Этот протокол позволяет исследователям изучить влияние хронической нагрузки на усилие реагирования как у мышей мужского, так и женского пола. Преимущество этой техники заключается в том, что как мужчины, так и самки мышей могут одновременно пройти проверенную парадигму хронического социального поражения, позволяющую напрямую сравнивать поведение вознаграждения. Исторически, доклинические исследования расстройств настроения использует поведенческие задачи, которые включают в себя избегание угрожающих средах.
Тем не менее, вознаграждение и мотивация задач, таких, как усилия, связанные с выбором, может предложить более переводческой актуальности. Чтобы подготовить раствор автомобиля, растворите 3,375 грамма бета-циклодекстрина в 750 миллилитров водопроводной воды в одном литровом стеклянном контейнере. Для приготовления раствора кортикостерона растворите 3,375 грамма бета-циклодекстрина в 750 миллилитров водопроводной воды, после чего будет добавлено 26,25 миллиграмма кортикостерона.
Растворите кортикостерон в растворе в ультразвуковой чистой водяной бане в течение примерно 30 минут при 40 килогерце, пока жидкость не продемонстрирует четкий внешний вид, затем заполните бутылки с водой автомобиля и группу мышей кортикостерона соответствующими растворами и не замещаете объем жидкости, потребляемой два раза в неделю. Чтобы приутомить мышей к Y-лабиринту, на следующий день после лишения пищи, место большое количество 20 миллиграмм зерна на основе пищевых гранул в шапках двух 50 миллилитров центрифуг трубки и место одной крышкой в конце каждой руки Y-лабиринт, а затем поместить мышь в стартовый ящик Y-лабиринт с пробным разделитель на месте в течение нескольких секунд, прежде чем удалить разделитель и позволяет мыши изучить Y-лабиринт для 15 Минут. После двух дней Y-лабиринт привыкание, место для гранул в крышку для высокой награды руку и место две гранулы в крышку для низкой награды руку.
Для высокой награды принудительного выбора суда, блокировать доступ к низкой наградой руку и поместить мышь в стартовый ящик в течение нескольких секунд, прежде чем удалить разделитель, что позволяет мыши 60 секунд, чтобы войти в высокой наградой руку потреблять доступные гранулы. Для низкой награды принудительного выбора суда, блокировать доступ к высокой наградой руку. Для бесплатного выбора подготовки, начать каждую сессию с одной высокой и одной низкой рукой вынуждены выбор суда до завершения 10 бесплатных испытаний выбор.
Разрешить мыши, чтобы выбрать любой лабиринт руку. После того, как мышь отправилась в конце руки к крышке гранул, поместите руку разделитель за мышью, замок в животное, пока он не потребляется гранулы. Запись, какая рука выбрана для всех 10 бесплатных испытаний выбор ежедневно.
После того, как мышь выбрала высокую награду руку для 7 из 10 испытаний в свободный день обучения выбор, место 10 сантиметров барьер на полпути вниз высокой наградой руку в Y-лабиринт и выполнить по крайней мере два высоких и низких рук вынуждены выбор испытаний с барьером на месте. После завершения всех четырех испытаний поместите мышь в стартовый ящик и позвольте мыши выбрать руку для 10 испытаний свободного выбора с 10-сантиметровым барьером к высокой наградной руке на месте. На следующий день, привычкуйте и проверить мышь, как попродемонстрировано, но использовать 15-сантиметровый барьер в высокой награде руку.
На следующий день проверьте мышь с 20-сантиметровым барьером, как это было продемонстрировано. Для хронических недискриминационных социальных стресс-тестирования поражения, выровнять клетки CD1 мужчин с C57BL/6J мужчин и женщин с CD1 клетки в передней и C57BL/6J клетки рядом с CD1 мышей мужского пола в комнате социального поражения. Чтобы начать испытание, поместите одного взрослого мужчину и одну взрослую самку экспериментальной мыши C57BL/6J в домашнюю клетку каждого мужчины-агрессора CD1 для пятиминутной сессии социального поражения и замечтуйте задержку атаки и частоту нападения как для мужчин, так и для женщин-экспериментаторов.
В конце сеанса перенесите мужскую мышь C57BL/6J в клетку совместно размещенных самцов CD1, разделенных явным перфорированным плексигласовым барьером. Отделяем атакующих мышей CD1 и самки C57BL/6 с аналогичными четкими перфорированными плексигласовым барьером. Для сеанса управления поместите одну мышь управления в домашнюю клетку одного человека управления C57BL/6 мыши.
Через пять минут поместите четкий перфорированный плексигласный разделитель между животными. В конце первого эксперимента поверните мышей на оставшиеся девять сеансов поражения, так что каждая мужская и женская пара C57BL/6 вращается на одну клетку влево, чтобы обеспечить новое взаимодействие с новыми мышами CD1 для каждой сессии. Хронический кортикостерон и хронические недискриминационные социальные поражения стресс мышей как экспонат снижение среднего веса тела по сравнению с транспортным средством и контроля животных.
Эти мыши также потребляется меньше среднего дома клетке лаборатории чау. Мышей, управляемых транспортным средством и кортикостероном, потребляют аналогичный объем жидкости в течение четырех недель лечения и три недели тестирования поведения. Хронический недискриминационный стресс социального поражения производит неадаптивный фенотип у восприимчивых мышей по сравнению с устойчивыми или контрольных мышей, не подверженных хроническому недискриминаторного социального стресса поражения отображения сокращения времени, затяжеланное в зоне взаимодействия, содержащей роман CD1 мыши.
Оба хронических кортикостерона и хронических недискриминационных социальных поражения стресс мышей производят сдвиг в усилии реагирования, когда высота барьера увеличивается до 15 и 20 сантиметров. Высокая и низкая задержка вознаграждения руки с 15-сантиметровым барьером не влияет на администрирование кортикостерона и аналогична для обеих групп с низким и высоким вознаграждением оружия. Важно отметить, что если хронический кортикостерон или хронические недискриминационные социальные поражения стресс ухудшает изучение Y-лабиринт барьер задачи, эти мыши могут не достичь критерия в свободном выборе учебных занятий, влияя на последующее толкование результатов барьера.
Кроме того, задача социального взаимодействия может быть использована для стратификации мышей в устойчивые и восприимчивые популяции, а также по полу. При проведении Y-лабиринт барьер задачи, очень важно, чтобы записать как выбранную руку и задержку, чтобы достичь награды пищевой гранулы в каждом отдельном испытании. Другие важные и переводно соответствующие награды, связанные поведения, такие как девальвация результатов или прогрессивное соотношение, может быть выполнена после хронического социального поражения кортикостерона или хронических недискриминационных протоколов социального поражения.
