Este protocolo permite experimentos replicados de microalgas com pouca entrada do usuário. Ele foi projetado para pesquisadores que procuram atualizar de frascos monitorados manualmente para os frascos de bancada sem comprar reatores biológicos de fotos comerciais técnicos e caros. Este bio reator fotográfico permite a razão de luz e flexibilidade, monitoramento contínuo do crescimento e replicação triplicada.
Para começar, abra o software de aquisição de dados. Preencha a página de configuração e atribua arquivos de calibração aos seus respectivos sensores. No nome do arquivo do diretório, selecione a pasta correspondente do número da porta do módulo de entrada digital.
Clique na pasta atual e repita para todas as portas. Em seguida, clique em ok para passar para a página de registro. Em seguida, encha as garrafas de vidro para o volume desejado com o meio de cultivo e centrifugar a cultura do estoque em três tubos de 50 mililitros equilibrados para produzir três pelotas.
Adicione uma pelota a cada garrafa usando uma pipeta sorológica e meio fresco. Em seguida, solte um agitador magnético de 25 por oito milímetros em cada garrafa antes de selar a abertura da garrafa com uma rolha de borracha e tampa de parafuso de abertura roscada. Se forem instaladas as portas de amostragem opcionais, feche as válvulas.
Depois de localizar a extremidade de cada linha de gás dentro do tubo de PVC, conecte uma agulha à porta de isca de correio da válvula. Conecte cada garrafa ao seu sensor de gás perfurando cada rolha de borracha com a agulha correspondente. Em seguida, inicie cada sensor de gás individualmente verificando a caixa de marca no lado esquerdo da tela, clicando em iniciar e digitando um nome de arquivo.
Clique bem e repita para todos os sensores. Em seguida, ligue o bio reator fotográfico e certifique-se de que o controlador de iluminação multiplex digital esteja conectado a uma fonte de alimentação. Usando o botão no controlador multiplex digital, alternar entre a cena do ajudante e a cena de luz personalizada para garantir que o dispositivo esteja funcionando corretamente.
Para a amostragem de garrafas, prepare mais 500 mililitros do meio fresco antes de iniciar o experimento. Para coletar a amostra, feche a válvula na linha de gás e conecte uma seringa de 10 mililitros à válvula de porta de amostragem. Depois de conectar a seringa, abra a válvula de porta de amostragem e retire oito mililitros de cultura.
Em seguida, feche a válvula de porta de amostragem e desconecte a seringa. Em seguida, conecte-se à seringa contendo oito mililitros de meio fresco à válvula de porta de amostragem. Em seguida, abra a válvula e injete o meio fresco.
Por fim, feche a válvula de porta de amostragem e desconecte a seringa. Para exportar os dados, selecione arquivo e dados offline. Depois de selecionar todos os arquivos de log relevantes, exporte os dados para o software de planilha e salve.
Um experimento bem sucedido é caracterizado por um padrão diurno intimamente replicado da produção de oxigênio. A taxa de fluxo de oxigênio age como um proxy para a taxa de crescimento de uma cultura. Durante as horas iluminadas, a produção de gás aumenta constantemente e durante horas não iluminadas, a produção de gás pára.
O volume total de oxigênio produzido ao longo de quatro dias variou de 316 mililitros em tratamento De 902 mililitros em tratamento C.In 300 micro toupeiras por metro quadrado por segundo regime de luz, a temperatura aumentou em um máximo de 1,4 graus Celsius durante o dia. As temperaturas da cultura voltaram à linha de base durante a noite. Apesar de diferir em suas concentrações iniciais de biomassa, os tratamentos B e C geraram a mesma quantidade de biomassa total causando turnos idênticos em pH médio.
Os dados da taxa de fluxo de oxigênio on-line revelaram que cada tratamento apresentava taxas de crescimento diária variadas, o que também se refletiu nas medições de pH duas vezes por dia. No primeiro dia, a taxa de crescimento do tratamento B foi menor do que a do tratamento C.Enquanto no terceiro dia, as taxas de crescimento do tratamento B superaram as do tratamento C.Os dados da taxa de fluxo de oxigênio indicaram que o maior crescimento ocorreu no terceiro dia de tratamento B.As estimativas de crescimento baseadas no oxigênio total medido devem subestimar ligeiramente o crescimento da biomassa, válido para cinco dos sete exemplos. Dois exemplos superestimaram o crescimento.
Isso pode ter sido influenciado por experimentos sendo determinados no final da noite. A respiração noturna substancial aumenta o consumo de oxigênio, gera um vácuo de espaço na cabeça da garrafa, sugando o pacote com líquido de sensores de gás. Se a respiração pode ser alta, abrimos o espaço da cabeça durante a noite.
