신체 전체에 있는 차분 창고를 식별하고 해부하기 위한 표준화된 방법론은 이산 해부학 적 틈새 시장 내의 형편과 기능의 차이에 대한 조사에 매우 중요합니다. 이 기술의 주요 장점은 일반 및 덜 연구된 설치류 지방 창고를 식별하고 절전하는 신뢰할 수 있고 정확한 방법이라는 것입니다. 중간 BAT의 식별 및 격리를 위해, 창고의 자연 경계 다음 안락사 마우스의 전방 피하 조직의 하단 가장자리를 따라 수평으로 절단 홍채 가위를 사용합니다.
조직의 자연 경계에 따라 창고의 측면 가장자리를 따라 두 개의 수직 절개를 합니다. 포셉을 사용하여 조심스럽게 창고를 뒤집어 흰 지방 조직 내에 내장된 나비 모양의 상호 갈색 지방 조직을 드러냅니다. 그런 다음 주변 WAT에서 BAT를 조심스럽게 해부합니다.
다운스트림 분석을 위해 적절한 컨테이너에 지방 조직을 저장합니다. 후방 피하 WAT의 식별 및 격리를 위해 마우스를 supine 위치에 배치하고 동물의 팔다리를 고정시하십시오. 집게를 사용하여 흉골 기저에서 피부를 들어 올리고 1 밀리미터 피부 절개를 합니다.
아이리스 가위 1개를 컷에 넣고 흉골 기저에서 시작하여 꼬리 밑으로 올라가는 4~5cm 의 중간선 피부 절개를 합니다. 다음으로, 초기 수직 절개 상단에 두 센티미터 수평 절개를 미드라인에서 측면으로 확장합니다. 집게를 사용하여 복막 구멍에서 피부를 조심스럽게 벗겨내고 다리를 사용하여 피부와 관련이 있어야 하는 후방 피하 와트를 찾습니다.
뻗은 피부를 고정하고 사타구니를 가로 질러 뒷다리 의 기지에서 삼각형 사타구니 WAT 창고를 완전히 제거합니다. 내장 WAT 창고 식별 및 격리를 위해, 삼골의 기지에서 얇은 복막 구멍 벽을 들어 올리고 텐트 조직에 1 밀리미터 절개를 만들기 위해 집게를 사용합니다. 홍채 가위 1개를 절단에 넣고 복막 구멍 의 상단에서 직장까지 수직 절개를 4~5센티미터 내림차순으로 만듭니다.
중간선에서 측면으로 확장수직 절개의 상단과 하단에 두 개의 1센티미터 수평 절개를 하고 복강 함량을 노출하기 위해 복막을 다시 껍질을 벗기도록 집게를 사용합니다. 그런 다음 뻗은 복막을 해부 팬에 고정하여 복막 구멍 내에 포함된 WAT 창고를 수확합니다. 내장 고나달 WAT의 식별 및 격리를 위해, 곤드를 찾아 관련 고나달 WAT를 들어 올리기 위해 집게를 사용, 다음 조심스럽게 곤나드에서 WAT를 소비하는 홍채 가위를 사용합니다.
회리 망 창고를 절제하려면 신장을 찾아 서식을 사용하여 신장 조직을 들어 올립니다. 신장을 중간선으로 당겨 복막과 레트로페리톤 창고 사이의 명확한 분열을 확인하고 신장과 직접 연관된 WAT를 소비합니다. 그런 다음 WAT에서 신장 위에 위치한 부신을 제거합니다.
레트로복판 WAT 식별 및 격리를 위해 신장을 다시 미드라인으로 들어 올리고 홍채 가위를 사용하여 후방 복막 벽에서 레트로복판 WAT를 조심스럽게 해부합니다. 포클레타와트를 분리하려면 무릎 뒤쪽에 포라이트 포사가 위쪽으로 향하고 있는 해부 팬에 슬개골을 놓습니다. 홍채 가위를 사용하여 뒷다리 기저에서 발까지 피부를 조심스럽게 제거합니다.
홍채 가위를 사용하여 위트랑이혈 근육의 내측 및 측면 머리의 열등한 경계에서 절단을 하고, 집게를 사용하여 근육을 들어 올려 삼각형 포라이트 창고를 드러냅니다. 그런 다음 홍채 가위를 사용하여 자연 조직 경계를 따라 창고를 소비합니다. 여기서, 마우스 피하, 갈색, 내장 및 포라이트 창고의 총 해부학적 위치가 표시됩니다.
피하, 갈색, 내장, 포라이트, 구성및 조절된 골수 지방, 근육 내 및 인프라 할당 창고의 조직학적 특성은 표준 헤마톡시린 및 에오신 염색 프로토콜에 의해 평가될 수 있다. 이 프로토콜을 사용하여 분리된 분조직은 조직학적 분석, 분자 연구 및 유전자 및 단백질 발현 분석을 포함한 다양한 실험 종점에 사용될 수 있다. 다양한 지방 창고의 식별의 현장 전체 표준화는 의심 할 여지없이 우리가 그들의 분자 및 신진 대사 특성과 지역 및 체계적인 병리학 적 상태에 대한 차등 기여에 대한 이해를 증진시키는 데 도움이 될 것입니다.
