Name: transient middle cerebral artery occlusion model of neonatal stroke in p10 rats
Uploaded: 2017-04-21T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats at JoVE.com

Funding was provided by the NIH K08 NS064094 and UCSF REAC grants. The authors would like to acknowledge Nikita Derguin, Zinalda Vexler, and Joel Faustino for their assistance in the development of this technique.

Alle Tierforschung wurde von der University of California, San Francisco Ausschuss für Tierforschung genehmigt und wurde in Übereinstimmung mit dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren (US Department of Health and Human Services, Veröffentlichungs - Nr 85-23, 1985 durchgeführt ). Die Tiere wurden eng von Tierärzten der UCSF Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC), akkreditiert durch AAALAC überwacht. Eine weibliche Sprague-Dawley-Ratte mit einem 8 Tage alten Wurf (10 Welpen pro Wurf) erhalten. Die Mutter und ihre Welpen wurden Nahrung und Wasser ad libitum gegeben und in einer temperatur- und lichtgesteuerte Tierstation mit täglichen Anreicherung pro IACUC Protokoll untergebracht, bis die Welpen 10 Tage alt waren. Alle chirurgischen Instrumente in diesem Verfahren verwendet wurden autoklaviert Sterilität zu gewährleisten. Sterility von Instrumentenspitzen wird während der Operation beibehalten. 1. Middle Cerebral Artery Occlusion <ol><li> Wiegen Sie die Welpen und ensure, dass es das richtige Gewicht (19-21 g). Anesthetize den Welpen in 3% Isofluran in 100% O 2 und stellen Sie sicher , dass es keine Antwort auf einen Fuß Prise ist. Aufrechterhaltung der Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C mit der Verwendung von einem Heizkissen unter der chirurgischen Stufe. </li><li> Sichern das Tier in einer Rückenlage mit Klebeband über den Schulterbereichen. Mit einem sterilen Wattestäbchen, Tupfer den vorderen Halsbereich mit Povidon-Iod-Lösung mit einem Tupfer von 70% Ethanol in Wasser bidest, zwischen jeder alternierenden Lösung für vier Tupfer insgesamt. </li><li> Vor Ort infiltriert 0,25% Bupivacain in die geplante Einschnittstelle. Verwendung eines Stereoskop, stellen eine Mittellinienincision 5 bis 7 mm anteriore zervikale Inzision der Arteria carotis communis (CCA) zu belichten. Platzieren 2-4 Retraktoren den Hohlraum offen ist und die Arterie freigelegt zu halten. </li><li> Suchen Sie die Arteria carotis interna (ICA), A. occipitalis (OA) und A. carotis externa (ECA). Bräutigam die Arterien eine klare Sicht zu bekommen. sein Autoeful nicht den Vagusnerv zu stören. HINWEIS: Bei scheinoperierten Welpen wird die inicision offen gelassen und die Arterien freigelegt wird, wonach der Einschnitt geschlossen wird vernäht. Die Gesamtzeit der Anästhesie ist äquivalent zu derjenigen der Okklusion Chirurgie. </li><li> 1,5 cm geschnitten, von 6-0 Seiden geflochtene Nähfaden. Unbraid die Naht, Einzelstränge herausziehen. Achten Sie darauf, dass die einzelnen Stränge sind ordentlich und nicht ausgefranst. Hinweis: Falls erforderlich, smoothe die ausgefransten Ende durch den einzelnen Strang in sterilem Wasser eintaucht und den Strang mit Pinzettenspitzen pflegen. </li><li> Während des Nahtstrang mit 45-Grad-Pinzette, die Zange in einer geschwungenen Bogenbewegung bewegt unter dem ICA zu gehen, so daß die Pinzettenspitzen zwischen den ICA und OA entstehen. HINWEIS: Wenn die Präparation gut gemacht ist, wird dieser Schritt relativ einfach sein. Wenn die ICA und OA berühren, darauf achten, nicht die Arterien reissen, wenn die Zange mit der ICA zu isolieren. Wenn die Blutung auftritt, Druck auf die Arterie mit der Zange bisdie Blutung stoppt. Absorbiert das Blut mit einem sterilen Tupfer. </li><li> Ergreifen Sie das Ende des Nahtfadens, der durch die Zange gehalten wird, und ziehen Sie es so, dass das Ende leicht zugänglich ist. Lassen Sie den Strang aus der Zange und zurück , um die Zange aus unter dem ICA, Umkehren der Bewegung in Schritt 1.5 (1A). </li><li> Binden Sie eine temporäre Ligatur um den ICA an der Basis, in der Nähe, wo sie von der CCA trennen. Hinweis: Es ist wichtig, den Knoten zu binden, so dass das Ende des Stranges, der den Knoten ist lang genug, um (größer als 1 mm, weniger als 3 mm), um bequem zu greifen mit einer Pinzette zum Entfernen gezogen werden, während sichergestellt wird, dass es eine ist, geeignete Menge an Nähfadenstrang auf der anderen Seite des Knotens zum Zurückziehen. </li><li> einfahren sorgfältig