小鼠无创气管内脂多糖滴注

我们的协议提出了一种新的无创LPS从气管到肺部的无创输送方法，更准确。第一次尝试这种方法的人应该花很多精力来寻找气管的位置。要准备插管平台，请将绳子穿过两个孔并将其末端绑在立管顶部的小突起上。

接下来，将两个橡皮筋连接到回形针的每一端，并将它们粘在立管的背面。最后，将立管以 90 度角固定在底座上。将套管组装到套管笔上，然后打开笔的灯。

接下来，使用70%酒精对小型手术钳和巴斯德移液管进行消毒。要制备测试化合物溶液，请在一毫升pH 7.2 PBS中加入三毫克脂多糖或LPS。接下来，将10毫克戊巴比妥钠溶解在1毫升生理盐水中，并使用0.45微米注射器过滤器过滤溶液。

将麻醉小鼠放在插管平台上。然后用绳子固定上门牙，用橡皮筋固定两个前脚掌。用镊子，拔出舌头并握住它。

将套管沿口腔缓慢推至下颌会厌。用套管笔的灯找到气管，然后慢慢地将套管插入其中。然后取出插管笔，将套管留在里面。

将巴斯德移液器插入套管接头并按压头部。气管插管成功后，使用平头微型注射器，通过套管以每公斤三毫克剂量滴注制备的LPS溶液。完成后，取出微量注射器和套管。

将鼠标从插管平台上取出，并将其放在单独的笼子中以恢复。观察小鼠的呼吸状态，直到它恢复并恢复意识。在LPS气管滴注后12小时，评估炎性细胞因子TNF-α和肺干湿重量比的表达，并与其他滴注方法进行比较。

与空白对照组相比，无创口咽插管组血清TNF-α水平显著升高。肺干湿重量比也增加，达到与外科气管插管组相同的水平。在寻找气管位置的过程中不要划伤气管很重要。

该技术还可用于输送需要以非侵入性方式到达肺部的其他药物。