إنّ منهجية موحّدة لتحديد وتقريح المستودعات الدهنية في الجسم أمر بالغ الأهمية للتحقيق في الاختلافات في طابع ووظيفة الشّريبيّات داخل محاريب تشريحيّة منفصلة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها طريقة موثوقة ودقيقة لتحديد واستئصال كل من مستودعات القوارض الدهنية الشائعة والأقل درسًا. لتحديد وعزل BAT بين الكتفين، استخدم مقص القزحية لقطع أفقيا على طول الحافة السفلية من النسيج تحت الجلد الأمامي من الماوس القتل الرحيم بعد الحدود الطبيعية للمستودع.
جعل اثنين من شقوق عمودية على طول الحواف الجانبية للمستودع بعد الحدود الطبيعية للأنسجة. استخدام ملقط بعناية الوجه حتى مستودع للكشف عن فراشة على شكل الأنسجة الدهنية البني مضمّن داخل الأنسجة الدهنية البيضاء. ثم تشريح بعناية BAT بعيدا عن وات المحيطة بها.
تخزين الأنسجة الدهنية في حاويات مناسبة لتحليل المصب. لتحديد وعزل وات تحت الجلد الخلفي، ووضع الماوس في موقف supine وتأمين أطراف الحيوان. استخدام ملقط لرفع الجلد في قاعدة القص وجعل شق الجلد ملليمتر واحد.
إدراج شفرة واحدة من مقص القزحية في قطع وجعل شق الجلد خط الوسط من أربعة إلى خمسة سنتيمترات ابتداء من قاعدة القص والصعود إلى قاعدة الذيل. بعد ذلك، قم بعمل شقين أفقيين سنتيمتر واحد في الجزء العلوي من الشق الرأسي الأولي الممتد أفقيًا من خط الوسط. استخدام ملقط لقشر بعناية مرة أخرى الجلد من تجويف البريتوني، واستخدام الساق لتحديد موقع وات تحت الجلد الخلفي الذي ينبغي أن تبقى مرتبطة مع الجلد.
دبوس الجلد الممدودة ومزغ تماما مستودع وات الإربي الثلاثي من قاعدة ventrally الخلفية عبر الفخذ. لتحديد مستودع WAT الحشوي والعزلة ، استخدم ملقط لرفع جدار تجويف الصفاق الصفيق عند قاعدة القص وجعل شق ملليمتر واحد في الأنسجة الخيام. أدخل شفرة واحدة من مقص القزحية في القطع واصنع شق عمودي تنازلي من أعلى تجويف الصفاق إلى المستقيم.
جعل اثنين من شقوق أفقية سنتيمتر واحد في الجزء العلوي والسفلي من شق عمودي تمتد أفقيا من خط الوسط واستخدام ملقط لقشر مرة أخرى الصفاق لفضح محتويات تجويف البطن. ثم قم بزوم البريتوني الممدودة على مقلاة التشريح لحصاد مستودعات WAT الموجودة داخل التجويف البريتوني. لتحديد وعزل gonadal WAT الحشوية، حدد موقع الغدد التناسلية واستخدام ملقط لرفع ما يصل إلى WAT gonadal المرتبطة، ثم استخدام مقص قزحية لإخراج بعناية وات من الغدد التناسلية.
لمعالجة مستودع perirenal، تحديد موقع الكلى واستخدام ملقط لرفع الأنسجة الكلوية. سحب الكلى إلى خط الوسط لرؤية تقسيم واضح بين مستودعات perirenal وperperitoneal واستئصال وات المرتبطة مباشرة مع الكلى. ثم إزالة الغدد الكظرية الموجودة فوق الكلى من وات.
لتحديد وات مرة أخرى، ورفع الكلى إلى خط الوسط مرة أخرى واستخدام مقص القزحية لتشريح بعناية وات من الصفاق الخلفي من الجدار البريتوني الخلفي. لعزل وات popliteal، وضع الرضفة ضد عموم تشريح مع الحرص على أن fossa البوبيتيال في الجزء الخلفي من الركبة تواجه التصاعدي. استخدم مقص القزحية لإزالة الجلد بعناية من قاعدة hindlimb إلى القدم.
استخدام مقص القزحية لجعل قطع على الحدود السفلية من رؤساء الوسط واتية من العضلات gastrocnemius، واستخدام ملقط لرفع العضلات للكشف عن مستودع البوبليتال الثلاثي. ثم استخدام مقص القزحية لإخراج مستودع على طول حدود الأنسجة الطبيعية. هنا ، يتم عرض المواقع التشريحية الإجمالية للماوس تحت الجلد ، والبني ، والحشوي ، والمستودعات النقوش.
الخصائص النسيجية للمستودعات تحت الجلد، والبني، والحشوية، والبوبية، والتشكيل، ونخاع الخاضعة للتنظيم، والعضوي، والمستودعات الدهنية infrapatellar يمكن تقييمها من قبل بروتوكولات تلطيخ الهماتوسلين وEosin القياسية. يمكن استخدام الأنسجة الدهنية المعزولة باستخدام هذا البروتوكول لمجموعة واسعة من نقاط النهاية التجريبية بما في ذلك التحليل النسيجي والدراسات الجزيئية وتحليل الجينات والتعبير البروتيني. ومما لا شك فيه أن توحيد نطاق الميدان لتحديد المستودعات الدهنية المتنوعة سيساعدنا على زيادة فهمنا لخصائصها الجزيئية والتمثيلية ومساهماتها المختلفة في كل من الولايات المرضية المحلية والمنهجية.