die ICA seitlich und mit einem Clip des Stranges, um überschüssige Haut in der Nähe der Achselhöhle Bereich auf der Seite gegenüber dem Einschnitt zu befestigen. Sicherzustellen, dass dieser zurückziehenden Strang straff genug ist, den Blutfluss zu stoppen, bevor zu dem nächsten Schritt fortgefahren wird, bisdas Risiko von unkontrollierten Blutungen minimieren. Beachten Sie, dass die Arterie ist flach und blass. HINWEIS: Nicht über-Rückzug, da es einen teilweise oder vollständigen Riss des ICA verursachen kann. Der Rückzug kann einfach eingestellt wird, bevor die Arteriotomie zu machen, indem Sie auf der Seite gegenüber dem Clip auf den Strang ziehen. </li><li> Verwenden einer Pinzette 45 ° eines anderen unbraided Nähfadenstrang Schleife zu erfassen und sie unter und um das ICA, wie in Schritt 1.5. Position seitlich dieser Strang auf den Rückzug Strang (1B). HINWEIS: Dieser Schritt kann auch vor dem Zurückziehen erfolgen. Wenn Sie sich unsicher über die Qualität des Rückzugs, kann dieser Knoten sehr lose vor dem nächsten Schritt gebunden werden. </li><li> Geschnitten, um eine 0,2 mm Arteriotomie der Mitte zwischen den gebundenen und ungebundenen Ligaturen, näher an die gebundenen Ligatur irrendes. HINWEIS: Blut im abgebundenen Arterie verbleibenden durch die Arteriotomie entleeren kann, aber nicht mehr als 5 &amp; mgr; l nicht überschreiten. Bei andauernden Blutungen, vorsichtig den Rückzug Strang zieht Rückzug zu erhöhen, mit Vorsicht einesLeere die Arterie vor übermäßiger Spannung zu beschädigen. </li><li> Verwendung eines metrischen Lineals, messen die verdeckenden Naht und schneiden die Naht mit einem zusätzlichen Freibetrag von 2-3 mm zur Entfernung des Okkluders während der Reperfusion. Halten Sie den Okkluder mit 45-Grad-Zange und gerade Zange verwenden, um eine Biegung auf die entsprechende Länge zu erstellen, die MCA zu erreichen, ein Haltepunkt für den Aufstieg Markierung. HINWEIS: Eine 10 mm Länge von dem Okklusion Silikonspitzenende der Biegung für P10 Sprague Dawley oder Long-Evans-Ratten-Jungtiere in diesem Gewichtsbereich verwendet. </li><li> Unter Verwendung einer Pinzette 45 °, speisen die silikonbeschichteten Nylon Okklusion Naht in die Arteriotomie und bewegen sich die Naht an die Biegung, die den vorher festgelegten Abstand zu der MCA (1C) markiert. Stellen Sie sicher, dass Fortschritt fühlt sich glatt; sofort stoppen Fortschritt, wenn ein Widerstand zu spüren ist. Während des Vorschiebens zielt die Naht in eine Richtung, die die CC / ECA parallel ist, in Richtung des Kopfes. HINWEIS: Wenn die Naht vorgerückt vom Rücken her, in Richtungdes Tieres Wirbelsäule, kann es in die Pterygopalatinarterie (PTA) laufen. Wenn der Widerstand nach 3-5 mm des Vorschubs zu spüren ist, hat die Naht den PTA-Übergang getroffen. Zurück, um den Okkluder aus der Arterie, bis der Silikonkopf in der Nähe der Arteriotomie ist die Vorschubrichtung vor dem Einstellen. Es ist nicht notwendig, um vollständig den Okkluder aus der Arteriotomie zu entfernen. </li><li> Sichern den Okkluder durch eine temporäre Ligatur Binden, mit dem Strang aus Schritt 1,10 (1D). </li><li> Entfernen Sie den Aufroller Clip. Schneiden Sie die Stränge sowohl der temporären Ligatur, so daß der Strang der Knoten, der gezogen wird, um den Knoten zu entfernen, ist leicht mit geraden Zange greifen und ist länger als der Strang, der gezogen wird, um den Knoten zu. HINWEIS: Die Stränge kurz genug sein müssen, damit sie in dem Hohlraum nach dem Schließen nicht Gewirr. </li><li> Entfernen Sie die Retraktoren und schließen Sie den Hohlraum mit 6-0 geflochtener Seide drei vor vier unterbrochenen Nähten zu erstellen. </li><li> Entfernen Sie den Welpen ausAnästhesie und legen Sie es auf einem Heizkissen in der Raumluft. Überwachen Sie den Welpen, bis sie genügend Bewusstsein zu halten Brustlage wiedererlangt hat und sicherzustellen, dass sie vollständig, bevor es an den Damm erholt zurück. Stellen Sie sicher, dass die Welpen einen Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C hält. </li><li> Während der Okklusion, diffusionsgewichtete Magnetresonanztomographie (DW-MRI) unter Isofluran-Narkose kann verwendet werden, um die geeignete Induktion der Verletzung zu überprüfen. Abbildung 2 zeigt laufende ischämische Schädigung nachgewiesen durch DW-MRT während tMCAO 9. HINWEIS: Diffusion-gewichteten Spin-Echo-Planar-Bildgebung 10-15 min vor der Reperfusion durchgeführt wird. Das gesamte Gehirn