本视频将提供详细的描述，如何执行正畸右后肢，中大腿移植大鼠。捐赠大鼠右后肢在中大腿水平被截肢，然后储存在冰上。接受大鼠右后肢在中大腿水平也截肢。
然后，供体大鼠肢体附着在受助鼠上。我们将描述如何重新连接骨骼、动脉、静脉、神经、肌肉和皮肤系统。肢体移植，更具体地说，血管化复合异体移植，VCA，有广泛的治疗前景。
但它目前受到技术、免疫抑制和功能差的神经运动恢复的有限限制。我们的模型强调经过时间考验的显微手术技术，如手工缝制血管解剖学和神经共生。一年来，我们进行了200多次手术。
虽然有一个初始学习曲线到开始微外科医生，通过使用这个视频来学习我们的方法和他们对专用实践的致力于，任何微外科医生将能够掌握这个模型。所有实验都是按照国家卫生研究院实验室动物护理和使用指南进行的，并经西北大学动物护理和使用委员会批准。在协议 IS 00001663 上执行了特定过程。
选择一只8至16周大的老鼠，手术时体重在250到400克之间。在修剪大鼠的后肢毛皮之前，通过蒸发器用5%等值的麻醉诱导全身麻醉。使用鼻锥保持麻醉在 2 到 2.5% 之间，将大鼠放在操作板上，下面有加热器。
用70%的酒精消毒无毛皮肤，用无菌纱布保护手术场。使用适当的显微外科显微镜和此处显示的显微手术仪器，以及易于获取的双极和单极电卡，您将准备好开始解剖。使用剪刀在右后肢周围做圆周和皮肤切口。
立即从内侧折痕开始，其水平与内侧韧带大致相同，并横向延伸后侧，以完成圆周切口。然后暴露切口下方的肌肉层，解剖和烧灼的肤浅的表层胃，导致从肌肉层到刚刚创建的近近皮瓣。将近位皮瓣超位反射到内侧韧带和侧皮皮瓣推断到膝盖。
使用钢丝缩回器或卷纱布帮助露出磁场。观察大鼠的内向解剖与人类相似;从横向到中枢，在于神经、动脉和静脉。剖析股骨神经，在内侧韧带近侧与分叉之间急剧分割，如果可能的话。
低劣地收回分裂的神经， 保持它的安全远离的方式， 覆盖在潮湿的纱布下。将注意力转向股动脉和静脉使用四厘米长的 7-0 丝状领带来创伤性地缩回血管，而不是直接处理它们。现在密切关注将改善你最后的解剖学结果。
用7-0丝带将股骨容器的所有分支都拉上。在领带之间划分分支。动脉和静脉分支，需要分裂包括表面的环弹性的腹腔和肌肉血管。
表面的环皮动物通常是最大的，似乎潜入深，就像人类的富伦达股骨一样，但大鼠中不存在。股骨血管的更近源分支，如最高的根和盐状分支通常不需要分割。现在用 7 - 0 丝状动脉尽可能与内关节韧带连接， 并在连接之间划分。
类似于动脉，拉大和分割股骨静脉。反射动脉和静脉低劣， 安全的方式， 覆盖在潮湿的纱布下与股骨神经覆盖之前.解剖腹体肌肉群，注意烧灼任何可见的血管。
现在注意血脂将最大限度地减少接受者在以后的再发性输血期间的失血。深到腹骨肌肉群，识别和尖锐地划分坐骨神经近到它的分支。所有三个坐骨神经科通常可见，三头，胸膜和耳骨。
这三者都应保留在捐赠者肢体中。在此解剖中通常未看到第四个皮肤分支。完成在中大腿水平的其余腹体和背部肌肉群的分部与细致的海莫西。
可能需要以医疗方式收回肢体以完成肌肉的分割。使用手持式无绳旋转锯在中轴上转换股骨。肢体现在从捐赠者那里释放。
从捐赠者那里取出肢体移植物后，从移植侧股股动脉和静脉树桩上切开丝束的末端，从而重新打开血管。将一个24测量的血管导管插入移植动脉树桩，用250个国际单位的肝素冲洗，用5毫升的冰冷普通盐水稀释，小心观察它流出开放的静脉。慢慢地，轻轻冲洗移植物约三分钟。
过度的强力冲洗可能会损坏内皮。将移植物放在冷藏盐水盘中，嵌套在冰桶中，直到移植。用双边胸腔切除术对捐赠鼠进行安乐死。
接受者手术开始类似于供体手术，麻醉大鼠，修剪毛皮，在内毛折痕上做一个包皮切口，反射皮瓣，解剖股骨神经，动脉和静脉。并连接与前面描述的相同的分支容器。然而，在手术过程中，与捐赠者更分裂股骨神经，但如果可能的话，则与分体神经分开。
