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Aufzeichnung der funktionellen Barriereintegrität auf bEnd.3 vaskulären Endothelzellen mittels transendothelialer elektrischer Widerstandsdetektion

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09:03 min

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September 29th, 2023

DOI :

10.3791/65938-v

September 29th, 2023

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Fuhan Fan¹, Hong Jiang¹, Ya Hou¹, Yi Zhang¹^,²^,³, Qipeng Zhao⁴, Yong Zeng¹^,², Xianli Meng¹^,²^,⁵, Xiaobo Wang²

¹School of Pharmacy/School of Modern Chinese Medicine Industry, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ²Meishan Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ³School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, ⁴School of Pharmacy, Ningxia Medical University, ⁵Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy/Academy for Interdiscipline, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Transkript

Aktuelle Studien verwenden in der Regel Permeabilitätstests und die damit verbundene Proteinexpression, um die Genauigkeit des TEER-Nachweises zu überprüfen. Das BHS-Modell von Monolayer-Zellen ist für das Wirkstoff-Screening weniger effektiv, und die Verwendung von mehr Zellen erschwert die Konstruktion des Modells. Das Protokoll dieser Studie ist relativ einfach, da das nicht-invasive Verfahren es ermöglicht, die Zellproben nach dem TEER-Nachweis in anderen Experimenten zu verwenden.

Der Nachweis von TEER zur Beurteilung der Permeabilität von Zellmodellen kann das Screening von Medikamenten zur Behandlung und Prävention des zentralen Nervensystems beschleunigen, um die Erfolgsrate der Entwicklung neuer Medikamente zu erhöhen. In Zukunft werden wir die Expression des Tight-Junction-Proteins in Zellen des oberen Kompartiments der Brustwand nachweisen, um zu überprüfen, ob TEER-Testergebnisse die Integrität der BHS-Barrierefunktion effektiv darstellen können.

Zusammenfassung

Dieses Protokoll beschreibt ein zuverlässiges und effizientes In-vitro-Modell der Blutschranke des Gehirns. Die Methode verwendet zerebrale vaskuläre Endothelzellen der Maus bEnd.3 und misst den elektrischen Widerstand der Transmembran.

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Aufzeichnung der funktionellen Integrit t der Barriere

BEnd 3 Vaskul re Endothelzellen

Transendotheliale elektrische Widerstandsdetektion

Blut Hirn Schranke

Mikrovaskul re Endothelzellen

In vitro Modelle

neurologische Erkrankungen

pharmakologische Behandlungen

Monolayer BHS Zellmodell

Zellbarrierefunktion

Epithelzellvoltmeter

elektrischer Transmembranwiderstand

CoCl2 induzierte hypoxische Zellen

Erkrankungen des Zentralnervensystems

Kapitel in diesem Video

0:00

Introduction

1:17

Culture of bEnd·3 Cells and Cell Viability After CoCl₂ Treatment

3:47

In Vitro Blood‐Brain Barrier Model Assembly for Measurement of TEER

7:24

Barrier Destruction and Statistical Analysis After TEER Measurement in an In Vitro Blood‐Brain Barrier Model

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