wird mit seriellen 2 mm dicken koronalen Schnitten unter Verwendung der folgende Impulsfolge Einstellungen abgebildet: TR / TE = 5,000 / 60 ms, 4 Mittelwert, Sichtfeld = 35 mm, Datenmatrix = 128x128, Diffusionsgradienten Dauer = 20 ms, 29,7 ms = Trennung, Amplitude = 70mt / m, und B-Faktor = 1,045 s / mm 2.Tiere einen Mangel an kortikaler Beteiligung oder atypischer ischämischer Verletzung aufweisen, wie im Hirnstamm, sind ausgeschlossen. </li></ol> 2. Reperfusion HINWEIS: Occlusion wird 3 h ausgeführt, um eine moderate bis schwere Menge von Verletzungen verursachen die Striatum und Kortex beteiligt sind. <ol><li> Bei ca. 2 h und 50 min nach Verschluss der MCA, betäubt die Welpen in 3% Isofluran in 100% O 2. Pflege eine Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C mit der Verwendung von einem Heizkissen unter der chirurgischen Stufe. </li><li> Entfernen Sie die unterbrochenen Nähte aus Schritt 1.16 und suchen Sie die Kreuzung, die durch die beiden Ligaturen und das hintere Ende des verdeckenden Naht markiert. HINWEIS: Sham-operierten Tieren induziert und für eine entsprechende Zeitperiode an die okkludierte Tieren unter Narkose bleiben. Der Schnitt wird wieder geöffnet und geschlossen vernäht. Für scheinoperierten Tiere, gehen 2,11 zu treten. </li><li> sorgfältig untiedie seitlichen Knoten zuvor in Schritt 1.14 durch Ziehen des längeren Stranges gebunden. HINWEIS: Wenn es Widerstand ist, den Knoten in ungebundenen, um sicherzustellen, zu stoppen, dass der richtigen Strang des Knotens gezogen wird. Wenn der Widerstand weiter erhöht Vergrößerung für eine bessere Sicht. Seien Sie vorsichtig, wenn Aufhebung der Bindung, wie es möglich ist, die Arterie während dieses Schrittes zu beschädigen. </li><li> Entfernen Sie den Nahtmaterialstrang aus dem Hohlraum. </li><li> aus der Arterie bei genau 3 Stunden nach MCA-Okklusion, langsam die verdeckende Naht zurück. Es wird kein Widerstand. HINWEIS: In den meisten Fällen wird es keine Blutungen. Wenn eine kleine Menge von Blutungen auftritt, Druck auf die Arterie an der Arteriotomiestelle. </li><li> Verwenden einer Pinzette Druck auf die Arteriotomie anzuwenden, da der nächste Schritt für Reperfusion ICA Blutfluß wieder herstellt. </li><li> Sorgfältig löst die mediale knot 2.3 das gleiche Verfahren wie in Schritt verwendet wird. </li><li> Entfernen Sie den Nähfadenstrang aus dem Körper und gelten Blutungen ein Hämostatikum auf die Arteriotomie zu stoppen. </li&gt; <li> Stellen Sie sicher, dass die Blutung zum Stillstand gekommen ist. HINWEIS: Die Rückkehr der ursprünglichen Form und roter Farbe der Arterie bestätigt, dass ICA Blutfluss wieder hergestellt ist. </li><li> Entfernen Sie die Retraktoren und schließen Sie den Hohlraum mit drei vor vier Nähten von 6-0 geflochtenen Seide. </li><li> Entfernen Sie die Welpen aus der Narkose und legen Sie es auf einem Heizkissen in der Raumluft. Überwachen Sie es, bis es war ausreichend wieder zu Bewusstsein zu Brustlage zu halten und vollständige Genesung sicherzustellen, bevor sie an den Damm zurück. Stellen Sie sicher, dass die Welpen einen Körperoberflächentemperatur zwischen 35,5 ° C und 37 ° C hält. </li><li> Überprüfen Sie die Welpen täglich für 5 Tage. die Inzisionsstellen eng für eine angemessene Heilung Recprd ihre Gewichte und inspizieren. Entfernen Sie die Nähte nach 7-14 Tagen. Post-tMCAO Verletzung kann mit MRI abgebildet werden, wenn 9 gewünscht. HINWEIS: Die Tiere können bis zu 1 g Gewicht am ersten Tag verlieren, sondern wird in der Regel das Gewicht ohne Eingriff wieder sein und sich in einer ähnlichen wiegent Bereich zu Kontrollen von Tagen 4-5. In seltenen Fällen kann ein Welpe übermäßiges Gewicht verlieren oder Schwierigkeiten Fütterung hat, orale Gabe erfordert 2-3 Tage für Feeds. </li><li> Bei P21 können Verletzungen zuverlässig mit sensomotorische Verhaltenstests, wie RotaRod oder Zylinderhaltung beurteilt werden. Kognitive Tests können bereits 4-6 Wochen alt durchgeführt werden Einschätzungen wie neuartige Objekterkennung oder das Morris - Wasserlabyrinth 13. </li><li> Euthanize die Ratten durch intraperitoneale Injektion von Euthasol (50 mg / kg) für Hirn Ernte 11, 12. </li><li> Histologische Analyse Verletzungs Volumen oder Reaktion auf Interventionen beurteilen können mit Kresylviolett oder H &amp; E - Färbung (Abbildung 3) 10 durchgeführt werden. