首先,放置一个无毛面嵌入的镜像心脏和 20% 甲醇溶液一小时。依次将心脏转移到浓度增加的甲醇以使其脱水。在脱水过程中将溶液与心脏一起放在 60 赫兹的混合器上,将脱水的心脏转移到新鲜的 100% 甲醇溶液中。
用新鲜的 100% 甲醇替换溶液后,将心脏置于 4 摄氏度下 10 分钟。现在吸出解决方案。然后加入200毫升5%的过氧化氢甲醇溶液,漂白心脏。
将心脏在 4 摄氏度的溶液中孵育过夜。第二天,将培养后的样品转移到100%甲醇中,将其转移到含有66%二氯甲烷和33%甲醇的溶液中。心脏应该沉到小瓶的底部。
将样品放在混合器上三个小时,以确保心脏完全破损。最后,将样品在二苄基醚中孵育以进行折射率匹配。P1小鼠心脏的组织在四天内变得透明,而一只八周大的小鼠在七天内变得透明。