이 방법은 말초 신경병증의 줄기 세포 기지를 둔 처리에 관하여 중요한 질문에 대답하는 것을 도울 수 있습니다, 특히 말 재발성 후두 신경병증을 위해. 이 기술의 주요 장점은 줄기 세포 수확이 최소 침습적이며 주사 방법이 다른 말초 신경 병증으로 옮겨질 수 있다는 것입니다. 이 기술의 의미는 줄기 세포가 주입의 앞에 관심있는 그밖 세포로 분화될 수 있기 때문에, 그밖 세포 모형의 그밖 연구 결과로 확장합니다.
이 방법의 시각적 데모는 후두 운동의 비디오 내시경 제어 및 신경 자극기 기술의 조작을 배우기 어려울 수 있기 때문에 매우 중요합니다. 팔꿈치의 지점과 어깨의 점 사이의 중간선에 대한 육안 검사 및 심포션에 의해 삼두근 근육의 긴 머리에 샘플 사이트를 식별합니다. 전기 클리퍼를 사용하여 약 2센티미터 면적을 면도하고 폴리 요오드 액체 비누와 알코올 압축으로 구성된 수술 용 스크럽을 노출 된 피부에 1 분 동안 적용하십시오.
25 게이지 바늘을 사용하여, 피하 2%리도카인 용액의 1밀리리터를 소독 부위의 중앙에 주입한다. 깨끗한 항균 핸드 비누로 소독하고 멸균 장갑을 착용한 후 일회용 멸균 드레이프에 반자동 14 게이지 생검 바늘을 놓고 스프링 메커니즘을 당겨 바늘을 무장시합니다. 칸누라와 외운을 잠긴 자세로 조립하여 트로카를 형성하고, 약 1.5센티미터의 둔감한 피부를 통해 수직으로 트로카르를 도입한다.
그런 다음 트로카를 제거하고 외설을 멸균 커튼에 놓습니다. 캐뉼라를 통해 바늘을 소개합니다. 다음으로, 바늘의 끝이 삼두근 근육의 긴 머리 의 중간에 될 때까지, 근육에 피부 절개를 통해 바늘과 캐뉼라를 소개합니다.
그런 다음 생검 바늘을 풀어 주면 바늘과 캐뉼라를 함께 근육에서 꺼내 캐뉼라에서 제거합니다. 다른 손으로 바늘을 들고 있는 동안 한 손으로 스프링을 당기고, 생검 바늘의 끝에서 표본이 보일 때까지 당깁니다. 조수의 도움으로, 샘플 매체를 포함하는 샘플 튜브를 열고, 샘플링 매체로 생검 바늘에서 작은 근육 조각을 전송하는 19 게이지 피하 바늘을 사용합니다.
나사 캡으로 튜브를 닫고 튜브를 두 번 부드럽게 기울여 샘플이 매체에 떠 있는지 확인합니다. 그런 다음 생검 바늘을 다시 무장시키고 약 20 밀리그램의 근육 조직을 획득할 때까지 2~3개의 샘플을 더 수집하기 위해 피부 절개를 통해 캐뉼라를 다시 도입한다. 세포를 주입하려면, 실온에 세포 현탁액을 따뜻하게 한 후, 2 밀리리터 주사기로 세포의 1 밀리리터를 흡인하고 말이 전체 진정제를 나타내는 헤드 다운 위치에 있는지 확인합니다.
다음으로, 왼쪽 후두 부위에 20센티미터 의 면적을 클립하고, 노출 된 부위에 폴리 요오드 비누와 알코올의 외과 스크럽을 적용합니다. 말의 왼쪽 암흑을 통해 나소공스를 향해 유연한 표준 비디오 내시경을 배치하고, 아티노이드 연골과 후두계의 전체 보기가 얻어지날 때까지 내시경의 위치를 조정한다. 자극 주사 바늘을 신경 자극기의 음극에 연결합니다.
셀 서스펜션을 함유한 주사기를 주입 선에 연결하고 튜브를 미리 채우고 시스템에서 공기를 플러시합니다. 신경 자극기의 양극을 노출된 피부 부위에 달라붙는 전극 패치에 연결합니다. 튜브의 미리 채워진 부피와 동일한 멸균 식염수 용액의 부피로 주사기를 적재하고 후두의 등측측면을 향해 자극 주사 바늘을 도입하고, 한 Hertz 자극 모드에서 신경 자극기를 시작하여, 후두의 측측면에 접근하는 동안 2밀리암페어의 전류를 가진다.
바늘을 재발성 후두 신경쪽으로 부드럽게 움직입니다. 왼쪽 아리티노이드 연골의 납치 운동이 보이자마자 바늘을 제자리에 유지하면서 움직임이 사라질 때까지 전류를 줄입니다. 0.5 밀리암페어에서 모터 반응의 손실이 관찰되면, 바늘 위치를 유지하고, 자가 줄기 세포의 1 밀리리터를 주입하고, 미리 준비된 식염수의 전체 부피가 뒤따릅니다.
이 과정에서 바늘을 안정적으로 유지하며, 신경에 대한 거리가 모터 반응을 일으키고 바늘의 작은 움직임을 생성하는 전류에 의해 조절되기 때문에 반응의 급격한 손실을 생성할 수 있다. 그런 다음 바늘과 내시경을 제거하고 말이 모니터링을 통해 회복되도록 합니다. 이전 연구에서는, 어떤 불리 한 반응 샘플링 도중 또는 후에 관찰 되지 않은, 어떤 염증 동안 또는 줄기 세포의 주입 후 관찰 되지 않았습니다.
또한, 후두 기능의 전사 점수와 줄기세포 주입 후 1일, 7, 28일에 얻어진 점수 사이의 차이가 없다. 이 절차를 시도하는 동안 줄기 세포 수집 절차는 비침습적이며 짧은 시간에 엄청난 수의 자가 중간 엽 줄기 세포의 배양을 허용한다는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 절차에 따라, 사전 분화 된 세포의 주입 과 같은 다른 방법은 슈완 세포가 신경의 결정에 기여할 가능성이 더 높은지에 대한 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다.
개발 후, 이 기술은 재생 의학의 연구원들이 말 재발성 후두 신경 병증에서 줄기 세포 사용을 탐구하는 길을 열었습니다.