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Kritische Schritte innerhalb des Protokolls Erstens ist es wichtig , Normothermie von der Einleitung der Narkose bis zum vollständigen Genesung zu halten, da es Auswirkungen sowohl Hypothermie 17 und Hyperthermie 18 auf dem Fortschreiten der Hirnschädigung in beiden unreifen und reifen Tieren bekannt sind. Zweitens, während das Tier zu sichern und Zurückziehen des Einschnitt, optimale Positionierung Atmung zu überwachen und sicherzustellen, dass die Luftröhre frei von Kompression ist unerlässlich. Drittens vermeiden Quetschen oder die Vagusnerv-Stretching, wie diese Veränderungen der Herzfrequenz mit Vagusstimulierung verursachen kann. Viertens, weil das Zurückziehen des ICA notwendig ist, Blutungen während der Arteriotomie zu steuern, muss die Aufmerksamkeit auf den Grad der Spannung während des Rückzugs bezahlt werden, um die Arterie zu beschädigen. Wenn die Arterie von Rückzug reißt, oder wenn es eine schlechte Arteriotomie Einschnitt ist, sollte das Tier von der Analyse des Risiko aufgrund ausgeschlossen werdenvon Blutungen und schlechter Reperfusion. Technische Änderungen und Fehlersuche Mit MRT als Leitfaden kann die Fadenlänge optimiert werden, um sicherzustellen, dass die Silikonspitze richtig die MCA verschliesst die fokale Ischämie zu erstellen. Wenn MRT nicht verfügbar ist, können Welpen vor der Reperfusion eingeschläfert werden für die Präparation der Platzierung der Naht sichtbar zu machen. Stellen Sie die Fadenlänge nach Bedarf. Das Pup Gewicht korreliert stark mit den verschließenden Fadenlänge Anforderungen. Die Okklusionszeit kann modifiziert werden, um den Grad der Verletzungsschwere anzupassen. Darüber hinaus Nahtform und Länge sind kritisch. Für P10 Sprague-Dawley-Ratten und Long Evans mit einem Gewicht von 19-21 g, beträgt 10 mm die optimale Länge des Einsetzens in unserer Erfahrung. Ein weiteres Einsetzen des verdeckenden Naht kann in der Perforation des MCA führen. Darüber hinaus führt die Konsistenz in der Form des verdeckenden Fadens in jeder Operation in einer erhöhten Konsistenz Verletzungs pattern 19, 20. Aus diesem Grund empfehlen wir professionell hergestellten Nähte für diesen Zweck verwendet wird. Es ist auch wichtig zu beachten, dass die Verletzungsmuster zwischen Praktikern aufgrund scheinbar winziger Unterschiede in Technik unterscheiden. Einschränkungen der Technik Die Durchführung dieser Technik in einem kleinen, Nagetier Entwicklung erfordert viel Erfahrung. Wenn es richtig durchgeführt wird, ist der Chirurg in der Lage, ein sehr konsistentes Verletzungsmuster über Tiere verschiedener Größen verursachen und eine Überlebensrate von mehr als 95% zu erreichen. Darüber hinaus sind geeignete chirurgische Instrumente unerlässlich. Chirurgische Instrumente müssen gut gepflegt werden, um sicherzustellen, dass alle Instrumentenspitzen richtig nähern. Bedeutung dieser Technik in Bezug auf bestehende oder alternative Methoden Während Hypoxie-Ischämie oder die Reis-Vannucci Modell 2 </sup&gt;, wird am häufigsten hypoxischischämischer Verletzung im sich entwickelnden Gehirn zu studieren verwendet wird, ist es wichtig, dass dieses Modell von tMCAO unterscheidet sich dadurch, dass von HALLO zu beachten Ischämie transienter fokaler ohne globale Hypoxie ist, durch eine Reperfusion Phase folgt, wenn die Hindernis entfernt wird und der Blutfluss wieder hergestellt wird. Dies bewirkt, dass eine konsistente und reproduzierbare Verletzungen und ist klinisch translationale durch eine Verletzung Muster ähnlich dem in Vollzeit Neugeborenen Schlaganfall gesehen verursacht. Dies ermöglicht die Untersuchung von fokalen Verletzungsmustern und Ausgleichsreaktionen in unversehrten Geweben. Zukünftige Anwendungen nach dieser Technik zu meistern Dieses Modell ist ähnlich wie die häufigste Ursache von Schlaganfällen bei menschlichen Neugeborenen, eine transiente okklusiven Thrombus , die 11, 21 während der perinatalen Periode auftritt. Die Ätiologie ist nicht ganz klar und ist wahrscheinlich multifaktoriell, aber es ist in den meisten Fällen t vermuteto von Embolien ergeben sich aus der Plazenta vorbei 11. Darüber hinaus Anomalien viele Neugeborene mit vermutetem perinatalem Schlaganfall häufig vorhanden mit späterer Anfallsaktivität oder subtiler fokaler neurologischer Untersuchung 22. Dies macht die Verwendung eines einheitlichen, translationale Verletzungsmodell entscheidende Mechanismen der Schädigung Progression und mögliche therapeutische Strategien zu identifizieren.

