氯乙烯会加剧其他因素(如饮食在目前安全限制以下的饮食)造成的肝损伤。因此,必须重新评估平均人口使用参数。这种技术的主要优点是,它使用一种慢性的、非侵入性的吸入方案,它密切模仿人类的接触,同时对动物造成最小的压力。
演示这个程序的将是安娜·朗,一个博士后,和雷吉娜·施内格尔伯格,一个研究生,两个从我的实验室。在开始吸入实验前一周,称重所有实验动物,并权衡每个笼子要给予的低脂肪或高脂肪饮食食物的数量。酌情为每位接触组提供食物和水,以低脂肪或高脂肪饮食周代替常规周。
在每个喂养日结束时称量剩余的食物,并在整个实验中监测小鼠,以确保动物的健康得到维护。要建立氯乙烯吸入暴露系统,请确保实验室和控制室中的稀释空气是高效颗粒空气,并在进入相应的流量测量装置之前进行活性炭过滤、干燥和压力调节。确认在进入化学罩的排气区之前,从实验和控制室内监测温度和相对湿度,确保室排气通过 HEPA 过滤器、二氧化碳探针和活性炭过滤器,以确保小鼠获得可接受的通风。
自定义软件可用于更改、监控和记录吸入暴露期间感兴趣的环境变量。要为吸入暴露做好准备,请首先关闭实验室和控制室中的所有气流。打开每个腔室的门,放置吸水床上用品材料,吸水侧向上,在排泄盘的顶部。
然后,将吸水材料弄湿,在整个暴露期间提供约40至60%相对湿度的舒适湿度水平,并在实验室中设置所需的氯乙烯暴露水平。当腔室准备就绪后,将小鼠转移到吸入室笼架内的单个笼中,每天随机化每个小鼠在机架内的位置,以确保每只小鼠均匀地暴露在腔室内。然后,将每个保持架放入各自的腔室并关闭腔室门。
要进行吸入暴露实验,请确认氯乙烯气罐的阀门处于打开位置,将实验室的稀释液流量设置为每分钟 25 升。确认控制室上的轮值计设置为每分钟 25 升,并检查所有传感器是否正常工作,并在实验室和控制室中显示预期结果。在整个暴露过程中,监控和记录实验室中的暴露时间、稀释液流量、氯乙烯流量、温度、湿度、室压、二氧化碳水平和理论氯乙烯浓度。
确认控制室的温度和湿度也显示、绘制和记录。每次曝光的中途,断开氯乙烯检测管和预处理管上的玻璃尖端,然后将氯乙烯检测管的流出端连接到探测器管泵。使用短管将氯乙烯检测管末端的流量连接到预处理管的流出端,并在预处理结束时将一小管连接到流中。
从呼吸区附近的一个采样端口上拔下插头,将预处理管末端的管道连接到采样端口。将探测器管泵活塞上的手柄从完全位置扩展到完全输出位置,将 100 毫升采样气体从腔室中拉出到氯乙烯检测管中。90 秒后,将手柄推回。
获得最后一个气体样本后,从腔室的取样口取出管子,然后将插头重新插入端口。检查氯乙烯检测管的颜色变化,确定腔内氯乙烯浓度,并记录检测器管读数,以便与理论值进行比较。如果在曝光过程中出现任何问题,请将氯乙烯流量设置为零,并将增加稀释剂流量至其最大值,以快速清除腔室。
达到曝光持续时间后,软件将自动关闭氯乙烯流。然后,15 分钟的安全计时器将开始倒计时实验室清除氯乙烯的持续时间。一旦可以安全地移除动物,请单击"确定"。
在暴露期结束时,将氯乙烯气罐阀止回器打开到关闭位置,并关闭暴露室中的所有气流。转动旋转计,直到没有空气流过控制室,然后从每个腔室拆下门。从腔室中取下笼子架,将小鼠转移到其家中的笼中,在层流罩下。
然后,根据机构健康和安全法规处理排泄锅中的任何废物,并清洁室门、平底锅、暴露架和腔室。在这里,每周体重和每两周的食物消费12周的实验显示。在整个研究过程中,所有的老鼠都增加了体重。
然而,虽然高脂肪饮食组中的小鼠比低脂肪饮食组中的小鼠体重增加更多,但接触氯乙烯的小鼠体重不会超过各对照组中的小鼠。各群体的食物消费也不同。在这些代表H&E染色肝部分的影微器中,氯乙烯在低脂肪饮食组没有引起任何引起的病理变化。
高脂肪饮食喂养显著增加的口臭,进一步加剧的乙烯基氯化物暴露。此外,高脂肪饮食组的氯乙烯暴露导致一些炎症性。在低脂肪饮食动物中,氯乙烯没有增加转亚酶水平,而仅高脂肪饮食本身略微增加转亚酶表达,在接触氯乙烯的高脂肪饮食组观察到的这种效应显著增强。
此外,高脂肪饮食显著增加肝脏与体重的比例,虽然氯乙烯没有显著影响这种影响。在实施此协议时,始终注意采取适当的安全预防措施,以避免人类无意中接触氯乙烯。此过程可以回答有关氯乙烯暴露对动物健康、福利和器官损伤的短期、长期和累积影响的问题。
这些研究影响我们的环境和职业风险评估领域。例如,我们的团队现在研究氯乙烯和饮食之间的机械相互作用。