分割和释放股动脉和静脉，并用微手术斗牛犬夹分别夹在内侧韧带的水平。继续手术，如前所述，分裂大腿的腹骨支持肌肉在中大腿水平与细致的海莫西，同时收回肢体医疗必要的。确定坐骨神经近向分支点并分割，并使用旋转锯在中轴处横贯股骨。
移除接收者原生右后肢，并按照当地动物护理和使用委员会准则进行适当处置。在这个阶段，通过鼻锥将异氟兰降低为 1 到 1.5%非常重要。在手术中这种不太痛苦的部分，太多的麻醉会导致老鼠的死亡。
是时候把骨头拼凑起来。使用手持式旋转锯，剃掉捐赠者和接受者股骨切割端的任何不规则现象。切断18表针的轮毂端，该针将成为股骨内杆。
在操作骨骼之前，将少量骨蜡涂抹到股骨的接受者切端，以减少骨髓出血。使用18量针作为内杆，将捐赠者和接受者股骨进行注射。一些力是必要的，但不要把骨骼都用，以使皮层断裂。
根据需要，取出针头并将其修剪到不适当的长度，使两个骨骼平滑地在针上，骨骼之间没有显示任何针头。将小支撑，如纱布垫或小岩石或建模粘土下方的捐赠者肢体，以保持其紧张。用8到10个简单的中断5-0多糖蛋白缝合线重新建立腹体肌肉群，使移植物不会围绕股骨针旋转。
这为动物提供了肢体稳定性。现在开始阿纳斯特莫西。定期用冰冷的盐水灌溉移植物和手术场，以便更好地可视化，减少缺血性再灌注损伤。
使用简单的中断 10-0 尼龙缝合线，以端到端的方式对齐供体和接受者股动脉和原子体，避免张力和循环。动脉平均需要六个缝合线。与动脉类似，以端到端的方式使捐赠者和接受者股骨静脉具有原子性。
静脉需要六到八个缝合线。慷慨的冷盐水灌溉，创伤容器处理技术，留下长尾巴作为容器缩回的停留缝合线，是有效微外科麻醉的重要工具。将适量的止血纤维素粉放在两个麻醉剂上，然后去除静脉和动脉上的近端微外科斗牛犬夹。
检查两种麻醉和流动。使用棉签棒轻轻搅拌静脉，并检查两个静脉上有无一好血栓。当两个原点被确认为满意时，修剪任何剩余的长停留缝合尾，以匹配其他。
将大鼠重新定位到左侧脱花位置，使用自由电烧机获得任何再灌注肌肉出血的细致止血。一旦肌肉痉挛得到保证，注意力就转向神经神经。用简单中断的 5-0 多糖蛋白缝合线，重新建立直接位于坐骨神经下的后肌群。
修剪回任何神经切割端，看起来不规则。用10-0尼龙缝合线重新建立坐骨神经，争取肾上腺素叮咬。8 到 10 个简单的中断缝合线通常就足够了。
用5-0多糖蛋白缝合线重新建立剩余的后体肌肉群。然后用4-0多糖蛋白连续运行缝合关闭后层皮肤。重新定位大鼠至苏皮位置，用10-0尼龙缝合重新建立股骨神经，再次争取肾上腺素叮咬。
两到三个简单的中断缝合线通常就足够了。以与后体皮肤相同的方式关闭剩余的腹体皮肤。避免多余的缝合尾巴，这一旦醒来，可能会刺激大鼠。
一旦动物离开术后立即窗口，他们可以测试神经运动恢复。哈格里夫斯测试用于测试热感觉。将大鼠放在测试容器中，并允许其适应20分钟。
仪器玻璃被确认清洁，热源被证实与调查员的手指工作。测试前，确认大鼠是否清醒，测试的爪子位于红外运动探测器上。在强度级别 90 时传输热能。
记录动物移动爪子远离热源的时间延迟。如果在 20 秒内未发生任何移动，则中止测试以防止受伤。在计算每种动物平均戒断延迟时间之前，每个测试肢体获得五次试验，不包括最高值和最低值。
下面是以卡通格式描述的操作设计。捐赠鼠和受养大鼠的右后肢在中大腿水平被截肢，作为坐骨横截面。然后，在接受者手术中必须重新连接股动脉、静脉和神经，以及坐骨神经和股骨。
该模型可用于显示免疫抑制和移植策略的差别生存效应。有了这种技术，长期生存是可以实现的。该模型可用于研究感觉神经恢复，这可能在术后四周内显现出来。
也可以使用步态分析平台对电机功能进行询问。在这里，我们提出了一个具有良好生存特性的老鼠模型平台，我们用它来探测感官和运动恢复，如程序图中所看到的。肢体移植在更广泛的VCA范畴下，血管化成分异体移植已得到广泛应用的治疗承诺尚未实现。
主要路障线目前的免疫抑制和神经运动恢复技术。新技术的发展将取决于灵活、健壮和可重复的动物建模。利用这个平台，我们希望调查人员能够推进肢体移植的多个方面。
感谢您的收看，并祝您下一步好运。