Schlaganfall während der Neugeborenenperiode ist eine wesentliche Ursache für Tod und Behinderung, in so viele wie 1 in 2300 Lebendgeburten 1 auftreten. Dies führt zu veränderten Zentralnervensystementwicklung und erhöhte Morbidität langfristige, einschließlich einer erhöhten Inzidenz von Epilepsie, Zerebralparese, geistige Retardierung, und andere Arten von Motor oder kognitiver Dysfunktion. Die lebenslangen Auswirkungen des frühen Schlaganfalls machen translationale Tiermodelle wesentlich für die Mechanismen der Schädigung und Reparatur in dieser Population untersuchen, einschließlich den Strategien für das verletzte Gehirn zu schützen oder Reparatur zu verbessern. Verschiedene Ischämie Modelle wurden zu studieren Hirnverletzungen bei erwachsenen Tieren verwendet, und während die Reis-Vannucci (Modified Levine) 2 - Verfahren üblicherweise verwendet wird , hypoxischischämischer Verletzungen in das sich entwickelnde Gehirn, fokale Ischämie-Reperfusion ist eine deutliche Mechanismus der Schädigung zu studieren Brenn Verletzungen verursachen, mit einem verletzten Kern und penumbra und unversehrtes entfernt liegendes Gewebe. Die Koizumi 3 und 4 Longa Modelle wurden in erwachsenen Ratten entwickelt , um transiente Okklusion der Arteria cerebri media über die Arteria carotis communis (CCA) und Arteria carotis externa (ECA) zu erreichen, respectively. In beiden Modellen permanent Ligatur und Kauterisation der Arterie Zweige sind wichtige Blutungen zu minimieren und das chirurgische Verfahren zu straffen, die auch negative Auswirkungen auf das Tier die Fähigkeit, nach einer Verletzung zu füttern und zu Gewichtszunahme führt. Darüber hinaus gibt es verschiedene Verletzungsmechanismen im unreifen Gehirn und spezifische Muster von Verletzungen als Folge gesehen. Mehr photothrombotic Schlaganfall (Rose-Bengal - Methode) 5 und permanente MCA Ligation 6 wurden zu studieren Neugeborenen und Erwachsenen Schlaganfall vor kurzem verwendet. Sowohl photothrombotic Schlaganfall und MCA Ligation schaffen dauerhafte Veränderungen der Hirndurchblutung, die in einem Mangel an reperfus führenIon. Reperfusion ist eine kritische Komponente der Entwicklung und Progression von fokaler Verletzung, mit erhöhter Exzitotoxizität, die Bildung freier Radikale, und die Produktion von Stickoxide zu verzögerten Zelltod führt , die Kaskaden beinhaltet Signalisierung , die 7 von der ischämischen Phase verschieden sind. Hypoxie-Ischämie beinhaltet permanente Ligatur einseitige Karotis durch globalen Hypoxie gefolgt, die auch beim Menschen von der Ursache für hypoxische-ischämische Verletzung unterscheidet und keine konsistenten fokale Verletzungsmuster verursachen, so dass Untersuchung des verletzten Kerns und Penumbra schwieriger. Wir haben zuvor eine nicht-hämorrhagische Ischämie-Reperfusion Hubmodell in unreifen Ratten unter Verwendung von transienter Okklusion der Arteria cerebri media (MCAO) 8, 9, 10 beschrieben. Dies ist eine weniger invasive Methode, die Zugriffe und verschliesst die MCA durch die Arteria carotis interna ohne permanenten ligatiauf oder Kauterisation. Dies stellt ein Modell der Verletzung ähnlich die häufigste Ursache für einen Schlaganfall in der perinatalen Periode 11, 12. Dieses Ischämie-Reperfusion-Modell der Schädigung führt zu Schäden an den ipsilateralen Striatum und parieto-temporale Kortex. Dieses Modell der tMCAO ermöglicht auch die Kontrolle über die Schwere der Verletzung durch die Dauer der Okklusion variiert. Die Untersuchung von Signalwegen und histologischen Veränderungen in den verletzten Kern und Penumbra und in der unversehrten ipsilateralen und kontralateralen Gewebe können die Mechanismen der Schädigung und Reparatur im unreifen Gehirn aufzuklären. Diese Studie wird diese wichtige Verletzungsmodell für das sich entwickelnde Gehirn nachweisen.

