危重病人全血内毒素血症检测的内毒素活性测定

败血症可导致多器官衰竭和死亡。内毒素是克阴性细菌的基本成分。内毒素循环水平升高可能识别出风险较高的患者，以发展更严重的疾病。

内毒素活性测定可用作全身性内毒素血症的简单、快速、可靠的生物标志物。早期发现这种毒素可能有助于临床医生治疗败血性休克患者。在败血症休克患者中，及早发现一种快速变化的情况可能会促使更快、更密集的生命支持治疗，从而可能带来更好的结果。

展示这个程序的将是丽莎·马蒂亚森，一个分子生物学家谁与我们的研究小组合作。要开始此过程，请设置 EA 测试套件并解包五种不同类型的管。使用管号控制管，在没有特定抗体的情况下测量患者嗜中性粒细胞的非特异性氧化爆发的基础活性。

使用管号二号，样品管，测量氧化爆裂对LPS抗体复合物的反应。使用第三管，Max管，测量患者嗜中性粒细胞的最大氧化爆发，以回应过量的内毒素。使用管号四，LPS管，作为外源内毒素的来源。

并使用管五，阿里克管，用于血液储存。在含有EDTA抗凝剂的无菌管中收集患者血液样本，并在运行 EA 测试之前在室温下储存。在开始测试之前，打开化学发光计和培养箱摇床，将孵化器加热到37摄氏度。

首先，将 EA 管放在管架中，然后拆下盖。使用组合管将一毫升的 EA 试剂从瓶子中转移到 1 号、2 号和 3 号管中，通过移液管的一侧。轻轻反转收集管20次，混合患者的血液样本。

然后，移液器0.5毫升的患者血液进入管4和管5。涡流管四号 10 秒。将带所有 EA 试管的管架放入培养箱摇床中。

合上盖子，在37摄氏度下孵育10分钟。在此之后，打开培养箱盖，从摇床中取出管架。涡流管五号。

使用无菌尖端，移液器40微升的管到管1号和2号，重复。涡流管四号。使用相同的移液器尖端，将40微升血液从4号管转移到3号管中，重复。

一个个旋转六个最后的试管。将管架放回孵化摇床中，然后合上盖子。将摇床设置为 100 rpm，然后启动运动 14 分钟。

将 EA 标记的芯片卡插入化学发光计，然后按"开始"。经过14分钟的孵育，按照化学发光仪上显示的说明进行操作。轻轻旋转每个管 10 秒钟，然后将其放在化学发光计的样品支架上。

打开样品抽屉，将1号管放入样品支架中。然后，关闭样品抽屉，等待相对光单元读数。重复此读取过程管 2 和 3 和所有重复，如文本协议中概述。

处理所有管材后，EA 结果将自动计算和打印。对需要测试的每个血液样本重复整个检测过程。将 EA 检测套件及其组件存放在原始密封包装中，温度在 2 至 25 摄氏度之间。

在这项研究中，进行内毒素活性测定，以检测危重病人全血内毒性血症。EA 值小于 0.40 EA 单位表示低内毒素活性水平，等于低循环 LPS 浓度，表示低风险进展到严重疾病状态。0.40 和 0.59 EA 单位之间的结果表明中间内毒素活性水平，这是严重败血症和败血性休克发展的中间风险。

等于或大于 0.60 EA 单位的结果表示内毒素活性水平高，这表示败血性休克和患者结果不佳的高风险。四号和五号管的血必须与正确的试管混合。必须格外小心，以遵循协议中指示的正确顺序。

每个管都是重复运行，可能导致这个阶段的错误。引入后，EA分析被提出为全身性低灌注患者风险分层的生物标志物。此外，它已被研究作为筛选测试，以选择患者的先进的血净化治疗策略。