这种方法为未来的研究创造了一个范例，为研究人员提供了一个可靠和转化的脑震荡模型，允许对脑震荡的分子效应进行纵向表征。这种大鼠模型结合了微透析，允许连续分析剂定量与楔形包装技术，使头部和躯干快速加速和减速，模仿人类颅骨创伤的基本特征。该技术的含义延伸到脑震荡的治疗研究，因为它为研究药理剂在体内和不间断的机理和疗效提供了宝贵的机会。
强烈建议在这种方法的脑震荡和假感应步骤期间在两个团队中工作，以限制操作错误，并在实验中最大限度地提高效率。演示该程序将是克洛伊教务长，在我们的实验室的技术人员。要开始手术，请用电剪器剃动物头部。
使用2%异丙醇和2%氯西丁葡萄糖酸盐溶液清洁剃光区域。然后涂抹润滑眼软膏，防止麻醉期间干燥。接下来，把老鼠放在一个立体的仪器里。
小心地将耳杆插入耳道，并拧紧鼻夹。之后，将 26 表不锈钢导轨卡固定到立体轴装置上的支架臂上。在头皮上做一个三厘米的中线切口。
在切口周围安装四个夹子，使头骨保持清晰。用手术刀片牢牢从头骨上刮掉周长，直到可见牙和羊膜缝合。如果有出血，用纱布垫或棉尖施用器对头骨保持稳固的压力。
通过比较脑骨和羊皮缝合线的多发坐标，确认头骨在立体税装置上是否正确对齐。确定带子、药剂和多发坐标的呼吸ma缝合线作为导丝的坐标的参考点。然后以脑水缝合坐标作为参考，计算海马体内导管植入位点的坐标。
使用标记标记精确的植入位置。随后，在导管的目标位置钻一个直径为0.5毫米的孔。钻三个其他孔约五毫米围绕这个点，线程三个锚螺丝到头骨，将凝固的牙杆菌后，丙烯酸牙科水泥应用。
接下来，将牙管插入海马，用牙科水泥固定。注意不要将多余的牙科水泥洒在重量下降的场地周围。让水泥干燥两分钟，然后从刀柄上拆下支架臂。
将不锈钢可拆卸除颤器插入管中，以避免脑脊液渗漏和感染风险。之后，取下四个夹子，拉回缩回的皮肤，用手术缝合线缝合。接下来，将大鼠从仪器中取出，并注射丁丙诺啡皮下治疗疼痛。
将啮齿动物放回笼子，下面有加热垫，直到它变得有意识。然后在密切监测下，将回收期为7天，然后返回动物护理设施。在此过程中，从管中拆下探针并缓慢插入微透析探针。
接下来，将探头组件固定到不锈钢弹簧上，用环架和夹子将弹簧系在液体旋转和平衡杆臂上，以便动物可以在其笼子内自由移动。在整个微透析过程中，系绳大鼠可以获得食物和水。使用微输液泵将香水送到探头，然后从熔融石英出口管路收集透析液。
在手术开始前至少 1 小时 30 分钟，将探头以每分钟一微升的速度打开探针至其工作流速。通过使用移液器测量一段时间的体积，验证探头的流速是否一致。之后，收集每一个透析样品在一小部分小瓶预装一微升0.25摩尔每升高氯酸，以防止分析物降解。
将样品存放在摄氏四度，以便进行后续分析。收集最后一个样本后，从管中取出微透析探针，并重新插入观察器，然后再将大鼠返回动物护理设施。要安装脑震荡装置，请将铝板紧密地贴在包含泡沫垫的 U 形有机玻璃框架上。
使用锋利的剃刀刀片在铝板中做缝隙。将开槽铝板进行胶带固定。然后将玻璃玻璃框架放在 PVC 导管下。
将 PVC 导轨管固定到位，夹架位于带槽铝上方 3-1/2 厘米处。通过金属环连接尼龙飞钓鱼线，使重量的底部在槽铝上 2-1/2 厘米，以防止大鼠在撞击后落在泡沫垫上时多次撞击。然后将尼龙飞钓鱼线连接到夹架上。
用尼龙飞钓鱼线通过PVC管拉起重量。通过将六边角钥匙插入开槽铝箔上方一米处的初步钻孔，保持其到位。为了引起脑震荡，请将动物放在胸前的铝板上，以便其头部直接位于黄铜重量的路径上。
拆下鼻锥并拉六角键。重量将垂直下降通过PVC管和冲击大鼠的头部。因此，大鼠将经历180度的快速旋转，并降落在它的背上。
将老鼠从泡沫垫上取下，放在笼子里。使用数字计时器测量正确的反射时间，作为恢复和伤害严重程度的标志。正确的反射时间是从撞击到大鼠醒来并自发地回到容易的位置或开始行走的总时间。
注意任何死亡、骨折或出血的迹象。对于假感应，将动物放在其胸前的槽铝板上，以便其头部直接位于黄铜重量的路径上。拆下鼻锥，然后从铝板上取下动物，无需拔下十六进制键。
之后，把老鼠放在笼子里。使用数字计时器测量正确的时间作为神经恢复的指标。与假病例相比，受伤群体的动物平均正确时间显著增加，恢复知觉后出现惊呆了。
在脑震荡组的10例病例中，只有一只动物在体重下降后在撞击场下出现轻微的出血迹象。与假伤相比，在创伤感应后头10分钟内，在海马CA1区域观察到细胞外谷氨酸浓度显著增加。请记住，在脑震荡诱导期间，避免与重量影响管，因为这会对大鼠核心造成比脑震荡更严重的损伤。
该方法可应用于重复脑震荡的研究，因为该手术是一种近距离头部损伤，可以在不同时间点对同一动物重复。
