我们提出了一个可靠和可重复的手术模型,异位后肢移植在大鼠。该技术是 VCA 中保存或免疫排斥的短期研究的理想之选。分步描述将使受训者能够快速掌握手术。
首先,在腿部三分之一处对脚踝上方的皮肤进行包皮切口。使用双极钳将尖骨动脉和流行动脉的末梢部分骨架化和烧灼。烧灼和切割胃内皮,鞋底,头骨前部和二头肌股骨肌肉,直到头骨暴露。
在右侧的内皮折痕处切口 2.5 厘米,解剖内侧脂肪垫。使用鱼钩缩回器抓住静脉韧带。用夹钳将内在脂肪垫抱住,并收回脂肪垫以暴露股骨血管。
解剖股骨血管,个性化墨菲分支,用8/0尼龙领带唇部。通过使用 27 . 5 测量针头将肝素注射鼻静脉,使供体大鼠肝素化。完成臀部周围的皮肤切口。
使用双极钳烧灼二头肌和谷胱甘肽超纤维肌,然后烧灼和切开中股骨长度的坐骨神经。在后股骨峰层处近似地暴露股骨,并在股骨韧带水平上用尼龙领带将股骨容器绑起。在连体下方的股动脉上进行动脉切除术,然后放出 24 量表血管导管。
烧灼和切割脚踏下剩余的肌肉,以暴露股骨前侧。使用骨切割机近似切开头骨,尽可能切开股骨。用两毫升肝素盐水冲洗部分后肢,以获得清晰的静脉流出。
将后肢放在冰上无菌纱布中,直到微血管转移。解剖内在脂肪垫,并倾斜的内在脂肪垫远程暴露股骨血管。使用钩子缩回静脉韧带和夹钳,以保持在偏心脂肪垫远程。
解剖股骨血管,个性化墨菲分支,并像所示,用尼龙领带绑上唇部。使用尼龙领带将两个容器放在表观容器上方。将近似夹子放在近处,稀疏容器透镜,用肝素盐水冲洗。
在臀部上方的左翼切口,并创建一个皮下口袋,用皮下隧道进入皮肤折痕。将部分肢体的近部和阴性脂肪垫通过皮下隧道进行微血管转移。使用尼龙缝合线执行静脉和动脉麻醉剂。
取下两个近似夹,观察肢体的转速。对两艘船进行挤奶测试,以评估每个麻醉症的轻率。在移植肢体的内侧进行纵向皮肤切口,并插入移植物。
去除移植物的多余的皮肤,用单独的缝合线和可吸收的4/0缝合线关闭伤口。用两种独立的可吸收缝合线将移植肢体的阴性脂肪垫和接受者缝合在一起,并在微血管麻醉后关闭阴性折痕。异位后肢模型的演变一直监测到研究结束。
头发再生在术后的第一周被观察到,皮肤缩回在两周后出现。血管化复合异体移植失败可能发生在术后的第一周,由于微血管血栓。在20%的病例中,静脉血栓形成是早期安乐死的原因,所有这些病例都发生在术后第五天之前。
皮肤看起来是蓝色的,每天都变黑。自残是无敏感移植的严重问题,通常发生在术后第二天和第七天之间。如果仅限于不到三分之一的移植表面,只涉及皮肤,手术脱脂和缝合使用不可吸收的缝合线可以与工作人员兽医讨论。
防止自残需要使用缝在颈部的电子衣领,直到术后第七天,并清洁动物手术伤口上的任何血液或地壳。多层移植物的严重自噬导致动物安乐死。皮肤囊肿出现在术后第14天,有时在膀胱前有一个皮肤坏死中心。
确保移植放置不会阻止动物流动,并确保在移植内嵌过程中,足部不会扭结或紧绷,这一点至关重要。我们的团队在移植前对所采购的四肢进行了保存研究。评估了不同静态冷藏期的影响以及不同的肢体灌注方案。