资料来源: 实验室的博士 B.吉尔 Venton-弗吉尼亚大学
(紫外-可见) 的紫外-可见光谱法是最受欢迎的分析技术之一,因为它是非常多才多艺,能够检测到几乎每一个分子。紫外-可见光谱法,紫外-可见光光通过样品和样品的光透射率衡量。从透光率 (T),可以作为 =-日志 (T) 计算吸光度。吸光度谱表明在不同波长的吸收的化合物。所用的任何波长处的吸光度是由于分子的化学结构。
紫外-可见可用于以定性的方式,确定官能团或通过匹配吸收谱确认身份的一种化合物。作为分析物的浓度与吸光度使用啤酒的法律,也可以以定量的方式,使用它。紫外-可见光谱法用于量化的 DNA 或蛋白质在示例中,水分析,以及对许多类型的色谱的检测器。化学反应动力学也通过随着时间的推移在重复的紫外-可见测量,测量与紫外-可见光谱。一般用分光光度计进行紫外-可见度量。紫外-可见也是非常受欢迎仪其他分析技术,如色谱法,因为它可以检测许多化合物。
通常,紫外-可见不是光的最敏感的光谱技术,因为不是光的很多被吸收在较短的路径长度。其他如荧光的光谱技术有较高的灵敏度,但他们不是作为一般适用,因为大多数分子不是荧光。紫外-可见到其他吸光度测量,如红外光谱相似的灵敏度。
1.校准分光计
2.执行吸收光谱
紫外-可见用于许多化学分析。它用来定量的大量蛋白质在溶液中,大多数蛋白质强烈吸收在 280 nm。图 3显示一个示例谱细胞色素 C,具有高吸光度亚铁血红素基团在 450,280。紫外-可见也用作为一种标准技术量化的 DNA 样本,因为所有的垒强烈吸收在 260 nm。RNA 和蛋白质也吸收在 260 nm,所以可以测量其他波长处的吸光度,检查是否有干扰。具体而言,蛋白质强烈吸收在 280 nm,所以 280/2...
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