缺血再灌注损伤中转移性肝肿瘤的模样

实验和临床证据表明，肝缺血再灌注可以通过循环癌细胞和微米静病的生长增加转移性病的形成。这种可重复的穆林模型允许对转移的建立和肝脏内预先存在的肿瘤的生长进行相关研究。肝脏手术、出血和败血症休克都与肝缺血再灌注有关，可影响转移性疾病的生长。

这些技术允许研究这种现象，以努力更好地诊断和防止缺血再灌注对肿瘤生长在临床环境中的有害影响。在确认在麻醉的8至12周男性C57黑色6小鼠对头趾捏没有反应后，用波维酮碘磨砂对裸露的腹壁皮肤进行消毒，并使用牙齿钳子抬起皮肤。使用手术手术刀，在皮肤上做一个中线切口，并抬起腹部肌肉和腹腔，以方便创建一个三厘米的中线切口，以暴露腹部内容物。

在切口两侧和西腓工艺下放置一个 hemostat 后，向下拉并胶带将尾巴向下延伸，并使用六英寸无菌棉尖施用器将脾脏从胰腺脂肪组织中分离和暴露。接下来，旋涡癌细胞悬浮的兴趣，分离任何细胞团，并加载细胞到0.5毫升胰岛素注射器配备了28规格的针头。慢慢地小心地将100微升细胞注入脾脏的尖端，将针刺边的棉尖放在一边，吸收任何可能的肿瘤溢出到腹膜腔中，同时在注射过程中增加温和的压力以稳定脾脏。

成功的注射将明显通过肝脏颜色的变化。当所有细胞都交付后，将一块PBS浸泡的无菌纱布放在解剖区域，将鼠标放在加热垫上15分钟，使癌细胞在系统中循环。要诱发缺血和再灌注损伤，请使用两个湿润的棉尖轻轻地将肠从腔中移出，以暴露入口静脉，将鼠标置于解剖显微镜下。

提起中位，左向肝叶对隔膜。在中叶和右侧叶之间放置一个小的湿润棉签，以创造足够的空间进行夹紧，并小心地将容器扩张器钳子穿过入口三合会，并使用容器扩张器钳子，使用 10 厘米的 4-0 聚丙烯缝合线通过后侧，并抬起入口三合会。使用带锁的微丝神经夹施用器，将微血管夹放在左侧和中位肝叶上，以遮挡入口三合会中的所有结构。

观察发白时，取出4-0聚丙烯缝合线和小棉签，小心地将肠子返回到腹腔。用一块新的 PBS 浸泡纱布盖住腹壁，用塑料包装盖住纱布，以尽量减少蒸发损失。然后将鼠标放回加热垫上 60 分钟。

在整个缺血间隔内，想象右中叶、左中叶和横向叶的苍白发白，以确认缺血损伤的证据。在受伤期结束时，拆下夹具。要进行脾脏切除术，请小心地用光滑的钳子抬起脾脏，并使用手持式烧灼装置烧灼脾脏血管，以避免过度出血。

在烧灼部分的血管transtrans去除脾脏，并立即使用4-0聚丙烯缝合线，以双层缝合图案关闭肌肉和皮肤切口。然后将鼠标放回其家庭笼子，并进行监控，直到完全恢复。手术应激显著增加肝脏内预先建立的微肉量。

与非缺血重灌小鼠相比，即使在缺血再灌注两周后，也观察到这种差异。肝缺血再灌注和肿瘤细胞注射可受室温和细胞生存能力的影响，因此请小心控制这些变量。该技术有助于研究手术应激和肝损伤对转移性疾病生长的影响。

这将有助于研究人员更好地了解手术引起的肿瘤生长现象。