Diese Arbeit wurde durch Grant 5-U24-DK059637-10 der Vanderbilt Maus Metabolic Phänotypisierung Center unterstützt.

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	<li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., McGuinness, O. P., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+in+the+design+of+hyperinsulinemic-euglycemic+clamps+in+the+conscious+mouse.">Considerations in the design of hyperinsulinemic-euglycemic clamps in the conscious mouse.</a> Diabetes. 55, 390-397 (2006).</li><li>Berglund, E. D., Li, C. Y., Poffenberger, G., Ayala, J. E., Fueger, P. T., Willis, S. E., Jewell, M. M., Powers, A. C., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+metabolism+in+vivo+in+four+commonly+used+inbred+mouse+strains.">Glucose metabolism in vivo in four commonly used inbred mouse strains.</a> Diabetes. 57, 1790-1799 (2008).</li><li>Niswender, K. D., Shiota, M., Postic, C., Cherrington, A. D., Magnuson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+glucokinase+gene+copy+number+on+glucose+homeostasis+and+hepatic+glucose+metabolism.">Effects of increased glucokinase gene copy number on glucose homeostasis and hepatic glucose metabolism.</a> J. Biol. Chem. 272, 22570-22575 (1997).</li><li>Kim, H. J., Higashimori, T., Park, S. Y., Choi, H., Dong, J., Kim, Y. J., Noh, H. L., Cho, Y. R., Cline, G., Kim, Y. B., Kim, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+interleukin-6+and+-10+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+action+in+vivo.">Differential effects of interleukin-6 and -10 on skeletal muscle and liver insulin action in vivo.</a> Diabetes. 53, 1060-1067 (2004).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Chen, Y., Yu, C., Moore, I. K., Pypaert, M., Lutz, E. P., Kako, Y., Velez-Carrasco, W., Goldberg, I. J., Breslow, J. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-specific+overexpression+of+lipoprotein+lipase+causes+tissue-specific+insulin+resistance.">Tissue-specific overexpression of lipoprotein lipase causes tissue-specific insulin resistance.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 98, 7522-7527 (2001).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Gavrilova, O., Chao, L., Higashimori, T., Choi, H., Kim, H. J., Yu, C., Chen, Y., Qu, X., Haluzik, M., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+rosiglitazone+on+skeletal+muscle+and+liver+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Differential effects of rosiglitazone on skeletal muscle and liver insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> Diabetes. 52, 1311-1318 (2003).</li><li>Kim, J. K., Fillmore, J. J., Sunshine, M. J., Albrecht, B., Higashimori, T., Kim, D. W., Liu, Z. X., Soos, T. J., Cline, G. W., O'Brien, W. R., Littman, D. R., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC-theta+knockout+mice+are+protected+from+fat-induced+insulin+resistance.">PKC-theta knockout mice are protected from fat-induced insulin resistance.</a> J. Clin. Invest. 114, 823-827 (2004).</li><li>Kim, J. K., Gavrilova, O., Chen, Y., Reitman, M. L., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+insulin+resistance+in+A-ZIP/F-1+fatless+mice.">Mechanism of insulin resistance in A-ZIP/F-1 fatless mice.</a> J. Biol. Chem. 275, 8456-8460 (2000).</li><li>Kim, J. K., Gimeno, R. E., Higashimori, T., Kim, H. J., Choi, H., Punreddy, S., Mozell, R. L., Tan, G., Stricker-Krongrad, A., Hirsch, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+fatty+acid+transport+protein+1+prevents+fat-induced+insulin+resistance+in+skeletal+muscle.">Inactivation of fatty acid transport protein 1 prevents fat-induced insulin resistance in skeletal muscle.</a> J. Clin. Invest. 113, 756-763 (2004).</li><li>Kim, J. K., Kim, H. J., Park, S. Y., Cederberg, A., Westergren, R., Nilsson, D., Higashimori, T., Cho, Y. R., Liu, Z. X., Dong, J., Cline, G. W., Enerback, S., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte-specific+overexpression+of+FOXC2+prevents+diet-induced+increases+in+intramuscular+fatty+acyl+CoA+and+insulin+resistance.">Adipocyte-specific overexpression of FOXC2 prevents diet-induced increases in intramuscular fatty acyl CoA and insulin resistance.</a> Diabetes. 54, 1657-1663 (2005).</li><li>Kim, J. K., Kim, Y. J., Fillmore, J. J., Chen, Y., Moore, I., Lee, J., Yuan, M., Li, Z. W., Karin, M., Perret, P., Shoelson, S. E., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+fat-induced+insulin+resistance+by+salicylate.">Prevention of fat-induced insulin resistance by salicylate.