神经刺激器引导注射自体干细胞近马左喉返神经

这种方法可以帮助回答有关基于干细胞的周围神经病变治疗关键问题，特别是Equine复发性喉神经病变。该技术的主要优点是干细胞收获是微创的，注射方法也可以转移到其他周围神经病变。这种技术的影响扩展到其他细胞类型的其他研究，因为干细胞可以在注射前分化成其他感兴趣的细胞。

这种方法的视觉演示至关重要，因为视频内窥镜控制喉部运动和神经刺激器技术的操纵可能很难学习。通过目视检查和目视，确定三头肌长头部的样本位点，在肘部点和肩部点之间的中线。使用电动剪子将大约两厘米的面积剃光，并应用由聚碘液体肥皂和酒精组成的手术磨砂，对裸露的皮肤进行一分钟的压缩。

使用25表针，皮下将一毫升2%利多卡因溶液注射到消毒区域的中心。用干净的抗菌手肥皂消毒并戴上无菌手套后，将半自动 14 量活检针放在一次性无菌窗帘上，然后拉动弹簧机构武装针头。将一个管和固定器组装在锁定的位置，形成一个三角体，并通过脱敏的皮肤垂直引入三角体，大约1.5厘米到底面肌肉组织。

然后取出托查特，将扰动器放在无菌窗帘上。将针头穿过管。接下来，将针头和针管通过皮肤切口引入肌肉，直到针头位于三头肌肌肉的长头中间。

然后释放活检针，将针头和管从肌肉中一起拔出，然后从管中取出针头。用一只手拉弹簧，同时用另一只手握住针头，直到标本在活检针尖可见。在助手的帮助下，打开含有样品介质的样品管，并使用 19 量的皮下针将微小肌肉片从活检针转移到取样介质中。

用螺钉盖合上管子，轻轻倾斜管两次，确保样品漂浮在介质中。然后重新武装活检针，并通过皮肤切口重新引入管状，再收集两到三个样本，直到获得大约20毫克的肌肉组织。注射细胞，在将细胞悬浮液加热至室温后，将一毫升细胞吸入两毫升注射器，并确认马处于指示完全水化的下头位置。

接下来，在左喉部区域上夹住一个二十厘米的面积，并在暴露区域应用多碘化物肥皂和酒精的手术磨砂。将灵活的标准视频内窥镜通过马的左侧向鼻咽处放置，调整内窥镜的位置，直到获得食内酮和表皮的完整视图。将刺激注射针连接到神经刺激器的负极。

将包含细胞悬浮液的注射器连接到注射管，并预加注管以将空气从系统中排出。将神经刺激器的正极连接到将粘在暴露皮肤区域的电极贴片上。用相当于管的预填充体积的无菌盐水溶液加载注射器，将刺激注射针引入喉部侧部，在一赫兹刺激模式下启动神经刺激器，在接近喉部侧侧时产生两毫安的电流。

轻轻地将针头移向复发性喉神经。一旦左软骨的诱拐运动可见，减少电流，直到运动消失，同时保持针到位。当观察到0.5毫安的运动反应损失时，保持针头的位置，并注射一毫升的自体干细胞，然后是预准备的盐水的整个体积。

在这个过程中，保持针头处于稳定的位置，因为与神经的距离由产生运动响应的电流控制，针头的微小运动可能会突然失去反应。然后取出针头和内窥镜，让马通过监测恢复。在以前的研究中，在取样期间或取样后没有观察到任何不良反应，在刺激或注射干细胞期间或之后也未观察到任何炎症。

此外，对喉功能的注射前得分与干细胞注射后第1天、第7天和28天获得的分数没有差异。在尝试此程序时，重要的是要记住，干细胞采集过程是非侵入性的，并允许在短时间内培养大量的自体异质干细胞。按照这个程序，其他方法，如注射预分化细胞，可以回答关于Schwann细胞是否更有可能有助于神经的确定其他问题。

该技术开发后，为再生医学的研究人员探索在Equine复发性喉神经病变中的干细胞应用铺平了道路。