Protokolümüz, trakeadan akciğere yeni bir noninvaziv LPS dağıtım yöntemi önermektedir. Bu yöntemi ilk kez deneyen kişiler, trakeanın pozisyonunu bulmak için çok çaba sarf etmelidir. Entübasyon platformunu hazırlamak için, ipi iki delikten geçirin ve uçlarını yükselticinin üstündeki küçük çıkıntılara bağlayın.
Ardından, ataşın her iki ucuna iki lastik bant takın ve bunları yükselticinin arkasına bantlayın. Son olarak, yükselticiyi tabana 90 derecelik bir açıyla sabitleyin. Kanülü bir kanül kalemi üzerine monte edin ve kalemin ışığını açın.
Ardından, küçük cerrahi forseps ve Pasteur pipetini% 70 alkol kullanarak dezenfekte edin. Test bileşiği çözeltisini hazırlamak için, bir mililitre pH 7.2 PBS'ye üç miligram lipopolisakkarit veya LPS ekleyin. Daha sonra, 10 miligram pentobarbital sodyumu bir mililitre normal salin içinde çözün ve çözeltiyi 0.45 mikrometrelik bir şırınga filtresi kullanarak filtreleyin.
Anestezi uygulanan fareyi entübasyon platformuna yerleştirin. Ardından üst ön dişleri iple ve iki ön ayağı lastik bantlarla sabitleyin. Cımbız kullanarak dili dışarı çekin ve tutun.
Kanülü ağız boyunca yavaşça mandibuler epiglottiste doğru itin. Trakeayı kanül kaleminin ışığıyla bulun ve kanülü yavaşça içine yerleştirin. Daha sonra entübasyon kalemini çekin ve kanülü içeride bırakın.
Pasteur pipetini kanül eklemine yerleştirin ve kafaya bastırın. Başarılı endotrakeal entübasyondan sonra, düz başlı bir mikroşırınga kullanarak, hazırlanan LPS çözeltisini kanül yoluyla kilogram dozu başına üç miligramda aşılayın. İşiniz bittiğinde, mikroşırınga ve kanülü çıkarın.
Fareyi entübasyon platformundan çıkarın ve kurtarmak için ayrı bir kafese yerleştirin. İyileşene ve bilincini yeniden kazanana kadar farenin solunum durumunu gözlemleyin. LPS trakea instilasyonundan 12 saat sonra, inflamatuar sitokin, TNF-alfa ekspresyonu ve akciğer kuru-ıslak ağırlık oranı değerlendirildi ve diğer instilasyon yöntemleriyle karşılaştırıldı.
Noninvaziv orofaringeal entübasyon grubunda serum TNF-alfa düzeyleri boş kontrol grubuna göre anlamlı olarak artmıştır. Akciğer kuru-ıslak ağırlık oranı da artarak cerrahi trakeal entübasyon grubunda olduğu gibi aynı seviyeye ulaştı. Trakeanın yerini bulma sürecinde trakeayı çizmemek önemlidir.
Bu teknik, akciğere invaziv olmayan bir şekilde ulaşması gereken diğer ilaçları vermek için de kullanılabilir.