</a> J. Clin. Invest. 108, 437-446 (2001).</li><li>Kim, J. K., Michael, P. r. e. v. i. s., Peroni, S. F., Mauvais-Jarvis, O. D., Neschen, F., Kahn, S., Kahn, B. B., R, C., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redistribution+of+substrates+to+adipose+tissue+promotes+obesity+in+mice+with+selective+insulin+resistance+in+muscle.">Redistribution of substrates to adipose tissue promotes obesity in mice with selective insulin resistance in muscle.</a> J. Clin. Invest. 105, 1791-1797 (2000).</li><li>Kim, J. K., Zisman, A., Fillmore, J. J., Peroni, O. D., Kotani, K., Perret, P., Zong, H., Dong, J., Kahn, C. R., Kahn, B. B., Shulman, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+toxicity+and+the+development+of+diabetes+in+mice+with+muscle-specific+inactivation+of+GLUT4.">Glucose toxicity and the development of diabetes in mice with muscle-specific inactivation of GLUT4.</a> J. Clin. Invest. 108, 153-160 (2001).</li><li>Haluzik, M., Gavrilova, O., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+deficiency+does+not+alter+insulin+sensitivity+in+mice+maintained+on+regular+or+high-fat+diet:+hyperinsulinemic-euglycemic+clamp+studies.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha deficiency does not alter insulin sensitivity in mice maintained on regular or high-fat diet: hyperinsulinemic-euglycemic clamp studies.</a> Endocrinology. 145, 1662-1667 (2004).</li><li>Haluzik, M., Yakar, S., Gavrilova, O., Setser, J., Boisclair, Y., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+resistance+in+the+liver-specific+IGF-1+gene-deleted+mouse+is+abrogated+by+deletion+of+the+acid-labile+subunit+of+the+IGF-binding+protein-3+complex:+relative+roles+of+growth+hormone+and+IGF-1+in+insulin+resistance.">Insulin resistance in the liver-specific IGF-1 gene-deleted mouse is abrogated by deletion of the acid-labile subunit of the IGF-binding protein-3 complex: relative roles of growth hormone and IGF-1 in insulin resistance.</a> Diabetes. 52, 2483-2489 (2003).</li><li>Haluzik, M. M., Lacinova, Z., Dolinkova, M., Haluzikova, D., Housa, D., Horinek, A., Vernerova, Z., Kumstyrova, T., Haluzik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+insulin+sensitivity+after+peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+is+accompanied+by+paradoxical+increase+of+circulating+resistin+levels.">Improvement of insulin sensitivity after peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment is accompanied by paradoxical increase of circulating resistin levels.</a> Endocrinology. 147, 4517-4524 (2006).</li><li>Kim, H., Haluzik, M., Asghar, Z., Yau, D., Joseph, J. W., Fernandez, A. M., Reitman, M. L., Yakar, S., Stannard, B., Heron-Milhavet, L., Wheeler, M. B., LeRoith, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor-alpha+agonist+treatment+in+a+transgenic+model+of+type+2+diabetes+reverses+the+lipotoxic+state+and+improves+glucose+homeostasis.">Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha agonist treatment in a transgenic model of type 2 diabetes reverses the lipotoxic state and improves glucose homeostasis.</a> Diabetes. 52, 1770-1778 (2003).</li><li>Deibert, D. C., DeFronzo, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epinephrine-induced+insulin+resistance+in+man.">Epinephrine-induced insulin resistance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 717-721 (1980).</li><li>Rizza, R. A., Cryer, P. E., Haymond, M. W., Gerich, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenergic+mechanisms+for+the+effects+of+epinephrine+on+glucose+production+and+clearance+in+man.">Adrenergic mechanisms for the effects of epinephrine on glucose production and clearance in man.</a> J. Clin. Invest. 65, 682-689 (1980).</li><li>Nunemaker, C. S., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Sweet, I. R., Teague, J. C., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+secretion+in+the+conscious+mouse+is+biphasic+and+pulsatile.">Insulin secretion in the conscious mouse is biphasic and pulsatile.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 523-529 (2006).