Mikroinjektion von Embryonen zur Transgenese bei Drosophila

Die Transgenese in Drosophila ist essentiell für die Untersuchung der Genfunktion auf der Ebene des Organismus. Die Mikroinjektion von Embryonen ist ein entscheidender Schritt für die Konstruktion transgener Fliegen. Hier nehmen wir die phiC31-Integrase-vermittelte Transgenese in Drosophila als Beispiel und stellen ein detailliertes Protokoll für die Mikroinjektion von Embryonen zur Transgenese in Drosophila vor.

Injektionsnadeln, deren Spitzen von einer Schleifmaschine abgeschrägt werden, werden in der Regel nicht verstopft oder lösen keine großen zytoplasmatischen Leckagen aus. Allerdings kann die Schleiflösung während des Schleifvorgangs in die abgeschrägte Spitze einer Nadel eindringen und die Schleiflösung im Inneren der Spitze trocknet auf natürliche Weise nicht schnell aus. Unser Protokoll verwendet eine Fußluftpumpe mit einem Manometer, um Luftdruck auf eine Nadel auszuüben, während sie ihre Spitze schleift.

Dadurch wird ein Absaugen der Schleiflösung verhindert, wodurch verhindert wird, dass die Schleiflösung in die abgeschrägte Spitze gelangt, so dass die abgeschrägte Nadel sofort verwendet werden kann.