此程序的总体目标是监测体内小鼠亚拉氏性出血后脑血管痉挛。这是通过应用高频彩色编码复式声像麻醉与异氟素。对成像数据进行处理，以确定颅内和颅内胡萝卜动脉的血流速度。
颅内血流加速速度表示脑血管痉挛。在这项研究中，我们对11至12周雌性C57BL/6N小鼠颅内和颅外动脉的血流速度进行了测量。这些老鼠要么接受SAH诱导手术，要么接受虚假手术，这在其他地方已经详细描述了。
准备超声波检查开关，进入动物ID。将超声波系统的加热板加热到37摄氏度。确保直肠温度探头已准备就绪，可使用。使用温水浴将超声波凝胶加热至37摄氏度。
准备脱毛霜、电极接触霜和眼药膏。确保传感器正确安装在机械臂上，并确保麻醉感应室与 4% 异丙烷和 40% 氧气齐平。将鼠标放入腔室一分钟，诱导麻醉。
用软膏保护眼睛。只有在达到足够深的麻醉后才能继续。在整个过程中，使用麻醉面膜使用1.5%的异氟兰和40%的氧气维持麻醉。
在第一步中，颅内胡萝卜动脉的血流速度通过颅内高频双子座造影确定。将鼠标放在超声波系统加热板的易感位置，以保持37摄氏度的体温。在两侧涂抹眼药膏。
在第一次考试之前，用电动剃须刀缩短了皮毛。然后使用脱毛霜化学去除剩余的头发。使用棉签展开并擦奶油两分钟，直到头发开始脱落。
再过两分钟，用铲子取出奶油和头发，用酒精性皮肤防腐剂对皮肤进行消毒。用导电膏涂上动物的四肢，用嵌入在板中的ECG电极上的胶带固定它们。将润滑油放在直肠温度探头上，并在必要时使用额外的加热灯小心插入，以监测体温。
检查超声波系统屏幕上是否正确显示生理参数、心电图和呼吸信号。如有必要，可以调整麻醉水平，以获得每分钟4至500次的目标心率。涂上超声波凝胶。
使用线性阵列传感器和高于每秒 200 帧的帧速率获取超声波图像并将其安装在机械臂上。将传感器放在向后倾斜 30 度的 occiput 上。使用 B 模式和 CW-Doppler 模式可视化右颅内胡萝卜动脉，并用控制单元来回移动传感器，直到我们找到动脉的最大流量。
要收集解剖信息，请使用传统的 B 模式和 CW-多普勒模式，然后单击获取按钮开始采集。要记录颅内血管的流动特征信息，请单击脉冲波多普勒按钮，将样本量放置在容器中心，并获取超过三秒的 Cine 循环。与左侧进行相同的。
下一步，颅内胡萝卜动脉的血流速度通过高频复式声像确定。将鼠标放在超声波系统加热板的超音速位置，以保持 37 摄氏度的体温。在第一次考试之前，用电动剃须刀去除颈部前部的头发。
然后使用前述的脱毛霜化学地去除剩余的头发。用导电膏涂上动物的四肢，用嵌入在板中的ECG电极上的胶带固定它们。将润滑油放在直肠温度探头上，并小心插入以监测体温。
如有必要，使用额外的加热灯。再次检查屏幕上生理参数的正确显示。用超声波凝胶涂抹颈部前部，加热至摄氏37度。
将传感器与动物平行放置并调整位置，以获取右胡萝卜动脉的纵向图像。使用 B 模式 CW-多普勒模式可视化右胡萝卜动脉。图像应包含右普通胡萝卜动脉、右内胡萝卜动脉和右外胡萝卜动脉。
要收集解剖信息，请使用传统的 B 模式和 CW-多普勒模式，然后单击获取按钮开始采集。要记录颅外胡萝卜动脉的流动特征信息，请单击脉冲波多普勒按钮，将样本体积置于普通胡萝卜动脉内部胡萝卜动脉和外部胡萝卜动脉中间的中心，并获取超过三秒的阴循环。与左侧进行相同的。
终止麻醉，将动物从加热板中取出，放入笼子里，放在加热至36摄氏度的孵化器中一小时，以防止体温过低，并检查是否完全恢复。下一步是处理超声波数据。使用外部工作站对高频超声波数据进行后期处理。
将 B 模式、CW-多普勒模式和 PW-多普勒模式图像和阴离子循环导入 Vevo LAB 软件。打开出口超声波研究。选择一种动物，打开颅内胡萝卜动脉的PW-多普勒阴循环。
在此协议中，通常记录相应流速曲线中的 7 到 8 个心跳。暂停胶片循环并单击测量按钮。选择血管包，点击 RICA PSV 测量右颅内胡萝卜动脉的峰值收缩压。
现在单击速度曲线的峰值，将直线拉至零线。通过点击正确的鼠标按钮确定测量结果。现在选择 RICA EDV 来测量末端舒张速度。
单击硅油末端速度曲线的最小皮疹。将线直接拉到零线，然后用正确的鼠标按钮单击确定测量结果。选择 RICA VTI 来测量速度时间积分。
单击速度曲线的开头左侧，然后用鼠标跟随曲线，直到舒张高原的末端。然后再次右键单击以确定测量结果。使用报告按钮导出颅内胡萝卜动脉的数据。
按导出并保存数据作为 VSI 报告文件。使用相同的方法测量右颅内胡萝卜动脉的 PSV、EDV 和 VTI，并相应地导出数据。与左侧相同，并使用 LICA PSV、EDV 和 VTI。
在五只小鼠中，有三只是SAH诱导的，而两只老鼠则接受虚假手术，颅内动脉和颅内胡萝卜动脉的血流速度在手术前一天确定，一、三、七天后确定。手术前，SAH和假动物之间的额外和颅内血流速度以及颅内和颅内血流的比例相似。在SAH上岗后的第一天，颅内或颅外血流速度或颅内和颅外血流之间的比例没有重大变化。
在第三天和第七天，内胡萝卜动脉的颅内血流速度显著增加，其中两只SAH动物表示在SAH之后出现脑血管痉挛。由于颅外血流速度几乎保持不变，在SAH动物中，颅内和颅外血流速度的比例在第七天也显著增加，表明脑血管痉挛。最后，高频彩色编码的跨颅双体声像可用于在体内测量小鼠颅内血流的速度。
类似人类患者的情况，颅内血流速度加速后，小鼠SAH指示血管痉挛。这里显示的超声学方法是快速和很少的侵入性。它允许纵向研究血管痉挛在穆林SAH模型。
