茶是全世界最受欢迎的饮料之一。杀虫剂有时被用来保护茶树免受害虫的侵害。茶树中的酶可以为此制造一些系统杀虫剂。
然后通过氧化、水解或还原反应进行整合。植物细胞悬浮培养物可作为一种，容易研究植物代谢的农药行为。此方法有几个优点。
首先，可以在自由微生物条件下操作，从而避免微生物对农药降解的干扰。其次，它随时可以为我们提供恒定的材料。最后，在单个实验中也可以很容易地比较农药行为理论。
本研究从茶叶的可变颜色中建立茶细胞悬浮培养物。然后利用细胞悬浮液的最佳培养状态比较六种农药的耗散行为。这个实验将由焦伟庭和葛国勤进行。
这是我们的茶叶无菌植物，作为外植的来源。用剪刀沿着无菌叶子的中间翼切。然后，在培养皿中，将每半部分细分成约0.3倍0.3厘米的小片。
将无菌外植植物放在含有 2、4-D 和 KT 的 MS 视觉介质上。六种外植剂可以放在一个300毫升的烧瓶中。在黑暗中25摄氏度的恒定温度下培养叶子。28天后，选择第一代诱导卡卢斯，然后转移到新鲜的烧瓶。
在三到四个亚文化之后获得松散和可变的调用。在无菌条件下，使用无菌手术刀片将固体介质中的可变和松散的卡卢斯切成小块。我们大约三克的卡卢斯小片。
将调用放入包含 2、4-D 和 KT 的 B5 中。在黑暗中摇动的培养箱中，在恒定温度下培养液体细胞悬浮液。经过七到十天的栽培，取出文化烧瓶，让它们站立几分钟。以上流剂作为这里的沉积物将迫使培养到新鲜的介质。
拆下沉淀的大型调用。在四到三个亚培养周期（每个28天）后，获得最终精心梳理的细胞悬浮培养。将活细胞样本在一百摄氏度下保持十分钟，作为对照细胞，然后进行活体染色。
在6000G下将所有细胞悬浮培养物离心8分钟，取出上流液，然后将细胞悬浮在5毫升PBS缓冲液中，然后用手摇动1分钟。加入 2.5 毫升的 TTC 溶液，然后再次握手。在13摄氏度的站立培养箱中孵育混合物一小时。
添加四百微升的等分，对所有新烟碱硫胺素、乙酰胺、伊米达克洛普里德和伊米德普罗西酶的库存溶液进行灭菌。全部到有机第一阶段。二甲酸酯和甲基酸盐分别进入细胞悬浮培养。
在恒定温度下用杀虫剂培养细胞悬浮液样本，并摇动孵化器速度。在不同的日子采集样品。要测试含有新烟碱的样品，请去除同质细胞培养的1毫升等同。
放入1.5毫升塑料离心管中，在4000G下离心两分钟。通过 HPLC-UV 和 UPLC QTOF 分析之前，通过 0.22 微米滤膜传递上清液。要测试样品，请继续有机第一阶段。
取出细胞培养的500微升等分，放入35毫升离心管或1.5毫升塑料离心管中。将 0.1 克氯化钠和 5 毫升溶剂萃取到 500 微升样品的 35 毫升离心管中。漩涡混合物一分钟。
然后让他们休息10分钟。将 2.5 毫升上充液放入 10 毫升玻璃管中，在 14 摄氏度下使用氮蒸发器蒸发至近乎干燥。用一毫升丙酮溶解残留物。
在GC-FPD分析之前，Vortex通过0.22微米滤膜进行一分钟。在四升塑料锅中放入五株植物十五天。将每毫升零微克或每毫升100微克的硫胺酮或二甲基苯甲苯分别加入到塑料罐中。
根据前一种方法准备完整的植物样品，除了预浸泡，然后通过轨道rap质谱法进行分析。使用 HPLCUV 检测 254 纳米波长的硫胺素和乙酰胺的含量和代谢产物，以及波长为 270 纳米的 Imidacloprid 和 Imideproxase 的含量和代谢产物。使用管柱通过 GC-FPD 检测二甲酸酯和甲基酸盐的含量。
使用带碳-18柱的 UPRC QTOF 检测细胞培养中的杀虫剂代谢物。使用 UPLC Orbitrap 质谱仪检测试验植物提取物中的杀虫剂代谢物。一种无菌植物的卡卢斯具有较低的污染棕色，但更高的电感性比从采摘的茶叶的卡卢斯。
从无菌叶子中提取的卡卢斯总是亮黄色，而从采摘的叶子中提取的卡卢斯是白色，有棕色斑点。当 KT 浓度为每升 0.1 毫克时，卡卢斯的颜色发黄，质地松散。当2，4-D的浓度是每升1毫克，KT的浓度为每升0.5毫克时，卡卢斯的生长速度最高，高达61.5%。
卡卢斯的生长数据最好，卡卢斯的生长率最高达到46.9%，因此，植物家的最佳组合是每升1毫克2，4-D和0.1毫克每升KT的茶卡卢斯生长。当亚文化周期为28天时，树种完全覆盖了第四亚文化的叶子。卡卢斯已经大力生长与黄色和松散的质地，没有棕色。
在比较了卡卢斯的毛数据和细胞悬浮液的颜色后，B5液体介质更适合细胞悬浮培养。细胞悬浮培养的OD值用于表示细胞生长量。在75天的栽培中，每40毫升15克的消耗臭氧值明显高于其他两个比率。
通过TTC染色测试了茶细胞悬浮培养中的细胞生存能力。无色TTC化合物可以通过活细胞线粒体的脱氢酶转化为红蛋白，但死细胞的颜色不能改变。这是建立茶细胞悬浮培养的整个过程。
这是首次采用细胞悬浮培养技术对茶叶中不同农药代谢的比较研究。发现了几种农药代谢物，其中一些在保存的茶厂中进一步研究。这种新方法可以作为茶叶或其他植物农药代谢研究的模型。
