可培养模型生物的可得性是许多研究领域发展的根本。据我们所知，该协议是培养多利利德的唯一方法。可靠的多利奥利德养殖技术提供了一个独特的实验模型，用于研究对海洋一些生产力最高的地区非常重要，并且代表了脊椎动物最早的进化祖先。
这种技术是独一无二的，因为它保持藻类食物颗粒和悬浮在水柱中的有机体，而不会与容器的墙壁接触，因为它们在自然界中体验。这种栽培方法可应用于其他小明胶和甲壳类或万有生物的栽培。由于多利利德具有复杂的生命周期，因此了解和认识到每个生命阶段的需求至关重要。
学习生命周期以及如何识别和处理它们需要大量的实践。根据我们的经验，学习这种栽培技术的唯一方法就是看到它并做到这一点。其他几个项目参与者，包括艾琳·阿内森、尼古拉斯·卡斯塔琳、娜塔莉亚·洛佩兹、劳伦·兰博耶、布瑞娜·皮尔斯、艾莉亚·罗德里格斯-圣地亚哥和特雷尔·斯卡伯勒也出现在这段视频中。
在实验室中建立和培养多利利德培养物之前，通过浸入氢氧化钾高锰酸钠溶液中，清洁和消毒 1.9 升和 3.8 升玻璃培养罐。让罐子浸泡过夜。然后将罐子转移到双硫酸钠溶液中。
让罐子浸泡过夜。接下来用去维水彻底冲洗罐子。让罐子晾干。
为了保持库存文化，使用严格的斧头文化技术。每两周将0.5毫升的旧衰老培养剂转移到无菌55毫升玻璃培养管中的25毫升新鲜生长培养剂中。为了准备大量浮游植物来喂养多利利兹，请将四毫升浮游植物从轴类库存转移到含有 200 毫升生长介质的 500 毫升塑料组织培养瓶中，以 1 至 50 稀释进行接种。
在20摄氏度的环境孵化器或步入式环境室内孵化养殖，在每平方米65至85微微的冷白光照明下，有12至12小时的光暗循环。平整培养瓶，以最大限度地提高照明效果。每天轻轻旋转文化。
出海去。为了在大陆架上定位多利利叶，部署海洋学仪器CTD，通过分析水温、盐度和叶绿素甲荧光，确定有利于多利利的存在的水条件。使用专门的木板网进行探索性网托，确认水条件。
或者，使用原位分析成像系统来检测多利利德。现在操作车机以检索 CTD。安装在CTD玫瑰花环上的尼斯金瓶从多利奥利德的地点和含有叶绿素最高估计值的深度收集海水。
用海水冲洗三个 22 升桶，然后用海水填充半点多一点。用海水将鳕鱼网端完全填满，将鳕鱼端附在网中。部署网络。
通过水柱降低并提升网，保持15至25度的倾斜牵引角度，垂直部署和取回速度不超过每分钟15米。一旦网在船上轻轻转移，并分裂鳕鱼端的内容到塑料桶，每个含有从现场收集的地表海水。使用宽孔玻璃移液器，使用垂直和水平运动将烧杯的内容与移液器轻轻地混合。
使用食指，创建毛细管吸力来捕获和转移多利利德。从烧杯中的混合浮游植物中捕获多利利德。加入多利奥利兹后，将罗多蒙纳培养物加入罐中，最终浓度约为每毫升的约5倍10至第三至10至第四细胞。
检查多利利德消化道的颜色。红色决定了多利利德正在积极喂食。为了防止多利利德被困在空气-水界面，完全填充罐子与未经过滤的，富含颗粒的海水，以避免头部空间。
将一块塑料包裹放在罐子开口上。避免产生气泡，以免损害动物。小心地将盖子拧到罐子上，轻轻反转罐子，以确定是否存在气泡。
如果存在气泡，请填充更多的海水以清除它们。装满罐子后，用盖子重新密封，从罐子外擦去多余的水。将罐子放在用橡胶管覆盖的垂直金属棒上，在不锈钢软管夹之间，将每个罐子安装到木板轮上。
确保罐的背面靠橡胶管缓冲。调整螺钉以拧紧罐周围的软管夹。让罐以 0.3 rpm 转速旋转，以保持多利利德处于悬架状态。
三天后，适应实验室条件后，将100至150毫升的培养水从罐子转移到样品容器中，并使用库尔特计数器测量藻类浓度。根据藻类浓度的估计，加入足够的藻类，使培养罐中的浓度为每升40至95微克碳。使用颗粒计数器监测多利利德喂养后藻类浓度，以指导向培养物添加藻类的频率和程度。
保持培养罐中浮游植物浓度在每升40至95微克碳之间。培养多利利德需要支持他们度过复杂的生命周期。发展幼虫和卵巢和早期护士。
一旦在护士的阴极上至少看到八个三磷酮，至少将四名护士转移到一个新的培养罐中。一旦磷类动物达到三毫米的大小，减少罐子里的动物数量。当磷类体大于五毫米并发展出戈诺佐类星团时，除四个磷类体而去掉所有类星体。
该协议概述了多利奥莱塔·格根鲍里收集和栽培方法。藻类清除率与每升20微克碳的浓度相似，随着食物浓度的增加而降低。在支持 D.gegenbauri 生长的温度范围内，清除率按比例增加。
观察到，由于温度和食物供应情况，每天的生长量从0.1毫米到0.7毫米不等。多利奥利德的栽培取决于能否成功复制海洋条件，并满足动物在其复杂的生命周期中的需求。因此，在动物捕获、隔离和饲养过程中，需要对动物进行温和的处理。
必须经常监测和调整食物浓度。这在幼虫和卵母体生命阶段尤其如此。这种方法是专门为在海洋食物网底部饲养小浮游动物物种而设计的。
这种方法对于研究浮游动物对气候变化的反应将很有价值。自开发以来，这项技术为浮游动物生态学家确定多利利德的实验室喂养、生长和繁殖率铺平了道路。此外，这种方法为革命性的分子研究多利利德饮食的性质铺平了道路。
我想提醒你，玻璃清洗协议涉及试剂，呼吸刺激物，应该用于通风良好的区域。在海上工作也可能很危险，因此请遵守船舶安全规则。