</li><li>Nunemaker, C. S., Zhang, M., Wasserman, D. H., McGuinness, O. P., Powers, A. C., Bertram, R., Sherman, A., Satin, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Individual+mice+can+be+distinguished+by+the+period+of+their+islet+calcium+oscillations:+is+there+an+intrinsic+islet+period+that+is+imprinted+in+vivo.">Individual mice can be distinguished by the period of their islet calcium oscillations: is there an intrinsic islet period that is imprinted in vivo.</a> Diabetes. 54, 3517-3522 (2005).</li><li>Halter, J. B., Beard, J. C., Jr, P. o. r. t. e., D, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+function+and+stress+hyperglycemia:+plasma+glucose+and+epinephrine+interaction.">Islet function and stress hyperglycemia: plasma glucose and epinephrine interaction.</a> Am. J. Physiol. 247, 47-52 (1984).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Counterregulatory+deficits+occur+within+24+h+of+a+single+hypoglycemic+episode+in+conscious,+unrestrained,+chronically+cannulated+mice.">Counterregulatory deficits occur within 24 h of a single hypoglycemic episode in conscious, unrestrained, chronically cannulated mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 290, 678-684 (2006).</li><li>Jacobson, L., Ansari, T., Potts, J., McGuinness, O. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucocorticoid-deficient+corticotropin-releasing+hormone+knockout+mice+maintain+glucose+requirements+but+not+autonomic+responses+during+repeated+hypoglycemia.">Glucocorticoid-deficient corticotropin-releasing hormone knockout mice maintain glucose requirements but not autonomic responses during repeated hypoglycemia.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 291, 15-22 (2006).</li><li>Ayala, J. E., Bracy, D. P., James, F. D., Julien, B. M., Wasserman, D. H., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glucagon-like+peptide-1+receptor+regulates+endogenous+glucose+production+and+muscle+glucose+uptake+independent+of+its+incretin+action.">The glucagon-like peptide-1 receptor regulates endogenous glucose production and muscle glucose uptake independent of its incretin action.</a> Endocrinology. 150, 1155-1164 (2009).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Granner, D. K., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+overexpression+improves+exercise-stimulated+but+not+insulin-stimulated+muscle+glucose+uptake+in+high-fat-fed+C57BL/6J+mice.">Hexokinase II overexpression improves exercise-stimulated but not insulin-stimulated muscle glucose uptake in high-fat-fed C57BL/6J mice.</a> Diabetes. 53, 306-314 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distributed+control+of+glucose+uptake+by+working+muscles+of+conscious+mice:+roles+of+transport+and+phosphorylation.">Distributed control of glucose uptake by working muscles of conscious mice: roles of transport and phosphorylation.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 286, 77-84 (2004).</li><li>Fueger, P. T., Heikkinen, S., Bracy, D. P., Malabanan, C. M., Pencek, R. R., Laakso, M., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hexokinase+II+partial+knockout+impairs+exercise-stimulated+glucose+uptake+in+oxidative+muscles+of+mice.">Hexokinase II partial knockout impairs exercise-stimulated glucose uptake in oxidative muscles of mice.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 285, 958-963 (2003).</li><li>Fueger, P. T., Hess, H. S., Posey, K. A., Bracy, D. P., Pencek, R. R., Charron, M. J., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+exercise-stimulated+muscle+glucose+uptake+by+GLUT4+is+dependent+on+glucose+phosphorylation+capacity+in+the+conscious+mouse.">Control of exercise-stimulated muscle glucose uptake by GLUT4 is dependent on glucose phosphorylation capacity in the conscious mouse.</a> J. Biol. Chem. , (2004).</li><li>Fueger, P. T., Li, C. Y., Ayala, J. E., Shearer, J., Bracy, D. P., Charron, M. J., Rottman, J. N., Wasserman, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+kinetics+and+exercise+tolerance+in+mice+lacking+the+GLUT4+glucose+transporter.">Glucose kinetics and exercise tolerance in mice lacking the GLUT4 glucose transporter.</a> J. Physiol. 582, 801-812 (2007).</li><li>Shearer, J., Coenen, K. R., Pencek, R. R., Swift, L. L., Wasserman, D. H., Rottman, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+chain+fatty+acid+uptake+in+vivo:+comparison+of+[125I]-BMIPP+and+[3H]-bromopalmitate.">Long chain fatty acid uptake in vivo: comparison of [125I]-BMIPP and [3H]-bromopalmitate.</a> Lipids. 43, 703-711 (2008).</li></ol>