<table><tbody><tr><td>Isoflourane</td><td>Henry Schein</td><td>50033</td><td>anesthetic, at 3%&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Trinocular Surgioscope</td><td>World Precision Instruments</td><td>PSMT5N</td><td></td></tr><tr><td>Heating pad</td><td>Sunbeam</td><td>000731-500-000</td><td>low to medium setting</td></tr><tr><td>IR Thermometer</td><td>Extech Instruments</td><td>72-5270</td><td></td></tr><tr><td>Retraction kit for small animals&amp;nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>18200-20</td><td></td></tr><tr><td>CermaCut Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14958-09</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>112522-00</td><td>2x</td></tr><tr><td>Dumont #5/45 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td><td>2x</td></tr><tr><td>B-2 Micro Clamp</td><td>Fine Science Tools</td><td>00398-02</td><td></td></tr><tr><td>Forcepts for Clamp Application</td><td>Fine Science Tools</td><td>00072-14</td><td></td></tr><tr><td>Micro Vannas Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td><td>2mm cutting edge</td></tr><tr><td>Occlusion Sutures</td><td>Doccol</td><td>602123PK10</td><td>701712PK5Re</td></tr><tr><td>Ruler</td><td>Fine Science Tools</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hemostatic Agent&amp;nbsp;</td><td>Avitene</td><td>DVL1010590</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Perma-Hand Silk Reverse CuttingSuture</td><td>Ethicon</td><td>769G</td><td></td></tr><tr><td>Euthasol</td><td>Virbac</td><td>710101</td><td>0.22 mL/kg</td></tr><tr><td>Cotton Tipped Applicators</td><td>Henry Schein</td><td>100-9249</td><td></td></tr><tr><td>Laboratory Tape</td><td>VWR</td><td>89097-990</td><td></td></tr></tbody></table>

