Isolierung und Kultur primärer humaner Zahnfleischepithelzellen mit Y-27632

Das allgemeine Ziel dieses zellbasierten Protokolls ist es, menschliche Zahnfleischepithelzellen zu isolieren und zu treffen, um die Mängel der direkten Auberginenmethode zu verbessern. Mit der neuen modifizierten endothemischen Methode können wir in relativ kurzer Zeit eine größere Anzahl von primären Zahnfleischepithelzellen erhalten, basierend auf unseren Materialien und Geräten. So war menschliches Gewebe, das in diesem Protokoll verwendet wurde, frisches erwachsenes Zahnfleischgewebe, das aus Extraktionen von betroffenen Zähnen in der Abteilung für Kiefer- und Gesichtschirurgie gemäß den Richtlinien der Ethikkommission für Humanforschung der Institution verworfen wurde.Die neue modifizierte enzymatische Methode.Gingivalgewebe-Vorbehandlung.Waschen Sie das Gewebe 30 Sekunden lang mit 75% Ethanol. Und dann mit Waschlösung zweimal für jeweils fünf Minuten. Verdauung von Zahnfleischgewebe.Schneiden Sie das Gewebe mit zwei chirurgischen Klingen in winzige Stücke. Fügen Sie 2,5 mg / Mililiterdispase und Kollagenase-1-Lösung in ein 1,5-Mililiter-Zentrifugenröhrchen hinzu. Legen Sie die Gewebestücke in das 1,5-Mililiter-Zentrifugenröhrchen. Inkubieren Sie für 15-20 Minuten in einem 37