Bu yöntem periferik nöropatilerin kök hücre tabanlı tedavisi ile ilgili anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir, Özellikle Equine Tekrarlayan Laringeal Nöropati için. Bu tekniğin başlıca avantajları kök hücre hasadının minimal invaziv olması ve enjeksiyon yönteminin diğer periferik nöropatilere de aktarılabildiğidir. Kök hücreler enjeksiyondan önce diğer ilgi hücrelerine farklılaştırılabildiği için, bu tekniğin etkileri diğer hücre tiplerinin diğer çalışmalarına da uzanır.
Gırtlak hareketlerinin video endoskopik kontrolü ve sinir stimülatör tekniklerinin manipülasyonu öğrenilebildiği için bu yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir. Triceps kasUzun uzun başındaki örnek bölgeyi, dirsek noktası ile omuz ucu arasındaki orta hat hakkında görsel muayene ve palpasyon ile tanımlayın. Yaklaşık iki santimetrelik bir alanı tıraş etmek için elektrikli makaslar kullanın ve maruz kalan cilde bir dakika boyunca poli-iyodür sıvı sabun ve alkol kompreslerinden oluşan cerrahi bir makas uygulayın.
25 gauge iğne kullanarak, subkutan dezenfekte alanın merkezine% 2 lidokain çözeltisi bir mililitre enjekte. Temiz antibakteriyel el sabunu ile dezenfekte edildikten ve steril eldivenler donattıktan sonra, tek kullanımlık steril perdeye yarı otomatik 14 gauge biyopsi iğnesi yerleştirin ve iğneyi silahlandırmak için yay mekanizmasını çekin. Bir trochar oluşturmak için kilitli pozisyonda bir kanül ve obturator monte ve duyarsız cilt aracılığıyla dik trochar tanıtmak, alt kas dokusu içine yaklaşık 1.5 santimetre.
Sonra trochar çıkarın ve steril bir perde üzerine obturator yerleştirin. İğneyi kanülden geçirin. Daha sonra, iğne ve kanül kas içine deri kesi yoluyla tanıtmak, iğne ucu triceps kas uzun başının ortasında olana kadar.
Sonra biyopsi iğnesi bırakın, birlikte kas iğne ve kanül çekin ve kanül den iğne çıkarın. Numune biyopsi iğnesinin ucunda görünür hale gelene kadar, diğer elinizle iğneyi tutarken bir elinizle yay çekin. Bir asistan yardımıyla, örnek orta içeren bir örnek tüp açın ve örnekleme ortamıiçine biyopsi iğneküçük kas parçası aktarmak için 19-gauge hipodermik iğne kullanın.
Tüpü vida kapağıyla kapatın ve numunenin ortamda yüzer olduğundan emin olmak için tüpü iki kez hafifçe yatırın. Daha sonra biyopsi iğnesini yeniden silahlandırın ve yaklaşık 20 miligram kas dokusu elde edilene kadar iki ila üç örnek daha toplamak için kanülü deri kesisinden yeniden tanıyın. Hücreleri enjekte etmek için, oda sıcaklığına hücre süspansiyon ısıtma sonra, iki mililitre şırınga içine hücrelerin bir mililitre aspire ve at tam sedasyon göstergesidir baş aşağı pozisyonda olduğunu onaylamak.
Daha sonra, sol laringeal bölge üzerinde yirmi on santimetrelik bir alanı kırpın ve maruz kalan bölgeye poli-iyodür sabunu ve alkolü cerrahi olarak uygulayın. Hem arytenoid kıkırdakların hem de epiglottisin tam görünümü elde edilene kadar endoskopun konumunu ayarlayarak atın sol naresinden nazofane doğru esnek bir standart video endoskopu yerleştirin. Uyarım enjeksiyon iğnesini sinir stimülatörün negatif elektrotuna bağlayın.
Hücre süspansiyonu içeren şırıngayı enjeksiyon hattına bağlayın ve havayı sistemden çıkarmak için tüpü önceden doldurun. Sinir uyarıcının pozitif elektrotunu, maruz kalan deri bölgesine yapışmış bir elektrot yamasına bağlayın. Tüpün önceden doldurulmuş hacmine eşit steril tuzlu çözelti hacmi ile bir şırınga yükleyin, ve gırtlak dorsolateral yönü doğru stimülasyon enjeksiyon iğnesi tanıtmak, bir Hertz stimülasyon modunda sinir stimülatör başlangıç, gırtlak dorsal lateral yönü yaklaşırken iki miliamper bir akım ile.
İğneyi yavaşça tekrarlayan laringeal sinire doğru hareket ettirin. Sol arytenoid kıkırdağın kaçırılma hareketi görünür olur olmaz, akıntıyı azaltın, hareket kaybolana kadar, iğneyi yerinde tutarken. 0.5 miliamperde motor tepkisi kaybı gözlendiğinde, iğne pozisyonunu koruyun ve otolog kök hücrelerin bir mililitresini enjekte edin, ardından önceden hazırlanmış tuzlu nun tüm hacmini takip edin.
Bu işlem sırasında iğneyi sabit bir pozisyonda koruyun, çünkü sinirlere olan uzaklık motor tepki üreten akımlar tarafından kontrol edilir ve iğnenin küçük hareketleri ani bir tepki kaybına neden olabilir. Sonra iğne ve endoskop çıkarın ve at izleme ile kurtarmak için izin. Önceki çalışmalarda, örnekleme sırasında veya sonrasında herhangi bir yan etki gözlenmemiş, kök hücrelerin uyarılması veya enjeksiyonu sırasında veya sonrasında herhangi bir iltihaplanma gözlenmemiştir.
Ayrıca, laringeal fonksiyonların enjeksiyon öncesi skorları ile kök hücre enjeksiyonu sonrası birinci, yedinci ve 28.günlerinde elde edilen skorlar arasında fark saptanmamamıştır. Bu prosedürü denerken, kök hücre toplama prosedürünün noninvaziv olduğunu ve kısa sürede çok sayıda otolog mezenkimal kök hücre nin kültürüne olanak sağladığını unutmamak önemlidir. Bu prosedürü takiben, diğer yöntemler, önceden diferansiye hücrelerinin enjeksiyonu gibi, Schwann hücrelerinin sinirlerin belirlenmesine katkıda bulunma olasılığı daha yüksek olup olmadığı hakkında ek soruları cevaplamak için yapılabilir.
Bu teknik, geliştirilmesinden sonra, rejeneratif tıp araştırmacıları için Equine Recurrent Laringeal Nöropati kök hücre kullanımını keşfetmek için yol açtı.
