左旋多巴诱导的帕金森病大鼠模型中运动障碍的诱导与评估

我们的方案为帕金森病大鼠模型中左旋多巴诱导的运动障碍的可靠诱导和全面评估提供了详细的方法。我们的运动障碍评定量表的主要优点是，它允许量化给定异常不自主运动的强度和表现出该行为所花费的时间。左旋多巴诱导的运动障碍的可靠动物模型对于实现找到有效治疗方法以减少或消除帕金森病患者的副作用的最终目标至关重要。

通过每周称量大鼠以根据重量变化计算适当的药物量来开始实验的准备工作。为大鼠提供营养完整且高度可口的零食。在左旋多巴治疗的第一天， 将大鼠转移到单一的住房， 由机构动物护理和使用委员会批准的浓缩.

并在整个研究过程中将大鼠保持在单一的外壳中，以避免同伴干扰行为评估。在运动障碍评级日，取出水瓶，食物架和笼子中的富集以避免干扰行为评估，并将笼子以大约45度角放置在钢丝架上，然后将识别标签向上翻转。在注射L-DOPA之前，在琥珀小瓶中加入适当体积的无菌盐水到预称重冻干L-DOPA和苄丝胍混合物中，并充分摇动10秒。

制备后，立即在装有26号针头的单个注射器中填充每个动物所需的L-DOPA-Benserazide混合物体积，并用单个动物标识标记每个注射器。将第一个笼子带到注射台后，将大鼠从笼中取出，将其放在注射表面上。使用非优势手将手掌靠在表面上约束大鼠的头部和肩部，并用拇指和食指将背部的皮肤覆盖在肩胛骨上。

使用惯用手将L-DOPA体积注射到手指之间的皮下空间，使针头与身体平行，以避免肌内注射。注射后，将大鼠移入笼中。接下来，将计时器设置为一到两分钟，并重复该过程，每一到两分钟注射一只大鼠，直到所有大鼠都注射完毕。

在评级日，在笼子旁边放置一个计时器，以观察左旋多巴诱导的运动障碍或LID行为强度，同时估计评级期间任何给定行为的频率。评估肌张力障碍和运动过度运动的强度和频率，包括LID行为的初始发作，峰值行为和所需时间点的下降阶段。如果使用一分钟的评级间隔，则将计时器设置为一分钟，以对第一只大鼠进行评级，并以一分钟的间隔继续对所有大鼠进行评级。

帕金森病大鼠异常非自愿行为的LID评级被分类为包括行为的强度和频率。在大鼠中观察到一系列异常不自主运动，包括肌张力障碍，运动过度和刻板行为。代表性分析提供了在整个实验时间表和剂量方案中以峰值剂量LID呈现的数据的示例。

峰值剂量LID被定义为组平均LID评分最高的时间。此外，在不同的L-DPOA浓度下，在每个每日评级时间过程中检查LID评级数据，并将各组合并并绘制为单个动物。来自行为评估受试者的死后组织可用于探索与左旋多巴诱导的运动障碍相关的分子机制，以及治疗干预对此类分子机制的影响。

左旋多巴诱导的运动障碍的动物模型有助于阐明被认为是这种行为疾病背后的几种机制。这种理解导致了对几个靶点的临床前和临床评估。