تظهر الأدلة التجريبية والسريرية أن حقن الإقفار في الكبد يمكن أن يزيد من تكوين البؤر النقيلي من خلال تعميم الخلايا السرطانية ونمو مرض المايميتاستاتيكي. يسمح هذا النموذج مرين استنساخ الدراسة ذات الصلة من إنشاء كل من الانبثاث ونمو الورم الموجودة من قبل داخل الكبد. جراحة الكبد, نزيف, والصعق بالتعفن كلها ترتبط مع إعادة إفراز نقص التروية الكبد ويمكن أن تؤثر على نمو مرض النقيلي.
هذه التقنيات تسمح لدراسة هذه الظواهر في محاولة لتشخيص أفضل ومنع التأثير الضار لاعصائي الإقفاري على نمو الورم في بيئة سريرية. بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم في تخدير ثمانية إلى 12 أسبوعًا من العمر من الذكور C57 Black 6 ماوس ، قم بتطهير جلد جدار البطن المكشوف مع فرك بوديوني اليود واستخدام ملقط مسنون لرفع الجلد. باستخدام مشرط جراحي، قم بعمل شق في منتصف الخط في الجلد ورفع عضلة البطن والصواطن لتسهيل إنشاء شق خط وسط طوله ثلاثة سنتيمترات لفضح محتويات البطن.
بعد وضع الهيموستات على جانبي الشق وتحت عملية xiphoid ، اسحب وشريط الذيل لأسفل لتمديد البطن واستخدام قضيب طرف القطن المعقم من ستة بوصة لفصل وكشف الطحال من أنسجة الدهون البنكرياس. المقبل, دوامة تعليق الخلايا السرطانية من الفائدة إلى فصل أي كتل الخلية وتحميل الخلايا في حقنة الأنسولين 0.5 ملليلتر مجهزة إبرة 28 قياس. ببطء وبعناية حقن 100 ميكرولترات من الخلايا في غيض من الطحال، ووضع طرف القطن المجاورة لجانب ثقب إبرة لامتصاص أي تسرب الورم المحتملة في تجويف الصفاق مع إضافة ضغط لطيف لتحقيق الاستقرار في الطحال أثناء الحقن.
حقن ناجحة سوف يكون واضحا من خلال تغيير في لون الكبد. عندما تم تسليم جميع الخلايا، ضع قطعة من الشاش العقيم المنقوعة في برنامج تلفزيوني فوق المنطقة التي تم تشريحها ووضع الماوس على وسادة التدفئة لمدة 15 دقيقة للسماح للخلايا السرطانية بالتعمم داخل النظام. للحث على إصابة الإقستري وإعادة الضخ ، استخدمي جولتين من القطن الرطب لنقل الأمعاء بلطف من التجويف لفضح الوريد المدخل ووضع الماوس تحت مجهر تشريح.
ارفع الفصوص المتوسطة واللُهمية في الكبد الجانبي إلى أعلى في مواجهة الحجاب الحاجز. ضع مسحة قطنية رطبة صغيرة بين الفص المتوسط والفص الجانبي الأيمن لخلق مساحة كافية للقط وتمرير ملقط توسع السفينة بعناية خلف ثالوث البوابة ، واستخدام ملقط توسيع السفينة ، استخدم قطعة 10 سنتيمتر من 4-0 خياطة البولي بروبلينتر لتمرير خلف ورفع ثالوث البوابة. استخدام قضيب المشبك micro-serrifine مع قفل لوضع المشبك microvascular على فصوص الكبد على اليسار ومتوسط لocclude جميع الهياكل في ثالوث البوابة.
عندما لوحظ التبييض، وإزالة 4-0 خياطة البولي بروبلين ومسحة القطن الصغيرة وإعادة بعناية الأمعاء إلى تجويف البطن. غطي جدار البطن بقطعة جديدة من الشاش المنقوع بـ PBS واغطي الشاش بلفاف بلاستيكي لتقليل فقدان التبخر. ثم ضع الماوس مرة أخرى على وسادة التدفئة لمدة 60 دقيقة.
طوال الفاصل الزمني الإقفاري، تصور ابيضة شاحبة من الوسط الأيمن، اليسرى، والفصوص الجانبي لتأكيد الأدلة على إصابة الإقفاريات. في نهاية فترة الإصابة ، قم بإزالة المشبك. لإجراء استئصال الطحال، ارفع الطحال بعناية باستخدام ملقط ناعمة واستخدم جهاز كوتر محمول يدويًا لتكويد الأوعية الدموية الزبالة لتجنب النزيف المفرط.
قم بإبعاد الأوعية في القسم الكيي لإزالة الطحال واستخدام 4-0 خياطة البولي بروبلين لإغلاق شقوق العضلات والجلد في نمط خياطة مزدوج الطبقة. ثم ضع الفأرة مرة أخرى في قفصها المنزلي مع الرصد حتى الشفاء الكامل. يزيد الإجهاد الجراحي بشكل كبير من كمية ميكروميتاستاسيس المنشأة مسبقا داخل الكبد.
ويلاحظ هذا الفرق حتى بعد أسبوعين من إعادة ضخ الإقفاريات مقارنة بالفئران غير التروية. يمكن أن يتأثر حقن حقن الخلايا الدماغية في الكبد والخلايا السرطانية بدرجة حرارة الغرفة وقابلية الخلية، لذا يجب الحرص على التحكم في هذه المتغيرات. هذه التقنية تسهل دراسة آثار الإجهاد الجراحي وإصابة الكبد على نمو المرض النقيلي.
وهذا سيساعد الباحثين على فهم أفضل لظاهرة نمو الورم الناجم عن الجراحة.
