Herstellung und Charakterisierung von Einzel-und Multi-Wirkstoff beladen Körperlich Eingeschlossene Polymermicellen

Zusammenfassung

The goal of this protocol is to describe the preparation and characterization of physically entrapped, poorly water soluble drugs in micellar drug delivery systems composed of amphiphilic block copolymers.

Zusammenfassung

Amphiphile Blockcopolymere wie Polyethylenglykol- Block -Polymilchsäure (PEG-b-PLA) können durch Selbstorganisation Micellen oberhalb ihrer kritischen Mizellenkonzentration bilden hydrophobe Kerne durch hydrophile Schale in wässrigen Umgebungen umgeben. Der Kern dieser Mizellen können genutzt werden, um hydrophobe, schlecht wasserlöslichen Medikamenten wie Docetaxel (DTX) und Everolimus (EVR) zu laden. Systematische Charakterisierung der Mizellen-Struktur und Wirkstoffbeladung Fähigkeiten sind wichtig, vor der in vitro und in vivo-Studien durchgeführt werden. Das Ziel des hierin beschriebenen Protokolls ist es, die notwendigen Schritte zur Charakterisierung standardisierten micellare Produkte erzielen. DTX EVR intrinsische Löslichkeiten von 1,9 und 9,6 ug / ml Die Herstellung dieser Mizellen kann durch Lösungsmittelgießen, welche die Wasserlöslichkeit des DTX EVR bis 1,86 und 1,85 mg / ml erhöht erreicht werden. Arzneimittelstabilität in Mizellen evalüber 48 Stunden bei Raumtemperatur ausgewertet zeigt an, dass 97% oder mehr der Arzneimittel in Lösung gehalten wird. Mizellengröße wurde unter Verwendung der dynamischen Lichtstreuung bewertet und zeigte, daß die Größe dieser Micellen unter 50 nm und hing von dem Molekulargewicht des Polymers. Wirkstofffreisetzung aus den Micellen wurde mittels Dialyse unter Sink-Bedingungen bei pH 7,4 ^bei 37 ° C über 48 Stunden beurteilt. Kurvenanpassung Ergebnisse zeigen, dass Wirkstofffreisetzung ist von einem Prozess erster Ordnung anzeigt, dass sie die Diffusion angetrieben.

Einleitung

Amphiphilen Blockcopolymeren mit sich wiederholenden Struktur aus hydrophilen und hydrophoben Domänen spontan selbstorganisieren, um dreidimensionale makromolekularen Anordnungen als polymere Mizellen zu bilden. Diese Strukturen haben eine innere hydrophobe Kern, der von einer hydrophilen Schale umgeben ist. Der hydrophobe Kern hat die Fähigkeit, hydrophobe Arzneimittel entweder durch physikalischen Einschluß durch hydrophobe Wechselwirkungen oder durch chemische Konjugation an das Polymergerüst einzubauen. ¹ Viele Vorteile bestehen bei der Verwendung dieser Blockcopolymere Micellen zur Arzneimittelabgabe zu bilden. Diese umfassen den Einbau von schlecht l....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokoll

1. Herstellung von Einzel- und Multi-Drogen-Loaded Mizellen durch Lösungsmittelgießen Methode

1. Abwiegen DTX 1 mg oder EVR 1 mg oder beide Medikamente bei 1 mg jeweils für die Dual-Drogen Mizellen (DDM).
2. Man wiegt 15 mg PEG _{2000 -} b -PLA ₁₈₀₀ oder _PEG 4000 - b -PLA _{2200 für} individuelle oder DDM.
3. Lösen die Arzneimittel / Drogen und das Polymer in 0,5 ml Acetonitril und in eine 5 ml-Rundkolben.
4. Bilden eine dünne Arzneimittelpolymerschicht verteilt durch Verdampfen des Arzneimittel (s) -Polymer Acetonitril-Lösung unter vermindertem Druck unter Verwendung eines Rotations....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Ergebnisse

Einzelne DTX oder EVR Mizellen und DTX und EVR DDM in PEG-b -PLA Mizellen erfolgreich entweder in _PEG 4000 formuliert - b -PLA ₂₂₀₀ oder PEG _{2000 -} b -PLA _{1800 (Abbildung} 1).

DTX EVR und DDM zeigten ähnliche Stabilität in PEG _{4000 -} b -PLA ₂₂₀₀ oder PEG _{2000 -} b -PLA ₁₈₀₀ über 48 Stunden (Abbildung 2). Anfänglich.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Diskussion

The use of polymeric micelles for drug delivery continues to expand due to their versatility and ability to deliver hydrophobic drugs for various disease states. Therefore, the techniques needed to prepare and characterize these formulations prior to use in cell culture or animals is a critical first step to determine the best pairing between the drug and the polymer. PEG-b-PLA are excellent amphiphilic block copolymers for drug delivery purposes. However, the block length of the hydrophilic and hydrophobic s.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
PEG2000-b-PLA1800	Advanced Polymer Materials, Inc	6-01- PLA/2000	PLA MW can be specified on ordering
PEG4000-b-PLA2200	Advanced Polymer Materials, Inc	6-01- PLA/4000	PLA MW can be specified on ordering
Docetaxel	LC Laboratories	D-1000	100 mg
Everolimus	LC Laboratories	E-4040	100 mg
Acetonitrile	EMD/VWR	EM-AX0145-1	HPLC grade; 4 L
Round bottom flask	Glassco/VWR	89426-496	5 ml
RV 10 Control Rotary Evaporators	IKA Works	8025001	Rotoevaporator
Shimadzhu HPLC with DAD detector	Shimadzhu		RP-HPLC
Slide-a-lyzer dialysis casette MWCO 7000	Thermo Scientific, Inc	66370	3 ml
Phosphate buffer pH 7.4, 200 mM	VWR	100190-870	500 ml
Malvern NanoZS	Malvern Instruments, UK		DLS
Nylon filter	Acrodisc/VWR	28143-242	13 mm; 0.2µM
Phosphoric acid, NF	Spectrum Chemical/VWR	700000-626	100 ml
GraphPad Prism	www.graphpad.com		Analysis software
Zorbax SB-C8 Rapid Resolution cartridge	Agilent Technologies	866953-906	4.6 ×75 mm, 3.5 μm