此方法可以帮助回答组织力学中的关键问题,例如细胞接触的特性在组织形态形成过程中在空间和时间上的变化。这种技术的主要优点是,它是弱侵入性,它与实时成像,如光片显微镜兼容。这种技术不需要将珠子注射到组织中。
通常用作 demiere 探头, 在其中得到泡沫, 我很兴奋。展示这个过程的将是工程师查德斯和拉斐尔克莱门特,研究科学家从我的地形水平。首先,在水平平原上为光片显微镜设置直立显微镜,然后准备激光和光学元件作为光学钳子。
接下来,将一根微升的500纳米荧光珠管在玻璃盒中,并加入10毫升蒸馏水。将库盘放在目标下的库架中,并调整目标的焦点,使目标接触水的表面。现在,打开集成开发环境 QT 创建器,用于控制采集软件。
打开微Rheo打开采集软件。配置文件,然后通过选择实时获取模式打开实时采集模式。在打开激光之前,戴上安全护目镜,然后将激光功率调整为一瓦,然后打开激光。
实时馈送现在应显示一个珠子被困在激光的焦点。如有必要,调整第二个望远镜镜头的位置,以观察聚焦的珠子。您可能还需要调整潜望镜操作的角度,以使图像中的珠子居中。
准备数据采集板和路边连接,如随附的文本协议图三所述。在光学快门接口上,将时间打开秒参数调整为 000.000,将时间闭合秒参数调整为 000.000,将模式参数调整为单个参数,将触发参数调整到 EXT。设置后,选择启用按钮。
在 QT 造物主中,打开 ot。配置文件以打开项目。更改自自自器中的输入和输出的名称。
cpp 文件,以匹配设置中使用的 MI 卡。最后,编译并运行光学钳子软件。在采集软件中,选择所需的曝光时间、游戏、两个图像之间的时间、要采集的图像数量和激光的功率。
然后,在光学钳子软件中,设置光学钳子参数,如下所示,以跟踪一个圆圈。接下来,选中 AI 参数框、向前重框,然后按下记录按钮,然后开始图像采集。打开光学钳子,选择生成按钮,让被困的珠子完成至少两个完整的圆圈,然后通过取消选择生成按钮停止光学钳子。
最后,停止图像采集。请注意,在默认文件夹中创建一个 tiff 影片和一个带电量计电压的文本文件。打开 Matlab,转到校准文件夹,并运行位置两个张力脚本脚本计算插值功能,将电图仪电压转换为光学陷印位置。
接下来,按照随附的文本协议设置校准影片。检查 X 和 Y 激光位置的插值映射是否由脚本正确计算和显示。检查地图中的白色区域,这些区域表示缺失的值。
如果有显著的白色区域,则使用新的校准影片重复操作。此处显示的校准影片表示具有足够数据的影片。使用派克或湿刷,在所需的阶段选择大约10个胚胎并对齐它们。
然后使用钻石标记笔将一块玻璃幻灯片切割为 10 比 20 由一个密耳。在切割片的一侧添加胶水,让它干燥20秒,然后把切割片翻过来,放在胚胎线上,粘在滑梯的边缘。接下来,在样品架上安装制备剂,将支架放在保温器中,然后将库盘放在 piso-electric 状态上,然后加注水。
首先,查找感兴趣的位置,并使用皮萨尔阶段将目标交汇点的中点移动到激光陷阱的位置。设置陷印的参数以实现垂直于接触线的振荡。还将相位设置为零,X 和 Y 方向的振幅设置为垂直于接触线的运动,并将振幅设置为 0.1 伏。
现在,使用快速帧速率(如每秒 10 帧)开始采集。成像开始后,按下 go 按钮打开光学钳子。成像完成后,关闭钳子,并停止图像采集。
在指定的文件夹中,将有一个影片和一个文本文件,其中包含采集期间的电能计电压。打开影片以观察收集的帧。在分析视频后,通过打开 Matlab 中的视频,测量组织样本中的刚度和张力。
在这里,使用绘图函数,将接口位置绘制为陷印位置的函数。然后,使用 Matlab 轻松安装免费工具箱执行数据的线性拟合。拟合坡度的反比,提供陷印位置在接口位置上的平均比率。
根据此信息,使用随附的文本协议中的方程来确定刚度和张力值。激光陷阱产生样品的正弦偏转,该偏转垂直于界面。此处显示为三个连续的接口位置。
这也可以记录为生成气候图的影片,并进一步分析以确定具有子像素分辨率的界面的位置。在这里,周期是五秒。在小变形的体制中,陷印和界面位置是成比例的。
接口偏转相对于陷印的幅度允许访问接口张力或刚度。此处显示拉取和释放实验的基础知识。当光学陷阱打开时,距离两个单元之间接口的中点大约一微米,接口会偏转到陷阱的位置。
然后,在所需时间后关闭陷阱。生成的图形可以与假设的真实逻辑模型(如 Maxwell 等模型)进行比较。不要忘记,使用红外激光可能非常危险,执行此过程时应始终采取佩戴护目镜等预防措施。
在这里,与最常见的用户从叮当钳为胚胎,该方法也可用于其他母体系统,如