transient middle cerebral artery occlusion model of neonatal stroke in p10 rats

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature and mature brain. Stroke occurs commonly in the perinatal period in humans, and transient ischemia-reperfusion is the most common form of stroke in neonates. The reperfusion phase is a critical component of injury progression, which occurs over a period of days to weeks, and of the endogenous response to injury. This postnatal day 10 (p10) rat model of transient middle cerebral artery occlusion (tMCAO) creates a unilateral, non-hemorrhagic focal ischemia-reperfusion injury that can be utilized to study the mechanisms of focal injury and repair in the full-term-equivalent brain. The injury pattern that is produced by tMCAO is consistent and highly reproducible and can be confirmed with MRI or histological analyses. The severity of injury can be manipulated through changes in occlusion time and other methods that will be discussed.

Die Schwere der durch tMCAO verursachten Schädigung ist stark abhängig sowohl von der Okklusion Zeit und der Erfahrung des Chirurgen. Eine 90-min Okklusion erzeugt oft ein leichtes Verletzungsmuster zu moderieren, während 3 h eine moderaten bis schweren Verletzungen erzeugt. Schwere der Verletzung kann durch eine Vielzahl von Methoden, einschließlich MRT, Histologie, oder kurz- oder langfristigen Verhaltensanalysen bewertet werden. Abbildung 2 zeigt eine Beispiel für die DW-MRI durchgeführt 75 min in eine 90-min Okklusion, ischämischer Verletzung der Bestätigung der ipsilateralen Hemisphäre beteiligt sind . Diffusionsgewichtete Bildgebung Diffusion in dem ipsilateralen Striatum und die Mehrheit der ipsilateralen Kortex, ohne kontralateralen Veränderungen erhöht demonstriert, während der akuten ischämischen Phase. Dies korreliert mit einem moderaten Niveau der langfristigen Schädigung sowohl die Rinde und die tiefe graue Substanz beteiligt ist. Occlusion der MCA Ergebnisse inZelltod, die für weniger schwere Verletzungen im Striatum beginnt und entwickelt kortikalen und hippokampalen Verletzung für längere Verschlusszeiten und schwere Verletzungen Verschlechterung. Bei der Optimierung der OP - Technik, wie die Naht Einbaulänge zu bestimmen, wird MRI sehr zu empfehlen, da es für die Bestätigung der richtigen Nahtplatzierung und Visualisierung von Ödemen und Verletzungen Progression während der Okklusion 14 erlaubt, 15, 16. Wenn MRT nicht verfügbar ist, H &amp; E oder Kresylviolett Färbung sind einfach und zuverlässig histologische Methoden Verletzungen Morphologie zu bestimmen und kann sowohl in frühen und späten Zeitpunkt verwendet werden, nachdem der tMCAO. Abbildung 3 zeigt ein moderaten bis schweren Verletzungen Muster auf histopathologische Untersuchung nach einer 3 h Okklusion, Zystenbildung demonstriert und Volumen im ipsilateralen Striatum und Kortex. <p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1"&gt; Unvoreingenommene stereo Quantifizierung von cresyl-violett-gefärbten Schnitten das Verhältnis von ipsilateral zur kontralateralen hemisphärische Volumen zu berechnen bestätigt ipsilaterale ischämische Reperfusionsschäden. Insbesondere wird, nachdem das Tier mit Euthasol Anästhesierung wurde das Gehirn durch transkardiale Perfusion in 0,1 M PBS mit 4% Paraformaldehyd geerntet. Folgende über Nacht Nachfixierung und Äquilibrierung in 30% Saccharose wurde das gesamte Gehirn auf 50 &amp; mgr; m Intervallen geschnitten und jeder zwölfte Abschnitt ausgewählt wurde, montiert ist , und mit Cresylviolett gefärbt 10. Selbst bei leichten Verletzungen, Bewegungsänderungen, wie Kreise und Hemiparese, wird während der Okklusion Zeit zur Kenntnis genommen. Mit schweren Verletzungen, werden diese Änderungen nach der Reperfusion bestehen bleiben. Zusätzliche Verhaltenstests können die Schwere der Verletzung zu beurteilen verwendet werden, einschließlich RotaRod oder Zylinderaufzuchttests für Sensomotorik und das Morris-Wasserlabyrinth fürkognitive Funktion 13. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig1.jpg" /> Abbildung 1: Live - OP - Bilder des tMCAO Verfahrens. (A) Der erste Nähfadenstrang ist um die ICA geschlungen, wie in Schritt 1.6 beschrieben. (B) Die erste temporäre Ligatur abgebunden und die ICA zurückgezogen wird. Der zweite Nähfadenstrang ist um den ICA geschleift, lateral den ersten Nahtfaden, wie in Schritt 1.9 beschrieben. (C) Das mit Silikon beschichtete Naht Okklusion wird in die Arteriotomie Stelle zugeführt, wie in Schritt 1.12 beschrieben. (D) Die zweite temporäre Ligatur wird bindet die Okkluder in Position zu sichern, wie in Schritt 1.14 beschrieben. Maßstabsbalken = 1 mm. <img alt="Figur 2" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig2.jpg" /> Abbildung 2: MRT Während OCCLusion Demonstriert die entsprechende Einseitige Verletzung. Von vorne nach hinten, koronalen Bildscheiben des DW-MRI, während einer 90 min Okklusion durchgeführt wird, zeigen erhöhte Diffusion den ipsilateralen Hemisphäre (Pfeile) beteiligt, die mit dem laufenden ischämische Verletzung in der akuten Phase konsistent ist. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von Stroke 11. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig2large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a> <img alt="Abbildung 3" src="/files/ftp_upload/54830/54830fig3.jpg" /> Abbildung 3: Einseitige Verletzung des Striatum und Cortex bei 4 Wochen nach tMCAO Einbeziehung. Posterior nach anterior, Cresyl-Violett-gefärbten koronalen Hirnschnitten (jeweils 50 &amp; mgr; m) von P38 Tieren geerntet ziemlich schwere Verletzungen zeigen (die Pfeile zeigen ipsilateral Zystenbildung und reduzierte kortikalen undstriatalen Volumen) nach einer 3 h tMCAO bei P10. Das runde Loch auf der linken Seite repräsentiert eine kontralateralen Hemisphäre Kennung. Maßstabsbalken = 5 mm. Nachdruck mit freundlicher Genehmigung von Neurobiologie der Krankheit 12. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier</a> , um <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54830/54830fig3large.jpg" target="_blank">eine größere Version dieser Figur zu sehen.</a>

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Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

Neonatal stroke is a significant cause of early brain injury requiring a translational model with consistent focal injury patterns and high reproducibility in order to enable study. This study describes the detailed surgical procedure for creating a non-hemorrhagic, unilateral focal ischemia-reperfusion injury in full-term-equivalent rodents.

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten

A number of animal models have been used to study hypoxic-ischemic injury, traumatic injury, global hypoxia, or permanent ischemia in both the immature ...

transient-middle-cerebral-artery-occlusion-model-neonatal-stroke-p10

Research

JoVE Journal

Medicine

10.5K Aufrufe.  University of California, San Francisco. Neonatal stroke is a significant cause of early brain injury requiring a translational model with consistent focal injury patterns and high reproducibility in order to enable study. This study describes the detailed surgical procedure for creating a non-hemorrhagic, unilateral focal ischemia-reperfusion injury in full-term-equivalent rodents.

