确定和解剖全身脂肪库的标准化方法对于研究分立解剖利基中脂肪细胞特性和功能的差异至关重要。该技术的主要优点是,它是一种可靠和准确的方法来识别和排泄常见和较少研究的啮齿动物脂肪库。为了识别和隔离间膜面,使用虹膜剪刀沿安乐死小鼠的皮下组织底部边缘水平切割,然后沿着仓库的自然边界进行切割。
沿着组织的自然边界沿着仓库的横向边缘进行两个垂直切口。使用钳子小心地翻转仓库,以显示嵌入在白色脂肪组织中的蝴蝶形的间皮棕色脂肪组织。然后仔细解剖 BAT 远离周围的 WAT 。
将脂肪组织存放在适当的容器中,用于下游分析。为了识别和隔离皮后 WAT,请将鼠标放入超供位置,并固定动物的四肢。使用钳子抬起胸骨底部的皮肤,并做一毫米的皮肤切口。
将虹膜剪刀的一叶插入切口,从胸骨底部开始,到尾部底部,进行四到五厘米的中线皮肤切口。接下来,在初始垂直切口顶部进行两个一厘米水平切口,从中线横向延伸。使用钳子小心地从腹腔剥回皮肤,使用腿部定位后皮下WAT,该 WAT 应与皮肤保持关联。
固定伸出的皮肤,并完全切除三角形 inguinal WAT 仓库从后肢通风口穿过腹股沟的基础。对于内脏 WAT 仓库的识别和隔离,使用钳子抬起胸骨底部的薄腹腔壁,并在帐篷组织内进行一毫米切口。将虹膜剪刀的一叶插入切口,从腹腔顶部到直肠进行四到五厘米的垂直切口。
在垂直切口的顶部和底部进行两个一厘米水平切口,从中线横向延伸,并使用钳子剥回腹腔,以暴露腹腔内侧。然后将伸出的腹膜固定在解剖盘上,以收获腹腔内所含的 WAT 仓库。为了识别和隔离内脏戈纳达尔WAT,找到性腺,并使用钳子抬起相关的戈纳达尔WAT,然后使用虹膜剪刀小心地从性腺切除WAT。
要切除肾库,定位肾脏并使用钳子提升肾组织。将肾脏拉到中线,看到肾和肾上腺库之间的明确划分,并切除与肾脏直接相关的 WAT。然后从 WAT 中去除位于肾脏上方的肾上腺。
对于逆转性体 WAT 识别和隔离,请再次将肾脏抬到中线,并使用虹膜剪刀从后侧壁仔细解剖逆膜 WAT。要隔离波莱特 WAT,请将 patella 对解剖盘进行护理,注意膝盖后处的波莱特叶朝上。使用虹膜剪刀小心地将皮肤从后肢底部移除到脚部。
使用虹膜剪刀在胃肌的中层和横向头部的劣质边框进行切割,使用钳子抬起肌肉,露出三角形的罂粟库。然后使用虹膜剪刀沿自然组织边界切除仓库。在这里,显示了小鼠皮下、棕色、内脏和波普利特仓库的解剖总位置。
皮下、棕色、内脏、波普利特、组成和调节骨髓脂肪、肌肉内和骨髓脂肪库的组织学特征可以通过标准血氧素和Eosin染色方案进行评估。使用该协议分离的脂肪组织可用于各种实验终点,包括组织学分析、分子研究以及基因和蛋白质表达分析。对各种脂肪库的鉴定进行实地标准化无疑将帮助我们进一步了解它们的分子和代谢特征,以及它们对局部和系统病理状态的不同贡献。