שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח על טיפול מבוסס תאי גזע של נוירופתיות היקפיות, במיוחד עבור נוירופתיה הגרון חוזרת של סוסים. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם כי קציר תאי גזע הוא פולשני מינימלי, כי שיטת ההזרקה ניתן להעביר גם נוירופתיות היקפיות אחרות. ההשלכות של טכניקה זו להרחיב מחקרים אחרים של סוגי תאים אחרים, כמו תאי גזע ניתן להבדיל לתאים אחרים של עניין לפני ההזרקה.
הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית, כמו השליטה אנדוסקופית וידאו של תנועות הגרון ואת המניפולציה של טכניקות מגרה עצבי יכול להיות קשה ללמוד. זהה את אתר המדגם בראש הארוך של שריר הת"ת על ידי בדיקה ויזואלית ו דפיקות, בערך קו האמצע בין נקודת המרפק לנקודת הכתף. השתמש קוצץ חשמלי לגלח שטח של כשני על שני סנטימטרים, ולהחיל קרצוף כירורגי המורכב סבון נוזלי פולי יודיד ואלכוהול דוחס במשך דקה אחת לעור חשוף.
באמצעות מחט 25 מד, להזריק תת עורית מיליליטר אחד של 2%lidocaine פתרון למרכז האזור חיטוי. לאחר חיטוי עם סבון ידיים אנטיבקטריאלי נקי, ולובשות כפפות סטריליות, מניחים מחט ביופסיה חצי אוטומטית 14 מד על וילון סטרילי חד פעמי, ולמשוך על מנגנון האביב כדי לחמש את המחט. להרכיב cannula ו obturator בתצורה נעולה כדי ליצור trochar, ולהציג את trochar בניצב דרך העור רגיש, כ 1.5 ס"מ לתוך רקמת השריר underlaying.
לאחר מכן הסירו את הטרופר, וה מניחים את האובטור על וילון סטרילי. הצג את המחט דרך ה Cannula. לאחר מכן, להציג את המחט ואת cannula דרך חתך העור לתוך השריר, עד קצה המחט הוא באמצע הראש הארוך של שריר triceps.
ואז לשחרר את המחט ביופסיה, למשוך את המחט ואת cannula מתוך השריר יחד, ולהסיר את המחט מן cannula. משוך את המעיין ביד אחת תוך החזקת המחט ביד השנייה, עד שהדגימה הופכת גלויה בקצה מחט הביופסיה. בעזרת עוזר, לפתוח צינור מדגם המכיל את המדיום מדגם, ולהשתמש מחט hypodermic 19-מד להעביר את חתיכת השריר הזעירה ממחט הביופסיה לתוך מדיום הדגימה.
סגור את הצינור עם מכסה הבורג, והטה בעדינות את הצינור פעמיים כדי להבטיח שהדגימה צפה במדיום. לאחר מכן לחמש מחדש את המחט ביופסיה ולהחיות את cannula דרך החתך בעור כדי לאסוף שתיים עד שלוש דגימות נוספות עד כ 20 מיליגרם של רקמת שריר נרכשה. כדי להזריק את התאים, לאחר חימום ההשעיה התא לטמפרטורת החדר, שאפו מיליליטר אחד של תאים למזרק של שני מיליליטר ואשרו שהסוס נמצא במצב ראש למטה המעיד על גירוי מלא.
לאחר מכן, קליפ אזור עשרים על עשרה סנטימטרים מעל אזור הגרון השמאלי, ולהחיל קרצוף כירורגי של סבון פולי יודיד ואלכוהול לאזור החשוף. מניחים אנדוסקופ וידאו סטנדרטי גמיש דרך הנאר השמאלי של הסוס לכיוון nasopharynx, התאמת המיקום של אנדוסקופ עד תצוגה מלאה של שני הסחוסים arytenoid ואת epiglottis מתקבל. חבר את מחט הזרקת הגירוי לאלקטרודה השלילית של מגרה העצבים.
חבר את המזרק המכיל את מתלי התא לקו ההזרקה, ומלא מראש את הצינור כדי לשטוף את האוויר מחוץ למערכת. חבר את האלקטרודה החיובית של מגרה העצבים לטלאי אלקטרודה שיהיה דבוק לאזור העור החשוף. לטעון מזרק עם נפח של תמיסת מלח סטרילית שווה לנפח מראש של הצינור, ולהציג את מחט הזרקת גירוי לכיוון ההיבט הגבי של הגרון, מתחיל את מגרה העצבים במצב גירוי אחד הרץ, עם זרם של שני מיליאמפר על מתקרב ההיבט הגבי של הגרון.
הזז בעדינות את המחט לכיוון עצב הגרון החוזר ונשנה. ברגע שתנועת החטיפה של הסחוס השמאלי של האאריטנואידי נראית לעין, מקטין את הזרם, עד שהתנועה נעלמת, תוך שמירה על המחט במקום. כאשר נצפתה אובדן תגובה מוטורית ב-0.5 מיליאמפר, שמרו על תנוחת המחט והזריקו מיליליטר אחד של תאי הגזע האוטולוגיים, ואחריו את כל נפח התמיסת מלח המוכנה מראש.
לשמור על המחט במצב יציב במהלך תהליך זה, כמו המרחק אל העצבים נשלט על ידי הזרמים המייצרת תגובה מוטורית תנועות זעירות של המחט עלול לגרום לאובדן פתאומי של תגובה. לאחר מכן להסיר את המחט אנדוסקופ, ולאפשר לסוס להתאושש עם ניטור. במחקרים קודמים, לא נצפו תופעות לוואי במהלך הדגימה או לאחריה, וגם לא נצפתה דלקת במהלך או אחרי הגירוי או הזרקת תאי הגזע.
יתר על כן, אין הבדלים בין הציונים טרום ההזרקה של פונקציות הגרון, ואת הציונים שהושגו בימים אחד, שבע, ו 28 לאחר הזרקת תאי גזע נמדדו. בעת ניסיון הליך זה, חשוב לזכור כי הליך איסוף תאי גזע אינו פולשני ומאפשר את התרבות של מספר עצום של תאי גזע mesenchymal אוטולוגיים בזמן קצר. בעקבות הליך זה, שיטות אחרות, כמו הזרקת תאים מובחנים מראש, ניתן לבצע כדי לענות על שאלות נוספות על האם תאים שוואן נוטים יותר לתרום לקביעת העצבים.
לאחר התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים ברפואה רגנרטיבית לחקור את השימוש בתאי גזע בנוירופתיה של הגרון החוזר ונשנה.
