Dissektion, histologische Verarbeitung und Genexpressionsanalyse von murinem supraklavikulärem braunem Fettgewebe

1 Unser Labor konzentriert sich auf die Etablierung von2 supraklavikulärem braunem Fettgewebe 3 oder SCBAT als wertvolles Depot 4 für die Analyse von braunem Fett aufgrund seiner anatomischen Ähnlichkeiten 5 mit menschlichem braunem Fettgewebe. 6 Dieses Protokoll zielt darauf ab, die Zugänglichkeit7 der SCBAT-Forschung zu verbessern. 8 Dieses Depot kann aufgrund seiner geringen Größe 9 und der Nähe zu großen Venen im Hals einschüchternd wirken. 10 Daher ist es zwingend erforderlich, 11 ein einfaches Verfahren zum Extrahieren und Verarbeiten von SCBAT bereitzustellen.

12 Unsere Methodik zeichnet sich13 erstens durch die Verwendung eines Präpariermikroskops 14 bei der Extraktion von SCBAT aus. 15 Dies erhöht die Präzision 16 und die Extraktionseffizienz 17, die beide entscheidend sind, wenn 18 mit einem so kleinen Gewebedepot gearbeitet wird. 19 Zweitens homogenisierten wir die gefrorenen SCBAT-Proben 20, bevor wir eine Genexpressionsanalyse 21 durchführten, um die RNA-Ausbeute zu erhöhen und 22 eine so geringe Menge an verfügbarem Gewebe zu kompensieren.

23 Wir konzentrieren uns derzeit auf die Definition24 der genetischen Auskleidungskante von SCBAT, 25 auf die Identifizierung der Verklärungsnetzwerke 26, die seine Entwicklung regulieren, 27 und die Entwicklung eines zerebralen Modells 28 zur Erforschung seiner physiologischen Funktion beim Menschen.