓冲区 (这里 0.025 M 硼酸缓冲) 以确保毛细管左平衡与缓冲区。
  4. 注射压力注射用于 0.5 磅/平方英寸 5 s。
  5. 电泳法的步骤,条件是分离电压: 20 千伏,时间: 5 分钟,正常的极性。每一步,也表明哪瓶是入口,哪瓶是出路。保存方法文件后输入所有的参数。

2.标准和苏打水样品的制备

  1. 使水中的阿斯巴甜,咖啡因和苯甲酸 50

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Results

洗脱收集饮食百事可乐和百事可乐样品分别显示在图1和图2。咖啡因、 阿斯巴甜,和苯甲酸的三峰饮食百事可乐中观察和有类似迁移时间为标准。定期的百事可乐,咖啡因峰是存在,但不是阿斯巴甜和苯甲酸的高峰。行政长官分析是快速迁移时间只有 3-4 分钟。

咖啡因的校准曲线如图 3所示。这条曲线可以用于计算每个样本中的咖啡因浓?...

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Application and Summary

毛细管电泳用于很多专业分色。例如,它用于在制药行业质量检测,以确保没有侧产品或烟幕。CE 是分离药物与基本的氨基组,因而这种药物不会坚持对毛细管、 毛细管的墙壁可以由中性与酸性 pH 特别有用。

CE 模式也被用于人类基因组测序和分离 DNA。这种模式的 CE 是毛细管凝胶电泳和对于这些分色,一种聚合物注入 CE 毛细管。聚合物给出了附加分离模式的基于大小,较小...

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Tags
Capillary ElectrophoresisCEChemical AnalysisSeparate MoleculesElectric FieldSizeChargeSub millimeter Diameter TubeCapillaryFlowing Electrolyte SolutionVelocityChargeSizeSolvent s ViscosityResolutionHigh performance Liquid ChromatographyEfficiencySensitivity

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0:00

Overview

1:06

Principles of Capillary Electrophoresis

3:19

CE Instrumentation Setup

4:26

Preparation of the Standards and Soda Samples

5:23

Running the Samples

6:50

Applications

8:26

Summary

此集合中的视频:

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