Оптимизированный метод обратной политрансфекции на основе эмбриональных стволовых клеток мыши для быстрого исследования соотношения нуклеиновых кислот

Please note that all translations are AI generated. Click here for the English version.

922 Views

•

06:04 min

•

December 8th, 2023

DOI :

10.3791/65766-v

December 8th, 2023

•

Kieran Maheden¹, Karen Hwang¹, Ipek Egilmez¹, Nika Shakiba¹

¹School of Biomedical Engineering, University of British Columbia

Транскрипт

Наша работа, как правило, сосредоточена на использовании синтетических генетических устройств для манипулирования судьбой и поведением стволовых клеток. Контролируя клеточное состояние, мы стремимся продвигать развитие клеточной терапии следующего поколения. В последнее время было установлено более глубокое понимание взаимосвязи между дозировкой гена, определяющего судьбу, и линией клетки.

Этому способствовала разработка генетических регуляторов, способных точно титровать данный ген. Классические методы молекулярной биологии, такие как трансфекция или лентивирусная трансдукция для простой экспрессии генов, всегда будут основными. Тем не менее, в последнее время в нашей области были приняты синтетические устройства, которые включают в себя линейную и нелинейную обратную связь для получения более сложных результатов из доставленной ДНК.

Дозировка генов играет ключевую роль в определении результата экспрессии генов. При доставке нескольких экзогенных генов ключевым экспериментальным фактором является то, сколько каждого гена даст оптимальный или желаемый результат. Наш протокол позволяет исследователям быстро сканировать различные дозировки за одну процедуру, ища желаемое соотношение устройств ДНК.

Резюме

Смотреть дополнительные видео

202

Главы в этом видео

0:00

Introduction

1:21

Preparation of Mouse Pluripotent Stem Cells (mPSCs) for Transfection

2:40

Reverse and Forward Transfection of Mouse Pluripotent Stem Cells (mPSCs)