白细胞介素10缺陷小鼠模型中粪便微生物群移植的治疗评估

三项临床实验表明，粪便微生物群移植具有治疗许多人类疾病的潜力。进一步的机理研究将有助于将FMT从工作台带到床边。该方法采用口服管饲法作为给药途径，可实现更精确的容积输送和快速吸收。

它只需要中等技术技能。演示该程序的将是来自我们实验室的高级研究员钟晓英。首先准备无菌纸巾、钝端镊子和 50 毫升锥形管。

将一些纸巾和镊子放入单独的高压灭菌袋中，并在 180 摄氏度的干热下高压灭菌 30 分钟。称量无菌锥形管并在管上写下它们的重量。打开动物房的生物安全柜。

取一个没有任何垫料的高压灭菌清洁小鼠笼，并将其放入生物安全柜中。取下盖子和食品架，然后将它们放在柜子内。在笼子的底部放一些无菌纸巾，然后将金属架放回笼子的顶部。

确定年龄匹配的粪便供体并将小鼠笼放入生物安全柜中。打开笼子，轻轻抓住供体鼠标的尾巴，将其放在干净笼子顶部的金属架上。将笼盖放在架子的顶部，等待动物排便。

收集粪便颗粒并将它们放入无菌的50毫升锥形管中。按性别拉丸。再次称量试管并计算粪便颗粒的重量。

通过在生理盐水中加入10%甘油溶液来制备无菌溶液。每克粪便颗粒向锥形管中加入10毫升该溶液。使用通风橱内的台式均质器以低速均质三次，持续 30 秒，以重新悬浮粪便。

通过两层无菌棉纱布过滤粪便悬浮液。将滤液暂时存放在冰箱中长达六个小时，或将其包装到无菌低温小瓶中并存放在零下 80 度的冰箱中。按照标准程序彻底清洁均质机或搅拌机。

如果使用冷冻样品，请在冰上解冻冷冻粪便悬浮液。通过涡旋混合解冻的粪便悬浮液。将新鲜或解冻的粪便悬浮液转移到一毫升注射器中。

称量小鼠并选择正确的管饲针尺寸和最大剂量体积。通过测量从小鼠鼻尖到胸骨底部的长度来测试管饲针。用盐水或粪便悬浮液中的10%甘油填充注射器，并去除注射器和针头内的气泡。

将一个小鼠笼放在生物安全柜中。取下塑料笼盖并将金属架留在原位。用一只手打开金属架。

抓住一只鼠标的尾巴，把它放在金属架上。用一只手抓住老鼠的尾巴，用另一只手的拇指和中指抓住肩膀上的皮肤来约束动物。轻轻地将动物的头部向后伸出，并用一只手将头部固定到位。

将管饲针放在口腔内的舌头顶部。沿着上托盘轻轻前进，直到针到达食道。通过一个动作平稳地通过针头。

正确放置并验证针头后，通过推动连接到针头上的注射器来缓慢施用材料。给药后，轻轻拉出针头。标记鼠标并将其放回其主笼。

通过寻找呼吸困难或痛苦的迹象来监测动物 5 到 10 分钟。在粪便微生物群移植后12至24小时内再次监测小鼠。酶免疫测定显示，白细胞介素10缺陷小鼠血浆中B型利钠肽明显升高。

健康的供体粪便微生物群移植显着减轻了B型利钠肽水平的增加。超声心动图检测到与野生型小鼠相比，白细胞介素10缺陷小鼠的左心室射血分数显着降低。粪便微生物群移植显著消除了这种减少。

这些发现表明，健康的供体粪便微生物群移植减轻了结肠炎引起的心脏损伤。尝试该方案时，选择正确的管饲针至关重要。对于初学者来说，柔性塑料喂食管可能是更好的选择。

在管饲前练习动物处理也很重要。