Serie: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Neonatal Stroke in P10 Rats

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Forschung

Neurowissenschaften

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

Mouse Model of Middle Zerebralarterie

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Medizin

Modeling Stroke in Mice: Permanent Coagulation of the Distal Middle Cerebral Artery

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical options are available for a small proportion of stroke patients in the acute phase. Current research is intensively searching for novel therapeutic strategies and is increasingly focusing on the sub-acute and chronic phase after stroke because more patients might be eligible for therapeutic interventions in a prolonged time window. These delayed mechanisms include important pathophysiological pathways such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity and regeneration. In order to analyze these mechanisms and to subsequently evaluate novel drug targets, experimental stroke models with clinical relevance, low mortality and high reproducibility are sought after. Moreover, mice are the smallest mammals in which a focal stroke lesion can be induced and for which a broad spectrum of transgenic models are available. Therefore, we describe here the mouse model of transcranial, permanent coagulation of the middle cerebral artery via electrocoagulation distal of the lenticulostriatal arteries, the so-called &#8220;coagulation model&#8221;. The resulting infarct in this model is located mainly in the cortex; the relative infarct volume in relation to brain size corresponds to the majority of human strokes. Moreover, the model fulfills the above-mentioned criteria of reproducibility and low mortality. In this video we demonstrate the surgical methods of stroke induction in the &#8220;coagulation model&#8221; and report histological and functional analysis tools.

Various murine models of middle cerebral artery occlusion (MCAO) are widely used in experimental brain research. Here, we demonstrate the model of transcranial permanent distal MCAO which produces consistent cortical infarction of a size corresponding to damage imposed by the majority of human ischemic strokes.

Modellierung Schlaganfall bei Mäusen: Permanent Koagulation der distalen A. cerebri media

Stroke is the third most common cause of death and a main cause of acquired adult disability in developed countries. Only very limited therapeutical ...

A Thrombotic Stroke Model Based On Transient Cerebral Hypoxia-ischemia

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA thrombolysis) rarely produces benefits in mechanical occlusion-based experimental models, which dominate preclinical stroke research. This split between the bench and bedside suggests the need to employ tPA-responsive models in preclinical stroke research. To this end, a simple and tPA-reactive thrombotic stroke model is invented and described here. This model consists of transient occlusion of the unilateral common carotid artery and delivery of 7.5% oxygen through a face mask in adult mice for 30 min, while maintaining the animal rectal temperature at 37.5 &#177; 0.5 &#176;C. Although reversible ligation of the unilateral carotid artery or hypoxia each suppressed cerebral blood flow only transiently, the combination of both insults caused lasting reperfusion deficits, fibrin and platelet deposition, and large infarct in the middle cerebral artery-supplied territory. Importantly, tail-vein injection of recombinant tPA at 0.5, 1, or 4 hr post-tHI (10 mg/kg) provided time-dependent reduction of the mortality rate and infarct size. This new stroke model is simple and can be standardized across laboratories to compare experimental results. Further, it induces thrombosis without craniectomy or introducing pre-formed emboli. Given these unique merits, the tHI model is a useful addition to the repertoire of preclinical stroke research.

Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients.

A thrombotischer Schlaganfall Modell basierend auf Transient zerebrale Hypoxie-Ischämie

Stroke research has endured many setbacks in translating neuroprotective therapies into clinical practice. In contrast, the real-world therapy (tPA ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided here is a protocol for successfully establishing a rat model of acute pontine infarction. Rats weighing about 250 g are used, and a probe with an insulated sheath is injected into the pons using a stereotaxic apparatus. A lesion is produced by the electrical stimulation with a single pulse. The Longa score, Berderson score, and beam balance test are used to assess neurological deficits. Additionally, the adhesive-removal somatosensory test is used to determine sensorimotor function, and the limb placement test is used to evaluate proprioception. MRI scans are then used to assess the infarction in vivo, and TTC staining is used to confirm the infarction in vitro. Here, a successful infarction is identified that is located in the anterolateral basis of the rostral pons. In conclusion, a new method is described to establish an acute pontine infarction rat model.

Presented here is a protocol for establishing acute pontine infarction in a rat model via electrical stimulation with a single pulse.

Einrichtung eines akuten Pontininfarkts bei Ratten durch elektrische Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

Modellierung des Schlaganfalls bei Mäusen: Vorübergehender Verschluss der mittleren Hirnarterien über die Arteria carotis externa

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

Etablierung eines Modells für Mäuse mit Verschluss der mittleren Hirnarterie

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

Autor im Rampenlicht: Innovative Techniken und zukünftige Richtungen in der Schlaganfallforschung 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Ein Modell der transitorischen zerebralen Ischämie durch Verschluss der Arteria cerebralis media

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

Autor im Rampenlicht: Bewertung von ischämischen Schlaganfallschäden durch ein Modell zur Okklusion der mittleren Hirnarterie 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Modell von Neugeborenen Stroke in P10 Ratten

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Mouse Model of Middle Zerebralarterie

Modellierung Schlaganfall bei Mäusen: Permanent Koagulation der distalen A. cerebri media

A thrombotischer Schlaganfall Modell basierend auf Transient zerebrale Hypoxie-Ischämie

Einrichtung eines akuten Pontininfarkts bei Ratten durch elektrische Stimulation

Modellierung des Schlaganfalls bei Mäusen: Vorübergehender Verschluss der mittleren Hirnarterien über die Arteria carotis externa

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

Ein modifiziertes transkranielles Modell für den Verschluss der mittleren Hirnarterie zur Untersuchung von Schlaganfallergebnissen bei gealterten Mäusen

Transienter mittlerer Hirnarterienverschluss Modell des Schlaganfalls