Eine optimierte Reverse-Poly-Transfektionstechnik auf Basis embryonaler Stammzellen der Maus zur schnellen Erforschung von Nukleinsäureverhältnissen

Unsere Arbeit konzentriert sich im Allgemeinen auf die Verwendung synthetischer genetischer Geräte zur Manipulation des Schicksals und Verhaltens von Stammzellen. Durch die Kontrolle zellulärer Zustände wollen wir die Entwicklung von Zelltherapien der nächsten Generation vorantreiben. In jüngster Zeit wurde ein tieferes Verständnis des Zusammenhangs zwischen der Dosierung eines schicksalsbestimmenden Gens und der Abstammung der Zelle etabliert.

Erleichtert wurde dies durch die Entwicklung genetischer Controller, die in der Lage sind, ein bestimmtes Gen präzise zu titrieren. Klassische molekularbiologische Techniken wie Transfektion oder lentivirale Transduktion zur einfachen Genüberexpression werden immer eine tragende Säule sein. Unser Fachgebiet hat jedoch kürzlich synthetische Geräte eingeführt, die lineares und nichtlineares Feedback enthalten, um komplexere Ergebnisse aus der gelieferten DNA zu erhalten.

Die Gendosis spielt eine Schlüsselrolle bei der Bestimmung des Ergebnisses der Genexpression. Bei der Verabreichung mehrerer exogener Gene ist ein wichtiger experimenteller Faktor, wie viel von jedem Gen das optimale oder gewünschte Ergebnis liefert. Unser Protokoll ermöglicht es Forschern, in einer einzigen Behandlung schnell über Dosierungen hinweg zu scannen und nach dem gewünschten Verhältnis von DNA-Geräten zu suchen.