一种三肽稳定的油酸纳米乳液

鉴于短肽序列的范围很广，这种方法可以扩展到许多其他纳米粒子设计。肽修饰可以使系统适合诊断目的。将抗癌铂金封装到具有可生物降解、低毒性稳定剂的药物中，与药物应用具有高度相关性。

卵巢癌的初步体内研究是有希望的，将进一步研究。首先，在60摄氏度的超纯水中悬浮50毫克的顺铂。将硝酸银溶液滴入顺铂溶液中，以300至400 RPM的转速在黑暗中60摄氏度搅拌混合物两小时。

之后，使用10%的重量盐酸，以确认溶液中没有自由银离子。如果添加盐酸后未产生额外的氯化银，则将混合物在重力为 3，220 倍的离心10分钟。去掉上清液，然后通过0.2微米注射器过滤器过滤。

然后，在铂金滤液中，将两到三滴到10个氯化物晶体中。如果悬架变成深棕色或橙色，铂金是存在的。接下来，在一毫升水中加入13.3毫克氢氧化钠，在60摄氏度的三毫升水中悬浮油酸94.2毫克。

在60摄氏度下搅拌混合物两小时。然后，关闭热量，在室温下继续搅拌16至24小时，以获得原油作为油性黄褐色沉淀物。将反应混合物在重力的3，220倍下离心10分钟，然后取出上一代。

在25摄氏度的旋转蒸发器上干燥产品。通过涡旋将原油悬浮在五毫升乙酰丙尼三叶草中，通过离心回收产品。重复此洗涤过程至少两次三次，以获得纯，油酸铂II结合作为淡黄色固体。

首先，将5.7克Fmoc保护的L-苯丙氨酸功能化王树脂浸泡在25毫升二甲基甲酰胺中一小时。然后，将树脂浸泡在 DMF 中 15 毫升 20% 管中，持续 5 分钟，同时以 80 RPM 的速度摇动，以解热胺。排空树脂并重复除保护 20 分钟。

之后用D0F和异丙醇清洗树脂。一旦分离保护被确认，加入Fmoc保护L-酪氨酸TBTU和DIPEA，搅拌混合物16至24小时，以执行耦合。用 DMF 和异丙醇清洗树脂。

执行凯撒测试，继续使用前文所述的去保护和清洗。夫妇和去保护Fmoc保护Lysine的方式相同。之后用D0F、IPA、甲醇、二氯甲烷和二乙醚清洗树脂。

留出一克 KYF 轴承树脂进行 FITC 改性。将剩余的树脂浸泡在95%的三氟乙酸中。2.5%三异丙基硅烷和2.5%水三小时，从树脂中切出三肽。

用二乙醚沉淀粗肽冷却至20摄氏度。在30至40毫升的冷二乙醚中离心，在真空中干燥三次沉淀物。接下来，将剩余的KYF树脂与120.1毫克6-乙酸甲酸混合在30毫升D分甲酸与TBTU和DIPEA中。

在室温下搅拌混合物16至24小时，以获得阿齐德改性三肽。然后，将253毫克的这种树脂与3.78毫克的固体铜（I）碘化物71.9毫克的丙丙基花环和2.24毫克的IPEA。让混合物在摇晃24小时时做出反应。

然后，彻底清洗 FITC 改性 KYF 轴承树脂。从树脂中切出 FITC 的 KYF，并像未经过修饰的三肽一样进行纯化。要开始制备纳米，将10毫克的油酸铂二结合在1.5毫升的 IPA 中。

将溶液绘制到 5 毫升注射器中，连接 20 量针，然后将注射器安装在反应区域的注射器泵上。将注射器泵设置为每分钟 0.1 毫升。对于使用 FITC 改性 KYF 的纳米乳液，在 20 毫升水中溶解 1 毫克 FITC 改性 KYF 和 1 毫克未改性 KYF。

对于未修改的 KYF 的纳米乳液，在 20 毫升水中溶解两毫克 KYF。将 FITC 修改或未修改的 KYF 溶液加热至 37 摄氏度。确保 KYF 溶液以约 400 RPM 的转速搅拌，并确保注射器与溶液对齐。

然后，启动注射器泵开始添加油酸铂二结合滴明智。添加偶联体后，将搅拌速度降低至 150 RPM，使溶液冷却至室温。继续搅拌 16 至 24 小时。

然后，将纳米乳化液集中在一个10，000道尔顿离心过滤器单元中。用四毫升的超纯水在离心过滤器单元中洗三次纳米乳液。然后把它储存在摄氏四度的水溶液中。

最终产品为KYF纳米粒子的蛋白石，以及用于FTIC改性纳米粒子的荧光。用未经修改的KYF准备的纳米乳液中的液滴是球形的，分散的，大小相对均匀。根据透射电子显微镜图像，核心直径约107纳米。

FITC改性纳米乳液，以绿色出现在这里，可以进入各种卵巢癌细胞系的细胞。虽然两种制剂的水动力直径在四个月的蓄水期间增加，但总体尺寸得到保留。此外，在20%的胎儿牛血清中孵育一天后，未观察到乳液的蛋白化。

乳液中铂金的释放速度最慢，为pH7.4，4小时后仅释放20.8%的铂金。随着pH下降，铂释放加速。含铂金的KYF涂层纳米乳液降低了这些卵巢癌细胞系的生存能力，其程度远远大于与临床相关的模拟类碳铂。

纳米化也显示出可比或更大的生存能力下降比顺铂在六个细胞系中的五个。KYF 涂层纳米乳液持续导致与油酸铂 II 结合剂相比，其可行性具有可比性或更大性。这是一种简单、有效的方法，用于在三肽基纳米粒子支架中封装疏水疗法。

短肽可生物降解，毒性低，对医学和生物技术具有重要意义。在烟罩下执行此程序，避免接触有机溶剂。铂油酸和KYF铂纳米乳液具有抗癌特性，因此应特别注意处理。

该方法在低纤维活性和设备方面很简单，但依赖于合成策略和基本化学概念的正确应用。我们的方法可以扩展，以提供其他小药物分子。纳米粒子芯由油酸组成，因此适用于疏水剂的封装。