Ce protocole permet aux chercheurs d’examiner les effets du stress chronique sur la réponse effortuse chez les souris mâles et femelles. Un avantage de cette technique est que les souris mâles et femelles peuvent simultanément subir un paradigme validé de défaite sociale chronique permettant de comparer directement les comportements de récompense. Historiquement, la recherche préclinique sur les troubles de l’humeur a utilisé des tâches comportementales qui impliquent d’éviter les environnements menaçants.
Toutefois, les tâches de récompense et de motivation, comme le choix lié à l’effort, peuvent offrir une plus grande pertinence translationnelle. Pour préparer la solution du véhicule, dissoudre 3.375 grammes de bêta-cyclodextrine dans 750 millilitres d’eau du robinet dans un récipient en verre à vis d’un litre. Pour préparer la solution de corticosterone, dissoudre 3.375 grammes de bêta-cyclodextrine dans 750 millilitres d’eau du robinet, suivie de l’ajout de 26,25 milligrammes de corticosterone.
Dissoudre la corticostérone en solution dans un bain d’eau plus propre à ultrasons pendant environ 30 minutes à 40 kilohertz jusqu’à ce que le liquide démontre une apparence claire, puis remplir les bouteilles d’eau du véhicule et le groupe de souris corticosterone avec les solutions appropriées et enregistrer le volume de liquide consommé deux fois par semaine. Pour habituer les souris au labyrinthe Y, le lendemain de la privation de nourriture, placez un grand nombre de granulés alimentaires à base de céréales de 20 milligrammes dans les bouchons de deux tubes de centrifugeuse de 50 millilitres et placez un bouchon à l’extrémité de chaque bras du labyrinthe Y, puis placez une souris dans la boîte de départ du labyrinthe Y avec le séparateur de boîte de départ en place pendant quelques secondes avant d’enlever le séparateur et de permettre à la souris d’explorer le labyrinthe Y pendant 15 Minutes. Après deux jours d’accoutumaisement du labyrinthe Y, placez les granulés dans un capuchon pour le bras de récompense élevé et placez deux granulés dans un capuchon pour le bras de récompense faible.
Pour un essai de choix forcé haute récompense, bloquer l’accès au bras de récompense faible et placer la souris dans la boîte de départ pendant quelques secondes avant de supprimer le diviseur, permettant à la souris 60 secondes d’entrer dans le bras de récompense élevé pour consommer les granulés disponibles. Pour un essai de choix forcé à faible récompense, bloquez l’accès au bras de récompense élevé. Pour une formation libre choix, commencez chaque session par un essai de choix forcé haut et un bras bas avant de terminer 10 essais de libre choix.
Laissez la souris sélectionner l’un ou l’autre bras de labyrinthe. Une fois que la souris a voyagé jusqu’à l’extrémité du bras jusqu’au capuchon des granulés, placez un séparateur de bras derrière la souris, enfermant l’animal jusqu’à ce qu’il ait consommé les granulés. Enregistrez quel bras est sélectionné pour les 10 essais de libre choix par jour.
Une fois qu’une souris a sélectionné le bras de récompense élevé pour 7 essais sur 10 dans une journée d’entraînement de libre choix, placez une barrière de 10 centimètres à mi-chemin vers le bas du bras de récompense élevé dans le labyrinthe Y et effectuez au moins deux essais de choix forcés de bras haut et bas avec la barrière en place. Après avoir terminé les quatre essais, placez la souris dans la boîte de départ et laissez la souris choisir un bras pour 10 essais de libre choix avec la barrière de 10 centimètres au bras de récompense élevé en place. Le lendemain, habituez et testez la souris comme démontré, mais utilisez une barrière de 15 centimètres dans le bras de récompense élevé.
Le lendemain, testez la souris avec une barrière de 20 centimètres comme démontré. Pour les tests de résistance chroniques non discriminatoires à la défaite sociale, alignez les cages des mâles CD1 avec les mâles et les femelles C57BL/6J avec des cages CD1 à l’avant et des cages C57BL/6J adjacentes aux souris mâles CD1 dans la salle de défaite sociale. Pour commencer l’essai, placez un mâle adulte et une souris expérimentale C57BL/6J femelle adulte dans la cage d’origine de chaque mâle agresseur CD1 pour une séance de défaite sociale de cinq minutes et enregistrez la latence d’attaque et la fréquence des attaques pour les animaux expérimentaux mâles et femelles.
À la fin de la session, transférez la souris mâle C57BL/6J dans la cage des mâles CD1 co-logés séparés par une barrière en plexiglas perforée claire. Séparez les souris C57BL/6 femelles attaquantes avec une barrière de plexiglas perforée claire similaire. Pour une séance de contrôle, placez une souris femelle de contrôle dans la cage d’une souris mâle de contrôle C57BL/6.
Après cinq minutes, placez un séparateur de plexiglas perforé entre les animaux. À la fin de la première expérience, faites pivoter les souris pour les neuf sessions de défaite restantes, de sorte que chaque paire masculine et femelle C57BL/6 tourne une cage vers la gauche pour fournir une nouvelle interaction avec de nouvelles souris CD1 pour chaque session. La corticostérone chronique et les souris chroniques non discriminatoires de stress de défaite sociale montrent toutes les deux un poids corporel moyen réduit comparé au véhicule et aux animaux témoins.
Ces souris ont également consommé moins de chow moyen de laboratoire de cage à la maison. Les souris administrées par véhicule et corticosterone consomment un volume similaire de liquide pendant quatre semaines de traitement et trois semaines d’essais de comportement. Le stress chronique non discriminatoire de défaite sociale produit un phénotype inadapté chez les souris sensibles comparé aux souris résilientes ou témoins non exposées au stress social non discriminatoire chronique de défaite affichant une réduction du temps passé dans la zone d’interaction contenant une nouvelle souris CD1.
La corticosterone chronique et les souris chroniques de stress social non discriminatoire produisent un décalage dans la réponse effortable quand la hauteur de barrière augmente à 15 et 20 centimètres. La latence élevée et basse de bras de récompense avec la barrière de 15 centimètres n’est pas affectée par l’administration de corticostérone et est semblable pour les deux groupes avec les bras de récompense bas et élevés. Fait important, si la corticosterone chronique ou le stress chronique non discriminatoire de défaite sociale nuit à l’apprentissage de la tâche de barrière de Y-labyrinthe, ces souris peuvent ne pas atteindre le critère dans les sessions de formation de libre choix, impactant l’interprétation suivante de résultat de barrière.
En outre, la tâche d’interaction sociale peut être utilisée pour stratifier les souris en populations résilientes et sensibles, ainsi que par sexe. Lors de l’effectuer la tâche de barrière de Y-labyrinthe, il est essentiel d’enregistrer à la fois le bras sélectionné et la latence pour atteindre la récompense de granulés alimentaires dans chaque essai individuel. D’autres comportements importants et translationnels liés à la récompense, tels que la dévaluation des résultats ou le ratio progressif, peuvent être effectués à la suite de la défaite sociale chronique à la corticosterone ou des protocoles chroniques de défaite sociale non discriminatoire.
