我们独特的药物输送系统,在两种特定的短肽中使用20纳米金颗粒,可以稳定生理溶液中的金纳米颗粒,增强细胞吸收,从而有效地将肽或其他药物转化为细胞。我们的GNP肽杂交是易于合成和稳定。利用金纳米粒子肽杂交作为药物载体,可以有效、丰富地将肽药物转移到细胞中。
我们用 GNP/PKCi 杂交治疗肺部缺血-再灌注损伤。GNP 将 PKC 抑制剂肽引入细胞质。这种分娩方法能够减少更严重的肺损伤使用较低的PKCi剂量比其它分娩方法。
要开始此过程,请从零下 20 摄氏度的冰柜中取出肽,并在室温下解冻。使用微量表称每个解冻肽 0.01 克,将每种肽转移到单独的 50 毫升锥形管中。在P2管中加入18.74毫升的去水,在P4管中加入16.93毫升的去水。
将8.21毫升的50%乙酰酸二醇稀释在去维化水中添加到PKC三角洲抑制剂管中。短暂地涡旋肽溶液。然后将管子放入40兆赫的声波机中5分钟。
在此之后,将解决方案转移到生物安全柜。将 50 mL 圆锥管放入声子中 5 分钟至关重要。如果跳过此步骤,GNP/PKCi 将形成聚合。
将每一多肽溶液的一毫升转移到其新的50毫升锥形管中。在含有P2和P4的管子中加入19毫升的去化水。并在含有PKC三角洲抑制剂的管子中加入19毫升50%乙酰三叶酸。将 475 毫升的 P2 溶液、25 微升的 P4 溶液、500 微升的 PKC 增量抑制剂溶液加入到 15 毫升管中。
然后在同一管中加入9毫升20纳米GNP溶液。从生物安全柜中去除组合溶液,用铝箔包裹管子。将管子放在摇床上过夜。
第二天,将样品退回生物安全柜。将 GNP/PKCi 溶液的一毫升等分液转移到 1.5 毫升微管中。在微离心机时以15294倍g和4摄氏度离心,30分钟。
将微管重新转移到生物安全柜中,从每个管中去除超高动管,同时确保 GNP 颗粒不受干扰。根据所需的浓度,将每个颗粒重新排放到所需的溶剂中。要评估 GNP/PKCi 杂交溶解度,请将 0.5 毫升的 GNP/PKCi 溶液倒入应计式库中。
将库放在 UV-Vis 分光光度计上,并测试峰值吸收。在这项研究中,蛋白激酶C-delta抑制剂与金纳米粒子结合,形成GNP/PKCi杂交。在评估混合体的生物物理特性时,必须注意,因为金纳米粒子往往在溶剂中聚合。
当纳米粒子聚集时,溶液的颜色将从粉红色变成紫色。用UV-Vis分光光度计对样品进行分析,该光谱仪能够以高度的灵敏度进行检测。如果未聚合混合动力车,吸收的峰值应为 525 纳米。
如果 GNP 聚合,吸收峰值将向右移动。可以看到,当聚合形成时,增量光密度会降低。在制定 GNP 肽杂交体时,重要的是要记住肽与 GNP 溶液的比例应为 1 比 9。
此 GNP/PKCi 配方可用于肺以外的器官系统中的缺血-再灌注损伤。如果这些肽在N-1INus有半胱氨酸残留物,任何肽都可以附着在GNP上。这意味着GNP肽杂交可用于将其他肽药物运送到细胞中。
合理设计的肽是新技术,可以带来特定的蛋白质-蛋白质相互作用在这些细胞内。这项技术,在这里开发,可用于交付新的肽类药物或现有药物的改性版本。