Legen Sie zu Beginn das sedierte Ambystoma Mexicanum mit der Bauchseite nach unten auf feuchte Papiertücher, die in 0,03%iger Benzocainlösung getränkt sind. Decken Sie das Tier mit Benzocain-getränkten Papiertüchern ab. Verwenden Sie eine Ringzange, um die operative Hintergliedmaße zu dehnen.
Machen Sie mit einem Skalpell einen seitlichen Längsschnitt über dem Oberschenkelknochen, der den gesamten Oberschenkel in der oberen hinteren Extremität überspannt. Verschieben Sie die Muskeln und Nerven vorsichtig von der Operationsstelle, ohne zu schneiden. Legen Sie eine Bode-Pinzette vorsichtig unter den Oberschenkelknochen, um ihn für die Operation freizulegen.
Platzieren Sie nun eine starre 7,75 Millimeter große Vierloch-Fixatorplatte entlang der Femurdiaphyse, ohne die Gelenke zu berühren, und fixieren Sie sie mit einer Pinzette in der ausgerichteten Position. Verwenden Sie vier zwei Millimeter große Titanschrauben, um den Knochen an der Platte zu befestigen. Bohren Sie unter der Spülung mit dem 0,7-fachen PBS und 1 % Penicillin-Streptomycin manuell, um das erste Loch im Knochen für das Einsetzen der Schraube zu schaffen.
Setze dann die erste Schraube in das Loch. Setzen Sie die Sägeführungsvorrichtung auf die erste Schraube und richten Sie sie mit Knochen und Platte aus. Verwenden Sie die Sägeführungsvorrichtung zum Bohren und Einsetzen der restlichen Schrauben.
Nachdem Sie die Ausrichtung der Platte mit dem Knochen sichergestellt haben, entfernen Sie die Sägeführung und brechen Sie mit einem Schraubendreher die Griffe von den Schrauben ab. Legen Sie ein Stück sterilisierte Kunststofffolie unter den Oberschenkelknochen, um Schäden am Weichgewebe während des Osteotomieprozesses zu vermeiden. Platzieren Sie dann eine Gigli-Drahtsäge zwischen Knochen und Schutzfolie.
Schneiden Sie den Knochen mit einer Gigli-Drahtsäge und machen Sie einen einzigen 0,7-Millimeter-Schnitt im Oberschenkelknochen. Entfernen Sie die Säge und die Schutzfolie und spülen Sie die Operationsstelle mit 0,7-fachem PBS und 1 % Penicillin-Streptomycin. Bedecken Sie die Oberseite der Platte und der Schrauben mit sterilem Knochenwachs, um Haut und Muskeln vor Reizungen durch die Ränder der Schrauben zu schützen.
Lege Muskeln und Haut auf das Wachs. Verschließen Sie die Schnittstelle mit einer synthetischen Naht der Größe 7,0 mit einfachen unterbrochenen Stichen. Um nach der Operation wieder aufzuwachen, setzen Sie das Tier in ein frisches Aquarium mit künstlichem Teichwasser, das mit Penicillin, Streptomycin und Butorphanol angereichert ist.
Mikro-CT und histologische Analyse ermöglichten die Visualisierung von Knochen, Fragmentpositionen und Lückengrößen sowie den Heilungszustand. Bemerkenswert ist, dass Ambystoma Mexicanum drei Wochen nach der Operation im Gegensatz zu Säugetieren keine schwielige Formation zeigte. Nach drei Monaten war eine knorpelige Hornhaut sichtbar und sechs Monate nach der Operation trat ein verknöcherter knöcherner Kallus auf.
