该协议允许研究人员检查慢性压力对雄性小鼠和雌性小鼠努力反应的影响。这种技术的一个优点是,雄性小鼠和雌性小鼠可以同时经历一种经过验证的慢性社会失败模式,从而能够直接比较奖励行为。从历史上看,对情绪障碍的临床前研究利用了涉及避免威胁环境的行为任务。
但是,奖励和激励任务(如与工作量相关的选择)可能提供更多的转化相关性。要准备车辆溶液,在一升螺丝顶玻璃容器中,将 750 毫升自来水中溶解 3.375 克 β-环糊精。为了准备皮质酮溶液,在750毫升自来水中溶解3.375克β-环糊精,然后加入26.25毫克皮质激素。
在超声波清洁水浴中溶解溶液中的皮质酮,在 40 千赫下溶解约 30 分钟,直到液体显示外观清晰,然后用适当的溶液填充车辆和皮质酮小鼠组的水瓶,并记录每周消耗两次的液体量。为了让老鼠习惯Y-maze,在食物剥夺后的第二天,在两个50毫升离心管的盖子上放置大量20毫克颗粒,并在Y-maze的每个手臂的端点放置一个盖子,然后将一只老鼠放在Y-maze的开始框中,启动框分隔器在位几秒钟,然后取下分隔器,让老鼠探索Y-maze的15分钟。经过两天的 Y-maze 习惯后,将颗粒放在高奖励臂的盖子中,并在低奖励臂的帽中放置两粒颗粒。
对于高奖励强制选择试验,阻止访问低奖励臂,并在启动框中放置鼠标几秒钟,然后移除分压器,让鼠标 60 秒进入高奖励臂以消耗可用的颗粒。对于低奖励强制选择试验,阻止获得高奖励手臂。对于自由选择培训,在完成 10 次自由选择试验之前,先进行一次高和低臂强制选择试验。
允许鼠标选择任一迷宫臂。一旦鼠标到手臂的末尾到颗粒盖,在鼠标后面放置一个手臂分隔器,锁定动物,直到它消耗了颗粒。记录每天为所有 10 个自由选择试用选择的手臂。
一旦鼠标在自由选择训练日中为 10 个试验中的 7 次选择了高奖励手臂,在 Y-maze 的高奖励手臂上放置一个 10 厘米的屏障,并在障碍到位时至少执行两次高低臂强制选择试验。完成所有四个试验后,将鼠标放在启动框中,让鼠标选择手臂进行 10 次自由选择试验,与高奖励臂的 10 厘米屏障保持到位。第二天,习惯和测试鼠标,但使用15厘米的屏障在高奖励手臂。
第二天,测试鼠标与20厘米的障碍,如证明。对于慢性非歧视性的社会失败压力测试,将CD1雄性笼子与C57BL/6J雄性与雌性保持一致,将CD1笼子与CD1笼子与CD1小鼠在社交失败室相邻。开始试验时,将一只成年雄性和一只成年雌性实验C57BL/6J小鼠放入每个CD1侵略者雄性的家笼中,进行5分钟的社交失败会话,并记录男性和女性实验动物的攻击延迟和攻击频率。
在会议结束时,将雄性C57BL/6J小鼠转移到由透明穿孔有机玻璃屏障隔开的合住CD1雄性小鼠的笼子里。分离攻击CD1和雌性C57BL/6小鼠与类似的透明穿孔有机玻璃屏障。对于控制会话,将一只控制雌性鼠标放在一只控制公 C57BL/6 鼠标的家用笼中。
五分钟后,在动物之间放置一个透明穿孔的有机玻璃分隔器。在第一个实验结束时,旋转小鼠的剩余九次失败会话,这样每对C57BL/6的男性和女性对将一个笼子向左旋转,以便每个会话与新颖的CD1小鼠进行新的交互。慢性皮质酮和慢性非歧视性社会失败压力小鼠都表现出与车辆和控制动物相比,平均体重下降。
这些老鼠也消耗较少平均家庭笼实验室周。车辆和皮质酮管理的小鼠在四周的治疗和三周的行为测试中消耗类似的液体量。慢性非歧视性社会失败压力在易感小鼠中产生不良的表型,相比之下,没有接触慢性非歧视性社会失败压力的弹性小鼠或对照型小鼠,在包含新型CD1小鼠的相互作用区花费的时间减少。
慢性皮质酮和慢性非歧视性社会失败压力小鼠产生努力的反应转变,当屏障高度增加到15和20厘米。具有 15 厘米屏障的高和低奖励臂延迟不受皮质酮管理的影响,对于具有低奖励和高奖励臂的两组都相似。重要的是,如果慢性皮质酮或慢性非歧视性社会失败压力损害学习Y-maze障碍任务,这些小鼠可能无法达到标准在自由选择训练课程,影响随后的屏障结果解释。
此外,社会互动任务可用于将小鼠分层为有弹性和易感的人群,以及通过性别。在执行 Y-maze 屏障任务时,记录所选臂和延迟以在每个单独的试验中达到食物颗粒奖励至关重要。其他重要的和翻译相关的奖励相关行为,如结果贬值或累进比率,可以在慢性皮质酮社会失败或慢性非歧视性社会失败协议之后执行。