Bu protokol, çok az kullanıcı girişi ile çoğaltılmış mikroalg deneylerini mümkün kılar. Teknik ve pahalı ticari fotoğraf biyo reaktörleri satın almadan manuel olarak izlenen şişelerden tezgah üstü şişelere geçmek isteyen araştırmacılar için tasarlanmıştır. Bu foto biyo reaktör, ışık oranı ve esnekliği, sürekli büyüme izleme ve üçlü replikasyon sağlar.
Başlamak için veri toplama yazılımını açın. Konfigürasyon sayfasını doldurun ve kalibrasyon dosyalarını ilgili sensörlere atayın. Dizin dosyası adı altında, karşılık gelen dijital giriş modülü bağlantı noktası numarası klasörünü seçin.
Geçerli klasöre tıklayın ve tüm bağlantı noktaları için tekrarlayın. Ardından, günlük sayfasına geçmek için Tamam'a tıklayın. Daha sonra, cam şişeleri yetiştirme ortamı ile istenen hacme doldurun ve üç pelet elde etmek için stok kültürünü üç dengeli 50 mililitrelik tüplerde santrifüj edin.
Serolojik pipet ve taze bir ortam kullanarak her şişeye bir pelet ekleyin. Ardından, şişe açıklığını kauçuk bir tıpa ve dişli açıklık vidalı kapağı ile kapatmadan önce her şişeye 25 x sekiz milimetrelik bir manyetik karıştırıcı bırakın. İsteğe bağlı örnekleme portları takılıysa, vanaları kapatın.
PVC borunun içindeki her gaz hattının ucunu bulduktan sonra, vananın posta cazibe portuna bir iğne takın. Her bir kauçuk tıpayı karşılık gelen iğneyle delerek her şişeyi gaz sensörüne bağlayın. Ardından, ekranın sol tarafındaki onay kutusunu işaretleyerek, başlat'a tıklayarak ve bir dosya adı girerek her gaz sensörünü ayrı ayrı başlatın.
Tamam'a tıklayın ve tüm sensörler için tekrarlayın. Ardından, fotoğraf biyo reaktörünü açın ve dijital multipleks aydınlatma denetleyicisinin bir güç kaynağına takılı olduğundan emin olun. Dijital çoklama denetleyicisindeki düğmeyi kullanarak, aygıtın düzgün çalıştığından emin olmak için yardımcı sahne ile özelleştirilmiş ışık sahnesi arasında geçiş yapın.
Şişe örneklemesi için, deneye başlamadan önce 500 mililitre taze ortam hazırlayın. Numuneyi toplamak için, gaz hattındaki vanayı kapatın ve numune alma portu vanasına 10 mililitrelik bir şırınga bağlayın. Şırıngayı bağladıktan sonra, örnekleme port valfini açın ve sekiz mililitre kültür çekin.
Ardından örnekleme port valfini kapatın ve şırınganın bağlantısını kesin. Ardından, sekiz mililitre taze ortam içeren şırıngaya örnekleme portu valfine bağlayın. Ardından valfi açın ve taze ortamı enjekte edin.
Son olarak, örnekleme port valfini kapatın ve şırınganın bağlantısını kesin. Verileri dışa aktarmak için dosya ve çevrimdışı verileri seçin. İlgili tüm günlük dosyalarını seçtikten sonra, verileri elektronik tablo yazılımına aktarın ve kaydedin.
Başarılı bir deney, yakından çoğaltılmış günlük oksijen üretim paterni ile karakterizedir. Oksijen akış hızı, bir kültürün büyüme hızı için bir vekil görevi görür. Işıklı saatlerde, gaz üretimi sürekli olarak artar ve aydınlatılmamış saatlerde gaz üretimi durur.
Dört gün boyunca üretilen toplam oksijen hacmi, saniyede 300 mikro mol kare ışık rejimi C.In A tedavisinde 316 mililitre ile tedavide 902 mililitre arasında değişmiştir, sıcaklık gün boyunca maksimum 1.4 santigrat derece artmıştır. Kültür sıcaklıkları bir gecede taban çizgisine geri döndü. İlk biyokütle konsantrasyonlarında farklılık göstermesine rağmen, B ve C tedavileri, orta pH'ta aynı kaymalara neden olan aynı miktarda toplam biyokütle üretti.
Çevrimiçi oksijen akış hızı verileri, her tedavinin değişen günlük büyüme oranlarına sahip olduğunu ve bunun da günde iki kez pH ölçümlerine yansıdığını ortaya koydu. Birinci günde, B tedavisinin büyüme hızı C tedavisinden daha düşüktü.Üçüncü güne gelindiğinde, B tedavisinin büyüme oranları tedavinin hızını aştı C.Oksijen akış hızı verileri, en yüksek büyümenin tedavide üçüncü günde gerçekleştiğini gösterdi B.Toplam ölçülen oksijene dayanan büyüme tahminlerinin, yedi örnekten beşi için geçerli olan biyokütle büyümesini biraz hafife alması bekleniyordu. İki örnek, büyümeyi abarttı.
Bu, gecenin sonunda belirlenen deneylerden etkilenmiş olabilir. Önemli gece solunumu oksijen tüketimini artırır, bir şişe kafası boşluğu vakumu oluşturur, gaz sensörlerinden sıvı içeren paketi emer. Solunum yüksek olabilirse, gece boyunca kafa boşluğunu açarız.