Keine Interessenskonflikte erklärt.

Die hyperinsulinämische-euglykämische Clamp-oder Insulin-Clamp, gilt weithin als der &quot;Goldstandard&quot;-Methode zur Beurteilung der Wirkung von Insulin in vivo. Diese Technik hat mehrere Arten einschließlich des Menschen, Hunde, Ratten und Mäusen angewendet worden. Angesichts der wachsenden Zahl von transgenen Mausmodellen für Stoffwechselerkrankungen, hat die Miniaturisierung der Technik für den Einsatz in der Maus bedeutende Fortschritte zu metabolischer Forschung zur Verfügung gestellt. Während die Konzepte hinter den Insulin-Clamp unkompliziert sind, in der Praxis gibt es verschiedene Ansätze für die Durchführung von Insulin Clamp-Experimenten. Dies ist kein trivialer Punkt, denn die Art und Weise, in der das Experiment durchgeführt wird beeinflusst Ergebnisse 1. Hier präsentieren wir Ihnen das Protokoll von der Vanderbilt MMPC verwendet. Der wesentliche Unterschied zwischen unserem Protokoll und das der anderen ist, dass wir einen arteriellen Katheter verwenden für den Erhalt von Blutproben. Dies ist im Gegensatz zu den weiter verbreitete Ansatz der obtaining Blutproben durch Abtrennen der Spitze des Schwanzes 4, 7, 11, 12, 14-17. Der Vorteil der Entnahme aus einem arteriellen Katheter ist, dass das Experiment in einer bewussten und hemmungslos Maus durchgeführt wird. Probenahme aus dem Schwanz erfordert oft Zurückhaltung und erhöht Indizes von Stress, wenn große Blut-Proben 1 erworben werden. Stress Hormone stimulieren endogenen Glukose-Produktion und beeinträchtigen Glucoseverwertung 18, 19, möglicherweise, um den Eindruck einer Insulin-resistenten Phänotyp. Probenahme aus den abgetrennten Schwanz benötigen möglicherweise spezielle Institutional Animal Care und Verwenden Ausschusses Genehmigung wegen ihrer stressigen Natur. Die arterielle Katheterisierung Verfahren wurde entwickelt, um die Belastung der Maus Abtrennen des Schwanzes zu vermeiden. Ein wesentlicher Aspekt der Durchführung Insulin Klammern ist die Fähigkeit, Normoglykämie aufrecht zu erhalten. Es gibt keine Algorithmen, die korrekt vorhersagen können, wie die GIR basierend auf Blutzuckerwerte angepasst werden sollte. Wie die Chirurgie,Personal führt Insulin Clamp-Experimenten wird tüchtig in die Aufrechterhaltung angemessener Normoglykämie nur durch Erfahrung. Es ist wichtig zu beachten, dass aufgrund ihrer höheren Stoffwechselrate die Daten von der Maus-Studien gewonnen werden grundsätzlich laut. Dies macht die komplette Präsentation von Daten, einschließlich Zeit-Verläufe von Glukose und GIR und absolute Werte für Plasma-Insulin, Endora, Rd und Rg entscheidend für die Fähigkeit von jedem Leser die Ergebnisse zu interpretieren. Die hohe Glukose-Flussraten in der Maus (ca. 5-mal höher als die Rate bei Menschen) garantieren eine hohe Frequenz von Glukose Probenahme. Während das Blutvolumen der Maus beschränkt ist, ist ein Minimum Sampling-Frequenz von einmal alle 10 Minuten notwendig, um sicher sein, dass eine ausreichende Klammer erreicht worden ist. Wie