研究卵巢切除小鼠模型中子宫对妊娠建立的贡献的方法

因此，很难区分子宫和卵巢荷尔蒙对怀孕的影响，因为两者密切相关。因此，该协议允许我们直接检查子宫贡献。虽然其中一些技术（如卵巢切除术）具有很强的侵入性，但它们在练习和训练后相对简单，这使得它们适合刚接触小鼠模型的研究人员。

因此，这种方法可以用来理解HPG轴的更广泛调节，因为卵巢和子宫在该轴的调节中都起着重要作用。如果您以前从未执行过这些技术，请咨询您研究所的兽医团队以获得培训和支持。首先，在脊柱驼背下方的凹痕处剃出一小块区域后，轻轻地将其轻拍在眼睛上，将眼睛润滑剂大量涂抹在麻醉的小鼠上。

将0.1毫升卡洛芬皮下注射到颈部的肚子中。通过捏住动物的后脚趾并检查反射来测试动物是否被麻醉。接下来，将Betadine应用于手术部位。

然后用手术布覆盖它。使用鼠齿镊子，向上拉开驼背处的皮肤，并做一个五毫米的纵向切口。然后，使用钝钳将皮肤从下面的肌肉层向下解剖到一侧朝向肾脏。

通过肌肉壁识别肾脏、卵巢和卵巢脂肪垫。用镊子抓住并抬起肌肉层。然后，用剪刀做一个0.5到1厘米长的切口，用一对钝钳将卵巢垫拉过切口。

接下来，使用弯曲的持针器，夹在子宫角远端的卵巢和输卵管下方，并用剪刀切除卵巢。30 秒后，取下夹子并用无菌纱布轻拍。要关闭肌肉壁切口，请使用镊子抬起切口的顶部。

然后使用真丝缝线将切口与外科医生的结绑在一起。使用一毫升注射器局部涂抹几滴布比卡因，没有针头连接，并用无菌纱布轻拍多余的布比卡因。在另一侧进行类似的卵巢切除术后，通过将皮肤的两侧压在一起并应用几个七毫米的手术夹来关闭皮肤切口，为伤口肿胀留出空间。

将所有必需的设备放在层流或II类生物安全罩内的箔纸上，并进行紫外线消毒20分钟。用100%脱硫醇清洗硅橡胶管，使其在引擎盖内风干。干燥后，使用手术刀将管子切成一厘米长的段。

接下来，在没有柱塞的情况下将大约200微升密封剂挤入注射器中。更换柱塞并推出少量密封剂。将密封剂涂在管子的一端，用戴手套的手指将其平滑。

并让密封剂在引擎盖中干燥过夜或在紫外线下干燥 30 分钟。接下来，将黄体酮粉倒入无菌培养皿中。在镊子的帮助下将粉末舀成颗粒。

将颗粒的密封端沿着罩表面轻敲以冷凝粉末。然后用密封剂密封开口端。将装有颗粒的培养皿包裹在箔纸中以保护它们免受光照。

在皮下插入前约72小时，通过在木炭剥离的FCS中孵育来激活颗粒。展示这一程序的是哈德逊医学研究所的早期职业研究科学家Fiona Cousins博士。在用皮下雌二醇注射给动物激素灌注后，在人工蜕膜化前两天用皮下孕酮颗粒灌注动物。

手术前，麻醉小鼠并通过检查脚趾捏反射来测试麻醉深度。然后将鼠标置于俯卧位置，抬起尾巴，慢慢将六毫米的窥器插入其阴道。将鼠标的下半身放在非惯用手的前两个手指之间。

然后，用食指轻轻向上推尾巴，以便更好地进入阴道。将20微升芝麻油转移到非手术胚胎移植尖端中，并将尖端通过阴道和子宫颈插入子宫角。慢慢排出油。

完成后，从阴道中取出窥器。在这项研究中，80%的小鼠成功进行了蜕膜化，而20%的小鼠没有。因此，在将非甾体抗炎药装置通过子宫颈插入小鼠的子宫角时，保持所有手术设备和工作区域无菌并让患者保持无菌非常重要。

诱导人工蜕膜化后，可以去除黄体酮腭以模拟月经并研究子宫内膜分解。使用这种方法，我们可以研究子宫生物学和独立于卵巢影响的调节。这在生育和妇女健康领域确实令人兴奋。