in Abbildung 4 dargestellt ist, kann Klemme Insulinspiegel werden unterschiedlich zwischen den Gruppen. Faktoren wie Ernährung Interventionen transgenen Manipulationen oder Unterschiede in der Hintergrund-Stämme können sich auf fasting Insulinspiegel, die anschließend beeinflussen können Klemme Insulinspiegel. Interpretation der Ergebnisse, wenn Klemme Insulinspiegel unterschiedlich sind problematisch sein kann. Dies kann experimentell, indem Pilotversuchen zur Insulin-Infusion Preise erzielen, die entsprechende Klemme Insulinspiegel zwischen den Gruppen zu erreichen wählen Sie angesprochen werden. Alternativ können Somatostatin zur Pankreas-Sekretion hemmen und Insulin und Glukagon kann experimentell kontrollierten Raten ersetzt werden. Dieser Ansatz wird häufig auch in Insulin-Klemmen an Ratten als Mäuse getan. Wenn dieser experimentellen Ansätze nicht getroffen werden, kann der Steady-State-GIR der Klemme Insulinspiegel normalisiert werden, oder eine Insulin-Empfindlichkeit-Index (S I) kann von Clamp-Daten wie S I = GIR / (G • DELTA), wo abgeleitet werden G ist die Steady-State-Glucose-Konzentration und DELTA ist der Unterschied zwischen Fasten und Klemme Insulin-Konzentrationen. Eine Annahme entweder mit Ansatzes ist, dass die Klemme Insulin erreicht wirdinnerhalb des Bereichs, wo die Insulinsensitivität linear auf den Insulinspiegel ist nach der Gruppe untersucht verwandt. Diese letztere Annahme ist nicht anwendbar, beim Vergleich von Insulin resistent und Insulin empfindlicher Gruppen. Idealerweise sollte ein Insulin-Dosis-Wirkungs-Kurve generiert, um die entsprechenden Insulin-Infusion zu wählen. Da jedoch die Voraussetzung für weitere Experimente, ist dies selten getan. Die Vielseitigkeit von arteriellen Katheter zur Verfügung gestellt erstreckt sich auf experimentelle Ansätze jenseits euglykämische Klammern. Zum Beispiel kann hyperglycemic Klammern, in denen Glukose bei einem variablen Zinssatz zu Hyperglykämie gegenüber Nüchternglukose halten infundiert wird, verwendet werden, um endogenen Pankreasfunktion in vivo 2, 20, 21 zu beurteilen. Die Messung der ersten Phase der Insulinsekretion bei diesem Test erfordert häufige Übernahme von Blutproben (dh alle 2-5 min), was nicht machbar ist, wenn den Erhalt einer Probe von der Spitze des Schwanzes. Darüber hinauserhöhten Katecholaminen aus tail Probenahme beeinträchtigen können Insulinsekretion und erhöhen Glucagonsekretion 22. Das Insulin Clamp-Protokoll kann auch so modifiziert, dass für die Glukosewerte zu relativen Hypoglykämien fallen zu Gegen-regulatorische Antwort 2, 23, 24 zu beurteilen. Arterielle Katheter können auch verwendet werden, um die Dynamik des Glukosestoffwechsels während des Trainings 25-30 beurteilen. Das ist deutlich vorteilhaft gegenüber herkömmlichen Ansätzen bei einzelnen Zeitpunkten durchgeführt Pre-und Post-Sport oder in isolierten Muskeln ex vivo. Die hier vorgestellten Verfahren kann auch verwendet werden, um nicht nur Glukose, aber auch Fettsäure-Stoffwechsel 31 zu beurteilen.

hyperinsulinemic-euglycemic clamps in conscious, unrestrained mice

Typ 2 Diabetes ist durch einen Defekt in der Insulin-Wirkung gekennzeichnet. Die hyperinsulinämische-euglykämische Clamp-oder Insulin-Clamp, gilt weithin als der &quot;Goldstandard&quot;-Methode zur Beurteilung der Wirkung von Insulin in vivo. Während einer Insulin-Clamp ist Hyperinsulinämie durch einen konstanten Insulin-Infusion erreicht. Normoglykämie wird über eine gleichzeitige Glukose-Infusion mit einer variablen Rate beibehalten. Diese Variable Glukose Infusionsrate (GIR) wird durch die Messung des Blutzuckers in kurzen Abständen während des gesamten Experiments und die Anpassung der GIR entsprechend bestimmt. Die GIR ist bezeichnend für die Ganzkörper-Insulinwirkung, wie die Mäuse mit erhöhter Wirkung von Insulin erfordern eine größere GIR. Das Insulin Clamp kann die Verabreichung von Isotopen-2 greifen [14 C] Desoxyglucose zu beurteilen, Gewebe-spezifische Glukoseaufnahme und [3 bis 3 H]-Glucose auf die Fähigkeit von Insulin, um die Rate der endogenen Glukose Aussehen (Endora) zu unterdrücken, einem Marker der Beurteilung Glukoneogenese in der Leber und zur Anregung derRate der Ganzkörper-Glukose Verschwinden (Rd). Die Miniaturisierung der Insulin-Clamp für den Einsatz in der genetischen Mausmodellen der Stoffwechselkrankheit zu erheblichen Fortschritten in der Diabetes-Forschung führte. Methoden zur Durchführung von Insulin Klammern variieren zwischen den Labors. Es ist wichtig zu beachten, dass die Art und Weise, ein Insulin-Clamp durchgeführt wird, kann erhebliche Auswirkungen auf die erzielten Ergebnisse. Wir haben eine umfassende Bewertung der verschiedenen Ansätze zur Durchführung von Insulin Klemmen in bewusster Mäusen 1 sowie eine Bewertung der metabolischen Reaktion von vier häufigsten verwendeten Inzucht-Mausstämme mit verschiedenen Clamp-Technik 2 veröffentlicht. Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Durchführung von Insulin Klemmen auf bewusste, hemmungsloser Mäusen durch die Vanderbilt Maus Metabolic Phänotypisierung Center (MMPC; URL: www.mc.vanderbilt.edu / MMPC) entwickelt. Dies umfasst eine Beschreibung der Verfahren zum Implantieren Katheter während der Insulin Clamp verwendet. Das Protokoll, das von den BeschäftigtenVanderbilt MMPC nutzt ein einzigartiges Zwei-Katheter-System 3. Ein Katheter wird in die Jugularvene für Infusionen eingesetzt. Ein zweiter Katheter wird in die Halsschlagader, die zur Blutentnahme ermöglicht, ohne die Notwendigkeit, zurückzuhalten oder Griff mit der Maus eingefügt. Diese Technik bietet einen wesentlichen Vorteil für die am weitesten verbreitete Methode zur Gewinnung von Blutproben während der Insulin-Klemmen, die aus dem abgetrennten Spitze des Schwanzes Probe. Im Gegensatz zu dieser letzteren Methode, Probenahme aus einem arteriellen Katheter ist nicht belastend für die Maus 1. Wir beschreiben auch Verfahren zur Verwendung Isotopen-Tracer-Infusionen, um Gewebe-spezifische Wirkung von Insulin zu bewerten. Wir bieten auch Richtlinien für die angemessene Präsentation der Ergebnisse aus der Insulin-Klemmen erhalten.

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Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Die hyperinsulinämische-euglykämische Clamp-oder Insulin-Clamp, ist der Goldstandard für die Beurteilung der Wirkung von Insulin<em&gt; In vivo</em&gt;. Ein Verfahren zur Durchführung von Insulin Klemmen bei Mäusen beschrieben. Dieser umfasst ein Verfahren zum arteriellen Katheter, dass Experimente in bewusste, hemmungsloser Mäusen mit minimalem Stress durchgeführt werden ermöglicht.

Hyperinsulinämische-euglykämische Schellen in dem Bewusstsein, Unrestrained Mäuse

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

hyperinsulinemic-euglycemic-clamps-in-conscious-unrestrained-mice

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JoVE Journal

Medicine

93.7K Aufrufe.  Sanford-Burnham Medical Research Institute at Lake Nona. Die hyperinsulinämische-euglykämische Clamp-oder Insulin-Clamp, ist der Goldstandard für die Beurteilung der Wirkung von Insulin In vivo. Ein Verfahren zur Durchführung von Insulin Klemmen bei Mäusen beschrieben. Dieser umfasst ein Verfahren zum arteriellen Katheter, dass Experimente in bewusste, hemmungsloser Mäusen mit minimalem Stress durchgeführt werden ermöglicht.